12名词解释兽医微生物

.兽医微生物复习题一、名词解释1.微生物:微生物是存在于自然界中的一群个体微小、构造简单、肉眼不可见，必须借助显微镜放大数百倍甚至数万倍才能观察清楚的一类微小生物的总称。2.病原微生物：但凡能够引起动、植物疾病的微生物称为病原微生物，有细菌、病毒包括霉菌和酵母菌、放线菌、螺旋体、支原体、立克次体、衣原体、病毒等。3.病原体：指可造成人或动物感染疾病的微生物包括细菌、病毒、立克次氏体、寄生虫、真菌或其他媒介微生物重组体包括杂交体或突变体。病原菌pathogenic bacteria是指那些导致机体发病的细菌，是一群高度特化了的微生物，为了自身的生存，已适应而且必须在宿主生物体内持续存在或增殖，有时可造成宿主发病。4.细菌:是一类个体微小、有细胞壁的单细胞原核微生物。它们的个体微小，形态构造简单，细胞壁坚韧，以二分裂方式繁殖。5.L型细菌：将遗传稳定的细胞壁缺陷的细菌，包括原生质体及原生质球，称为L型细菌。革兰氏阳性菌l型称为原生质体protoplast，必须生存于高渗环境中。革兰氏阴性菌l型称为原生质球spheroplast,在低渗环境中仍有一定的抵抗力。6.菌落：即某个细菌在适合生长的固体培养基外表或内部，在适宜的条件下，经过一定时间的培养，多数为18-24h，分裂繁殖出巨大数量的菌体，形成一个肉眼课件的，有一定数量的独立群体，成为菌落，又称克隆。7.间体：是胞膜凹入胞质内形成的一种囊状、管状或层状的构造。其功能与真核细胞线粒体相似，与呼吸有关，并有促进细胞分裂的作用。8.质粒：是指细菌、酵母菌和放线菌等生物游离在核体以外的小型环状双股DNA分子。R因子：与抗药性有关；F因子：与有性接合有关；其他质粒：与抗生素，色素合成有关；基因工程中作为目的基因载体。9.异染颗粒：是某些细菌细胞质中一种特有的酸性小颗粒。它对碱性染料的亲和力特别强。10.荚膜：某些细菌在其生活过程中可以在细胞壁的外周产生一层包围整个菌体，边界清楚的黏液样物质，称为荚膜。11.芽孢：某些细菌在其生长发育后期 ， 在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量极低、抗逆性极强的休眠体。未形成芽孢的菌体称为繁殖体或休眠体。12.鞭毛：生长在某些细菌体表的长丝状蛋白质附属物，称为鞭毛，其数目为一至数条，具有运动功能。13.细菌生长曲线：将细菌培养于适宜的液体培养基中，定时取样测定其细菌总数和活菌数，以活菌数的对数为纵坐标，以培养时间为横坐标，可描绘出一条细菌生长的典型曲线，该曲线称为细菌生长曲线。细菌的生长曲线分为缓慢期、对数期、稳定期和衰亡期4个时期。细菌的这种生长曲线是在体外人工培养条件下观察到的，对细菌生长规律的研究有重要意义。14.SPF动物:即无特定病原体动物，是指不存在某些特定的具有病原性或潜在病原性的微生物的动物。15.无菌法：为防止任何微生物进入人和动物机体以及其他物品而采取方法均叫无菌法，其操作方法叫无菌操作。16.巴氏消毒法：亦称低温消毒法，冷杀菌法，是一种利用较低的温度杀灭液态食品中的病原菌或特定微生物，而又不致严重损害其营养成分和风味的消毒法。17.滤过除菌法：是通过机械、物理阻留作用将液体或空气中的细菌等微生物出去的方法，但滤过出尽常不能除去病毒、支原体以及细菌L型等小颗粒。18.细菌素：是某种细菌产生的一种均有杀菌作用的蛋白质，只能作用于与它不同菌株的细菌以及与它来源关系相近的细菌。例如大肠杆菌所产生的大肠杆菌素，除作用于某些型别的大肠杆菌外，还能作用于亲缘关系相近的沙门菌、巴氏杆菌等，根据其分子量的大小可分为多肽细菌素，蛋白质细菌素和颗粒细菌素三类。19.毒力：又称致病力，表示病原体致病能力的强弱。对细菌性病原体来说，毒力就是菌体对宿主表的吸附，向体内侵入，在体内定居、生长和繁殖，向周围组织的扩散蔓延，对宿主防御功能的抵抗，以及产生损害宿主的毒素等一系列能力的总和。 同一细菌的不同毒株，其毒力不一样。20.类毒素：利用外毒素对热和某些化学物质敏感的特点，用0.3-0.4%甲醛处理，使其毒性完全丧失，但仍保持抗原性，这种经处理的外毒素为类毒素，常用来预防注射。也可用类毒素注射动物如马，以制备外毒素的抗体，称为抗毒素，作治疗用。21.基因转移：供体细菌间接或直接地将局部遗传物质单向传递给受体细菌，从而导致受体细菌发生基因重组的现象，称为基因转移。22.包含体：是某些病毒感染细胞，在胞浆或或核中产生的特征性的形态变化，通过固定染色后在光镜下可见。大小不一、形态各异，单一或多个，多为圆形、卵圆形或不定形。常用于病毒病的诊断，嗜酸伊红成粉红或嗜碱苏木精成蓝色。包涵体：病毒感染宿主细胞后，细胞的胞核或胞质内有病毒颗粒或未装配的病毒病毒成分组成的在光学显微镜下可见到的团块，称为包涵体。23.串珠试验：在含青霉素0.5IU/mL的培养基中，幼龄炭疽杆菌因细胞壁的肽聚糖合成受到抑制，原生质体相互连接成串，称为“串珠反响。24.卡介苗 ：卡氏(Calmette)和介氏(Guerin)二人将牛分支杆菌在培养基上经13年230次传代，使有毒菌株变为毒力减弱的菌株，培育出无毒的结核分支杆菌，对人、牛无致病性，用来制造疫苗，预防人的结核病，此种疫苗称卡介苗(BCG)。它可以使机体产生免疫力。25.病毒：是由蛋白质包裹的只含一种核酸(DNA或RNA)必须进入易感宿主细胞内才能经行增殖的感染因子。26.病毒颗粒(病毒子) ：成熟的，构造完整的，具有可感染性的单个病毒，等同于病毒体、病毒粒或病毒子。27.朊病毒：是动物与人传染性海绵状脑病的病原，没有核酸，是具有传染性的蛋白颗粒。28.病毒复制：病毒增殖只在活细胞内进展，是以病毒基因为模板，在酶的作用下，分别合成其基因及蛋白质，再组装成完整的病毒颗粒，这种方式称为复制。29.二倍体细胞株：将长成的原代细胞消化分散成单个细胞，继续培养传代，获得的细胞染色体数与原代细胞一样的二倍体，又称继代细胞。此种细胞数目可扩大，对病毒的易感性那么根本无变化。30.噬菌体：是感染细菌、支原体、螺旋体、放线菌以及蓝细菌等的一类病毒，亦称细菌病毒。二、问答题1、与医学相关的微生物有哪些？与医学相关的微生物有：病毒、细菌、真菌、放线菌、支原体、衣原体、立克次氏体、螺旋体。2、微生物学的先驱有那些？他们的主要成绩是什么？先驱有吕文虎克、巴斯德、科赫十七世纪，荷兰人吕文虎克用自制的、能放大160200倍的显微镜第一次看到了微生物巴斯德是微生物的奠基人。(1) 发现并证实发酵是由微生物引起的；(2) 彻底否认了“自然发生学说；著名的曲颈瓶试验无可辩驳地证实，空气内确实含有微生物，是它们引起有机质的腐败。(3) 免疫学预防接种 首次制成狂犬疫苗(4) 其他奉献巴斯德消毒法：6065作短时间加热处理，杀死有害微生物微生物的另一位奠基人是一位德国医生柯赫1微生物学根本操作技术方面的奉献n 细菌纯培养方法的建立n 设计了各种培养基，实现了在实验室内对各种微生物的培养2对病原细菌的研究作出了突出的奉献：n 具体证实了炭疽杆菌是炭疽病的病原菌；n 发现了肺结核病的病原菌1905年获诺贝尔奖n 证明某种微生物是否为某种疾病病原体的根本原那么著名的柯赫原那么 Lister 建立消毒技术3、微生物学有哪些特性？体积小面积大 吸收多转化快 生长旺繁殖快适应强易变异 分布广种类多4、细菌的根本构造和特殊构造有哪些？细菌都具有细胞壁、细胞膜、细胞质、核体等根本构造。有些细菌在一定条件下还具有特殊构造细菌的特殊构造包括荚膜、S层、鞭毛、菌毛、芽胞等。5、细菌形态、构造特征在细菌鉴定中有何作用？各种细菌菌落在大小，色泽、外表性状均有各自的特征，菌落的特征与细菌个体的形态，构造的特征密切，通过观察细菌菌落特征，可以推测该细菌的种类，通常用固体培养基别离培养菌落，进展细菌的鉴定。6、绘出细菌的根本构造和特殊构造图。7、细菌群体生长繁殖分几个时期？各个时期有何特点？ 细菌群体的生长繁殖有4个时期：缓慢期、对数期、稳定期、衰亡期。缓慢期：是细菌初到新环境的适应期。此时菌体增大、代谢活泼、合成所需酶系统。RNA含量明显增多，DNA无变化，此时细菌数并不增加。l-4h。对数期：细菌迅速分裂繁殖，活菌数以恒定的几何级数增长，生长曲线近斜线。该期病原菌致病力最强，其形态染色及生理均较典型，对抗菌药物等的作用较为敏感。6-10h。稳定期：因营养消耗、代谢产物蓄积等，此时新繁殖的活菌与死菌平衡，活菌数最多。该期形态染色不特异。产生毒素等代谢产物。一般持续时间8h。衰亡期：细菌死亡速度加大，繁殖速度变小。如不移植到新培养基，最终可全部死亡。此期菌体变形或自溶，染色不典型，难以鉴定。注：此过程只在体外人工条件下可观察到。8.细菌生长繁殖需要哪些条件？答：人工培养细菌，除需要提供充足的营养物质外，商需有适宜的酸碱度，适宜的温度及必要的气体环境，（1） 营养物质包括碳源，氮源，无机盐，生长因子，水（2） 不同细菌对温度有不同的适应范围，各种细菌又有各自的可生长温度范围及最适温度（3） PH影响微生物的生长，每种细菌均有一个可适应的PH范围及最适生长PH（4） 根据细菌对氧的要求，可将其分为需氧菌，厌氧菌及兼行厌氧菌9.试述湿热灭菌的原理和种类答：原理：高温对微生物具有明显的致死作用，但不同微生物对热的敏感性有明显差异，细菌的繁殖体最为敏感，其次是真菌和病毒，细菌芽孢对热有很强的抵抗力。用高温处理微生物时，可对菌体蛋白质、核酸酶系统等产生直接破坏作用，热力可使蛋白质中的氢键破坏，使之变性或凝固，使双股DNA分开为单股，受热而活化的核酸酶使单股DNA断裂，导致菌体死亡。种类：煮沸法 巴氏消毒法主要用于牛乳等消毒流通蒸汽消毒法常压蒸汽消毒法流通蒸汽灭菌法间歇消毒法5高压蒸汽灭菌法10.简述基因水平的柯赫法那么答：1应在治病菌株中检出某些基因或其产物，而无毒力菌株中没有 2如有毒力菌株的某个基因被破坏，那么菌株的毒力应减弱或消除。或者将此基因克隆到无毒菌株内，后者成为有毒力菌株。 3将细菌接种动物时，这个基因应在感染的过程中表达 4在接种动物检测到这个基因产物的抗体，或产生免疫保护该法也适用于细菌以外的微生物，如病毒。11.试述内毒素与外毒素的区别工程外毒素内毒素产生菌革兰氏阳性菌为主革兰氏阴性菌化学成分蛋白质脂多糖LPS致热性通常不耐热极为耐热制病特异性不同外毒素各不一样不同病原菌内毒素作用根本一样毒性强，往往致死弱，很少死亡抗原性完全抗原，抗原性强不完全抗原抗原性弱制成类毒素能，用甲醛处理不能热稳定比差耐热性强12.试述细菌毒力减弱的方法答：1长期在体外人工培养基上继代培养 2在高温最适生长温度条件下培养 3在含有特殊化学物质的培养基中培养 4在特殊气体条件下培养 5通过不易感动物 6通过基因工程方法13.常见的细菌变异现象有哪些？答：1形态和构造变异：细菌外形杆状圆球形，有鞭毛无鞭毛 2菌落形态变异：a.SR变异 正常的光滑型菌落可能变成粗糙型称为SR变异，它往往伴随着其他重要特性的改变，包括毒力的丧失和抗原构造的改变 b.粗糙型转变为光滑性称为RS回归变异 3毒力变异：病原菌的毒力可以由强变弱或由弱变强，在自然情况下和人工诱变都可以发生 4耐药性变异：临床上选用敏感药物，合理使用抗生素 5代谢变异：细菌在代谢过程中原来能合成某种营养成分的特性，会变异失去这种能力，成为所谓营养缺陷型，有利于人为提供该种营养成分 6抗原性变异：在环境条件的影响下，一些细菌失去某种抗原或增添某种抗原14.何为基因重组？细菌基因转移和重组有几种方式？答：基因重组是由于不同DNA链的断裂和连接而产生DNA片段的交换和重新组合，形成新的DNA分子的过程。主要方式：转化，转导，接合，原生质体融合和转染。15.试述人工培养细菌的用途及其意义？答：用人工的方法提供细菌在动物体内生长繁殖需要的根本条件，到达培养细菌，进展鉴定及进一步利用的目的。因此，细菌的人工培养技术是微生物学研究和实践的十分重要的手段。表现在医学中的应用，在工农业产生中的应用，在基因工程中的应用。16.试述正常菌群对机体的作用？、答：1营养: 消化道正常菌群不仅从宿主消化道获取营养，而且通过帮助消化、合成维生素等对宿主起营养作用. (2)免疫：正常菌群对其宿主的体液免疫、细胞免疫和局部免疫均有一定影响，尤其是对局部免疫的影响更大.(3)生物拮抗:正常菌群对其包括致病菌在内的外籍菌入侵动物有一定程度的拮抗.17.细菌性病料如何进展微生物学诊断答:(1)形态观察：涂片、染色，将病料涂片触片染色，镜检 2别离培养鉴定：适宜培养基培养与别离，观察菌落形态。进一步鉴定，还要做生化鉴定、血清学鉴定血清学鉴定包括凝集反响、琼扩反响、标记抗体等 3动物实验：选择敏感动物接种18.金黄色葡萄球菌的致病因素及所致疾病.答:毒力因子: 毒素(毒素、肠毒素) 酶凝固酶、耐热核酸酶 (1)毒素：对多种哺乳动物红细胞有溶血作用，其原理是毒素分子插入红细胞膜疏水区，形成微孔，红细胞溶解。引起小血管收缩，导致局部缺血、坏死。 2肠毒素：外毒素，耐热100 30min，抵抗消化道蛋白酶的水解作用，引起人类中毒，大多数动物对此毒素又很强的抵抗力，血清型A.B.C1.C2.C3.D.E.G.H均可引起急性胃肠炎即食物中毒。 3凝固酶：凝固酶是鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标。 作用：能使含有抗凝剂的人兔血浆发生凝集 特点：耐热;已被蛋白酶分解破坏 分类：1.游离凝固酶类似凝血酶原样物质，经激活后可使血浆中纤维蛋白原变成纤维蛋白。保护病菌免受血清中杀菌物质的破坏，痛是可使葡萄球菌感染易于局限化。2.结合凝固酶结合在菌体外表，与血浆中纤维蛋白结合后是血浆凝固在菌体外表，阻止吞噬细胞的吞噬，即使被吞噬也不易被杀灭4耐热核酸酶：1.此酶能迅速分解核酸，利于病原菌扩散 2.目前也将该酶的检测作为鉴定致病菌株的重要指标之一。 19.试述肠杆菌科细菌的特性？答：肠杆菌科细菌的共同特性：1形态与构造：中等大小的两端钝圆的革兰氏阴性杆菌，多数有鞭毛、菌毛，少数有荚膜，无芽孢2培养特性：本菌为兼性厌氧菌，在普通培养基上生长良好，最适生长温度为37C，最适生长PH为7.2-7.4，麦康凯上形成形成红色菌落;在伊红美蓝上呈黑色带金属闪光的菌落；在SS琼脂上一般不生长或生长较差，生长者呈红色。一些致病菌在*血平板上呈溶血20.猪丹毒杆菌的微生物学诊断要点有那些？1显微镜检查：可采取高热期病猪耳静脉血作涂片，染色、镜检。死后可采取心血及新鲜肝、脾、肾、淋巴结等制成涂片，可革兰氏染色镜检，革兰氏阳性，蓝色。如发现少量典型杆菌，可初步确诊。如为慢性心内膜炎病例，可用心脏瓣膜增生物涂片，镜检。羔羊患关节炎病时，可检查关节滑膜囊液。2别离培养 别离培养时可用含有0.2%(W/V)的葡萄糖或5%10%无菌马血清(W/V)的半固体琼脂培养基。在血琼脂平皿经37，24h培养可形成透明、灰白色、露珠样小菌落，并形成溶血环。在麦糠凯上不生长，明胶穿刺生长特殊，沿着穿刺线向四周生长，如试管刷状，不液化明胶。3细菌鉴定：主要考虑与李氏杆菌鉴别诊断。4血清型鉴定：将待鉴定菌株的纯培养物参加1%甲醛灭活，经洗涤、高压、离心处理后制成沉淀原，与模式菌株的高免血清做琼脂扩散试验。21、试述炭疽芽孢杆菌的生物学特性。形态及染色特性 本菌为G+大型杆菌；无鞭毛不能运动，芽胞椭圆形。 动物组织内，此菌单在或连成25个的短链，相连的菌端平截而呈竹节状。炭疽杆菌在组织内可形成荚膜。 炭疽杆菌只有当暴露空气中的O2后，方能形成芽胞。在人工培养基中，本菌常形成长链。培养特性：需氧，对营养要求不高，普通培养中即能生长良好。在固体培养基外表：强毒菌株的菌落表现为粗糙型，菌落大而扁平，灰白色，不透明，外表较干而粗糙，边缘呈卷发状。在血琼脂上一般不溶血 在普通肉汤中培养24h后，培养液仍然透明，管底有白色絮状沉淀。液面无菌膜或菌环形成。生化特性：发酵葡萄糖，产酸而不产气，不发酵阿拉伯糖、甘露糖、木糖、VP试验阳性、不产生吲哚和硫化氢。抵抗力：炭疽杆菌繁殖体的抵抗力不大，60经30 60分钟，一般浓度的常用消毒剂，能于短时内将其杀死。在未解剖的尸体中，细菌可随腐败而迅速死亡。芽胞的抵抗力特别强大，在枯燥状态下可长期存活。炭疽芽胞需经煮沸1 2 h，121 高压灭菌 5 10 min，或 160 干热灭菌2 h方被杀死。常用的有效消毒剂是新配的20石灰乳或20漂白粉作用48 h。抗原构造：炭疽杆菌有以下四种主要抗原成分。菌体多糖抗原：这是细胞壁内存在的一种半抗原，与细菌毒力无关，性质稳定，经高温高压后，抗原性不被破坏，用于此菌鉴定和诊断。荚膜多肽抗原：仅见于有毒菌株，与毒力有关。保护性蛋白质抗原：这是炭疽杆菌生活过程中产生的细胞外蛋白质之一，具有免疫原性，能使机体产生抗炭疽感染的保护力。芽孢抗原：是芽孢的外膜层含有的抗原决定簇，构成特异性抗原，具有免疫原性和血清学诊断价值致病性：炭疽杆菌可引起各种家畜、野兽和人类的炭疽，牛、绵羊、鹿等易感性最强，引起败血症。犬猫食肉动物等有相当大的抵抗力，禽类一般不感染。毒力主要与荚膜和毒素有关。毒素由水肿因子、致死因子、以及保护性抗原3种亚单位构成。22、病毒的根本特征有哪些？病毒的根本特征：病毒一般以病毒颗粒viral particle或病毒子virion的形式存在，具有一定的形态、构造以及传染性。病毒粒子极其微小，测定其大小的单位通常用纳米nm),在电镜下才能观察。病毒的形态：多形性。各种病毒颗粒形态不一，但都具有蛋白质的衣壳及其包裹的核酸芯髓，衣壳与芯髓共同构成核衣壳。有的病毒核衣壳外还有嚢膜及纤突。衣壳由壳粒组成，呈20面体对称或螺旋状对称，少数为复合对称。构造：完整的病毒主要由核酸和蛋白质组成。每种病毒只含一种核酸，或是DNA，或是RNA；每种核酸有双股与单股、线状与环状、分节段与不分节段之分。病毒的蛋白质也有构造蛋白和非构造蛋白之分。脂质与糖是构成是嚢膜与纤突的组分，可被氯仿或乙醚等脂溶剂破坏。寄生生活没有核糖体和酶系统，不能独立进展代谢活动，必须在易感活细胞内寄生，利用宿主细胞的代谢系统，以核酸复制的方式增殖，有严格的细胞内寄生性。不能进展二分裂，通过特有的复制方法进展繁殖。病毒对抗生素不敏感、干扰素能抑制其增殖病毒无细胞构造23、试述病毒与其他微生物的主要区别。24、画出病毒颗粒的根本构造模式图。25、试述病毒别离培养的方法。实验动物：病毒必须在活细胞中方能进展生命活动，因此早期对病毒生物学特性的研究主要通过动物接种小鼠、大鼠、家兔、家禽等。以培养病毒。目前动物接种仅限于研究病毒或毒株的致病性或为确切诊断某种病毒为病原体。鸡胚接种个别病毒如流感病毒必须在鸡胚中进展别离培养。受精鸡胚的羊膜腔和尿囊腔均可用以别离流感病毒。组织细胞：静置、旋转其中细胞培养是培养病毒最常见的技术。26、何为病毒的一步生长曲线？一步生长曲线即以感染时间为横坐标,病毒效价为纵坐标,绘制出的病毒特征曲线。感染比MOI是指在一个系统中感染病毒的细胞数与细胞总数之比。在人工培养的细胞中，接种高MOI的病毒，所有细胞几乎同时受到病毒感染，如分析该培养系统的单个细胞，就可以代表病毒在病毒在整个体系中所有细胞的生长情况。应用这一方法，就可获得病毒一步生长曲线的结果，观察到病毒具有复制周期。一个完整的复制周期包括吸附、传入与脱壳、生物合成、组装与释放等步骤。27、病毒的复制周期包括哪些步骤？ 吸附：吸附敏感的宿主细胞是病毒复制的第一步。此过程包含静电吸附和特异性受体吸附两个阶段。病毒的配体位点与细胞外表的特异受体的结合 穿入与脱壳：动物病毒穿入宿主细胞并脱壳的过程可分为：在胞浆膜穿入并脱壳、在内吞小体脱壳、在核膜脱壳 生物合成：病毒的生物合成发生在隐蔽期，非常活泼，包括mRNA的转录、蛋白质或RNA的合成等 组装与释放：无囊膜病毒：简单的20面体病毒产生的壳粒可自我组装形成衣壳，进而包装核酸形成核衣壳。大多数无囊膜的病毒蓄积在胞浆或核内，当细胞完全裂解时，释放出病毒颗粒。有囊膜病毒：有囊摸的病毒以出芽的方式成熟，有细胞膜出芽及胞吐两种形式。28、试述细胞培养的特点。细胞培养中的每个细胞的生理特性根本一致，对病毒的易感性也相等。一块很小的组织可以制备过个细胞培养瓶，每瓶代表一个实验动物或鸡胚，而且有标准的一致性，无实验动物的个体差异性，从而对病毒的生长具有高度的准确性和可重复性。 细胞培养本身就能显示病毒的生长特性如细胞产生病变因此在很多情况下不需要用其他系统来证明病毒确实实生长。 细胞培养可以排除特异性抗体或者非特异性抑制因子的干扰。 细胞培养技术可以严格执行无菌操作。 在细胞培养中可以进展许多实验工程。 应用细胞培养的空斑技术可以进展病毒的克隆化。u 原代细胞 动物组织经胰蛋白酶等消化、分散，获得单个细胞，再生长于细胞培养皿中，原代细胞一般对病毒较易感，尤其是来源于胚胎或幼畜组织的细胞。最好用SPF动物的组织，以免携带潜伏的病毒，否那么会影响所需 病毒的生长。u 二倍体细胞株：将长成的原代细胞消化分散成单个细胞，继续培养传代。u 传代细胞系：这类细胞在体外可无限分裂，即可无限制传代。有的来源于肿瘤组织或转化的细胞.缺点：实验室传代日久，可污染支原体或隐性感染的病毒。由于担忧致肿瘤的潜在危险，传代细胞系一般不能用于制备疫苗。29、病毒的别离与鉴定包括哪些内容？一、病毒的别离培养一标本的采集、运送及处理1、标本的采集1采样的时间发病的初期2采集标本的容器无菌3标本的选择感染的部位2、标本的运送和处理尽早送到实验室，并立即处理和接种。较长时间冻存的标本，置于-70。研磨法处理细胞以释放病毒3、检样接种与感染表现将处理好的标本以适当途径接种与宿主、鸡胚或培养细胞。观察噬菌斑(Plaque)或细胞病变效应CPE)经第一次接种未出现病变时，需进展重复接种，即盲传，假设盲传多代仍无表现，可判定为阴性。二培养方法1、组织培养：将人或动物离体或组织或分散的活细胞，模拟体内的生理条件在试管或培养瓶加以培养，使之生存和生长，成为组织培养。目前多指单层细胞培养传代细胞系： 这是能在体外无限期传代的细胞系，来源与肿瘤细胞或细胞株传代过程中变异的细胞系。2、鸡胚接种：鸡胚对多种病毒敏感。一般采用孵化914天的鸡胚，根据病毒种类不同，将病毒标本 接种于鸡胚的不同部位，最常用的鸡胚接种部位有：羊膜腔、尿囊腔、绒毛尿囊膜和卵黄囊等。二、病毒的感染性测定 1、噬斑计数用于噬菌体的感染性测定2、蚀斑测定3、终点法TCID50)三、病毒的纯化与鉴定一形态学鉴定：电镜观察二纯化:超速离心、电泳、免疫学方法对细菌进展纯化三理化特性测定：如病毒的嚢膜可用氯仿、乙醚等有机溶剂溶解使病毒失去活性四免疫学诊断病毒的血清学鉴定1、补体结合试验2、中和试验3、血凝抑制试验4、间接免疫荧光检测5、酶联免疫吸附试验五、分子生物学方法病毒的分子生物学鉴定：聚合酶链式反响、核酸杂交、DNA芯片30、举例说明痘病毒感染的宿主谱类型。天花病毒，主要宿主：人，宿主范围窄，全球已消灭；痘苗病毒，主要宿主：人、牛、水牛、猪、兔，宿主范围宽，全世界均有分布。牛痘病毒，主要宿主：牛、人、大鼠、猫、沙鼠、大型猫科动物、象、犀牛宿主范围宽。分布于欧洲、亚洲。山羊痘病毒，主要宿主：绵羊、山羊。宿主范围窄。分布于亚非洲。31、试述新城疫病毒的检测手段和预防措施。诊断：必须作病毒别离及血清学试验或RT-PCR。可取脾、脑或肺匀浆，接种10日龄鸡胚尿囊腔别离病毒。病毒能凝集鸡、人及小鼠等红细胞，再作血吸附及HI试验鉴别。当存在循环抗体时，可以从肠道别离病毒。气管切片或抹片做免疫荧光染色诊断快速，但不太敏感。抗体检测只适用于对未进展免疫接种鸡群的诊断，可用HI试验。在慢性新城疫流行的地区，可用HI实验作为监测手段。别离株有必要进一步测定其毒力，如ICPI0.7，必须向OIE申报疫情。预防与控制：新城疫是OIE规定的A类疫病，许多国家都有相应的立法。控制措施包包括良好卫生及免疫。免疫通常采用由天然弱毒活毒苗及强毒株的油乳剂灭活苗。弱毒只可采用饮水、气雾、滴眼或滴鼻途径。小鸡7-10d一免、20-25d二免、50-60d三免，免疫后约3-7d可产生免疫保护，产蛋母鸡应每4个月免一次，实际生产中，弱毒苗雨灭活苗配合使用，方能收到较好的免疫效果。由于鸡在免疫接种后15d人能排除疫苗毒，因此有些国家规定在免疫接种后21d后才可调运。32、试述狂犬病毒的致病机理及综合性的预防措施。致病机理： 传播：主要传播途径为被带毒动物咬伤，是否发病取决于咬伤的部位与程度以及带毒动物的种类，病犬唾液具有高度传染性。病毒复制：病毒特异结合神经肌肉结合处的乙酰胆碱受体及神经节苷脂等受体。在伤口附近的肌细胞内复制，而后侵入外周神经系统，沿神经轴索上行至中枢神经系统，在脑的边缘系统大量复制，导致脑组织损伤，行为失控出现病症。病毒从脑沿传出神经扩散至唾液腺等器官，在其内复制，并以很高的滴度分泌到唾液中。在出现狂暴病症乱咬时，唾液具有高度感染性。免疫原性：病毒蛋白有很强的免疫原性。但在病毒从咬伤部位向中枢系统扩散的过程中，既不出现体液免疫应答，也不出现细胞免疫应答。综合性预防措施：采取“管、免、灭的方针 管理家犬-登记 对家养犬、猫进展弱毒疫苗免疫接种。注意监测带毒的野生动物。兴旺国家投放含弱毒疫苗的食饵控制狐狸和狼的狂犬病，对臭鼬和浣熊，那么方案使用金丝雀痘病毒为载体表达狂犬病毒糖蛋白的基因工程重组疫苗。 应及时扑灭狂犬病患畜。33、试述流感病毒的主要生物学特性。主要特性：病毒颗粒多形性，多球形，直径80-120nm，有囊膜及纤突，甲、乙型病毒纤突上有两种糖蛋白棒状的凝血素蛋白H、蘑菇状的神经氨酸酶蛋白N。基因组为8节段线状负股单股RNA。 病毒颗粒多形性，多球形，直径80-120nm 核酸类型为单股负股RNA,分八个节段丙型为七个节段，每一段RNA为一个基因，复制时发生节段之间的基因重组而导致变异，出现新的亚型。 病毒构造由内向外分三层，内层是核心，中层为内膜蛋白，外层为脂质双层包膜，其间插有血凝素和神经氨酸酶两种刺突。 抵抗力较弱，对枯燥、紫外线、酸及一般化学消毒剂敏感，高温易失活，但低温下可生存数周。 病毒别离采取鸡胚羊膜腔或尿囊腔接种；通过血凝试验和血凝抑制试验鉴定病毒是否生长及型别。如禽流感病毒AIV：禽流感的高致病力毒株对鸡有致病性，旧称“真性鸡瘟，现名高致病性禽流感HPAI，是OIE规定的通报疫病。高致病力毒株主要有H5N1和H7N7亚型的某些毒株。禽流感病毒能感染人，某些毒株甚至可不经过猪体混合再传染的过程，直接感染人。未裂解的H无传染性，只有在靶器官呼吸道及肠道组织的相应的蛋白酶作用下，日裂解为H1和H2，暴露融合肽段，通过融合进入宿主细胞。高致病力毒株与低致病力毒株的H裂解位点的氨基酸序列有差异。传播：大量病毒可通过粪排出，在环境中长期存活，尤其是在低温的水中。病毒通过野禽传播，特别是野鸭，即使在迁徙及越冬时也是如此。鸟也可带毒造成鸡群禽流感的流行。34、如何检测及控制流感病毒？诊断：别离病毒非常必要，对鉴定病原及其毒力均不可少。病料：一般从泄殖腔内采样，也可才肝、脾、血液、肺等。别离：接种8-10日龄鸡胚尿囊腔。鉴定：取尿囊液用鸡红细胞作HA-HI或ELISA等。进一步鉴定亚型需送国家级指定实验室完成。毒力分析：可将别离株接种鸡，或用别离毒作空斑试验，检测其毒力，有毒株能产生空斑，无毒株那么否。预防与控制：预防措施应包括在国际、国内及局部养禽场3个不同水平。高致病力禽流感被OIE列为A类疫病，一旦发生应立即通报。国内措施主要为防止病毒传人及蔓延。养禽场还应侧重防止由野禽传给家禽，要有隔离设施阻挡野禽。一旦发生高致病力禽流感，应采取断然措施防止扩散。灭活疫苗可作预防用。35、口蹄疫病毒有哪些血清型？解释其易发生抗原性漂移的原因。口蹄疫病毒有7个血清型，分别命名为O、A、C、SATl、SAT2、SAT3及亚洲1型，每个型又可划分亚型。由于不断发生抗原漂移，因此并不能严格区分亚型。抗原性漂移是由编码vp1和/或vp2和/或vp3蛋白的基因发生点突变引起的，是在免疫群体中筛选变异体的反响，它可引起致病性更强病毒的出现 36、阐述口蹄疫病毒的流行、致病特点及对策。口蹄疫是全球性最重要的动物疫病，常在牛群、猪群大范围流行。多种偶蹄动物都易感。感染率很高，致死率较低。人类偶能感染，表现发热、食欲差及口、手、脚产生水泡。致病机理病症：病畜口、鼻、蹄等部位出现水泡为主要病症，且可能跛行。怀孕母牛可能流产，而后导致繁殖力降低。猪那么以跛蹄为最主要的病症。羊病症通常比牛温和。感染：反刍类动物感染的主要途径是呼吸道，也可通过采食或接触污染物感染。经呼吸道感染时，最初在咽复制，而后传播到其他组织。病毒排出：患畜通过分泌物、奶、飞沫大量排出病毒。某些康复动物的咽部长时间存在。牛在感染后可长达两年，绵羊可达6个月。传播：病毒可长距离经气雾传播，吹风低温、高湿、阴暗有利于其传播。免疫：康复牛对同型病毒感染的免疫力可维持1年或稍长。诊断申报：被列为必须申报的疾病，诊断只能在指定的实验室进展。送检：样品包括水泡液、剥落水泡痂、抗凝血或血清等。死亡动物那么可采淋巴结、扁桃体。样品应冰冻保存，或置于pH 7.6的甘油缓冲液中。检测方法：OIE推荐使用商品化及标准化的ELISA试剂盒用于诊断，数小时出结果。也用细胞培养别离病毒，别离的病毒通过LLISA或者中和试验加以鉴定。预防与控制控制：由于病毒高度的传染力，控制措施必须非常周全和严格。无病地区严禁从疫区调运牲畜。消灭：一旦发病，应立即封锁现场，焚毁或深埋病畜。疫区周边的畜群应接种疫苗，建立免疫防护带。疫苗：弱毒疫苗可能散毒，不平安。推荐使用浓缩的灭活疫苗37、比较猪水疱病毒与口蹄疫病毒的异同。不同：猪水疱病在家畜中仅猪感染发病，不感染牛和羊。如果周围牛、羊有发病者，即可诊断为口蹄疫；口蹄疫导致的幼畜死亡，剖检时有“虎斑心样变化，猪水疱病那么无；患畜，尤其是仔畜的死亡率不一样。感染途径不一样：口蹄疫：反刍类动物感染的主要途径是呼吸道，也可通过采食或接触污染物感染。经呼吸道感染时，最初在咽复制，而后传播到其他组织。猪水疱病毒：通过皮肤的伤口感染，也可经过消化道感染，但需要较高滴度的病毒。一样：都是OIE规定的通报疾病；猪水疱病毒感染的病症与口蹄疫相似，发热，蹄冠部发生水疱。均可以用ELISA和采用RT-PCR检测。38、试述猪瘟病毒的传播特点及检测手段。猪瘟病毒(CSFV)是世界范围内最重要的猪病病毒。亚洲、非洲、中南定洲仍然不断发生猪瘟。美、加、澳及欧洲假设干国家已消灭本病。.病症：典型的猪瘟为急性感染，伴有高热、厌食、萎顿及结膜炎。潜伏期2-4d病猪白佃胞严重减少。仔猪可无病症而死亡，成年猪往往因细菌继发感染在1周内死亡。死亡率可高达100。亚急性型及慢性型的潜伏期及病程均延长，其病毒毒力减弱。此种毒株感染怀孕母者导致死胎、流产、木乃伊胎或死产，所产仔猪不死者产生免疫耐性，表现为颤抖、矮小并终身非毒，多在数月内死亡。.致病机理：感染：病毒的最主要的入侵途径是通过采食，扁桃体是最先定居的器官，而后在内皮细胞、淋巴器官及骨髓增殖，导致出血症及白血细胞与血小板减少。病变：脾堵塞是特征性病变，常可见脑炎。肠黏膜的坏死性溃疡可见于亚急性或慢性病例。.诊断病料：在国家认可的实验室进展诊断。病料可取胰、淋巴结、扁桃体、脾及血液。方法：用荧光抗体法、免疫组化法、ELISA法可快速检出病毒抗原。39、为什么说朊病毒不是传统意义上的病毒？病毒是一类个体极微小的生物，它没有细胞构造，其构成很特别，仅由核酸和蛋白质构成。核酸DNA或RNA在病毒的遗传上起着重要作用，而蛋白质外壳只对核酸起保护作用，本身并没有遗传性。这是人们对病毒的根本认识。朊病毒与一般病毒不一样，它只有蛋白质而无核酸，但却既有感染性，又有遗传性，并且具有和一切传统病原体不同的异常特性朊病毒Prion是动物与人传染性海绵状脑病的病原，他不是传统意义上的病毒可以从以下得到说明：它没有核酸，是有传染性的蛋白质颗粒，因此有建议将它译为“朊粒。朊病毒是所谓的构象病原，即由正常蛋白变构后而获得致病性，这种正常的细胞蛋白名为PrPc。PrPsc与PrPc 为同源异构，在同一宿主二者的氨基酸序列一样，但是PrPsc 的构象改变，由以螺旋为主变成以折叠为主。PrPsc 抵抗内切酶的消化，后者导致其凝集，形成直径约为46nm的螺旋形杆状纤维，即所谓痒病相关纤维SAF,SAF在脑组织形成神经元空斑，亦即PrP斑，引起海绵状损害及神经元功能丧失。许多足以杀灭病毒及其他微生物的化学药物及环境、物理因素紫外线或射线对PrPsc无效。朊病毒在仓鼠、小鼠脑内的增殖时间为5.2d，潜伏期长达数月至数十年。感染引起脑组织空泡变性，淀粉样蛋白斑块、神经胶质细胞增生等，不引起炎症反响。无包涵体，不诱导干扰素，不破坏宿主B细胞和T细胞的免疫功能，不引起宿主的免疫应答。40、试述噬菌体的实际应用细菌的鉴定和分型：噬菌体的噬菌作用具有种和型的特异性，即一种噬菌体只能裂解一种相应的细菌，或仅能作用于该种细菌的某一类菌株，故可用于细菌的鉴定与分型。例如，用伤寒沙门菌Vi噬菌体可将有Vi抗体的伤寒沙门菌分为96个噬菌体型，用34株分型噬菌体，可将鼠伤寒沙门菌分为207个噬菌体型。检测未知细菌：通过检测噬菌体效价，可检测标本中的相应细菌。即在疑有某些细菌存在的标本中，参加一定数量的相应噬菌体，37培养6-8h，再进展该噬菌体的效价测定。假设其中有明显增长，那么说明标本中有某种细菌的存在。作为分子生物学研究的工具：噬菌体的构造简单，其基因数较少，已成为研究核酸复制、转录、重组以及基因表达的调节、控制等的重要对象，促进了分子生物学等学科的开展。还可作为基因的载体，故噬菌体被广泛应用于基因工程的研究。近年来噬菌体的整合酶受到重视，此类整合到宿主菌染色体所需的酶被认为可作为基因转移的工具酶得以利用。噬菌体的裂解基因被用于构建菌蜕系统，可望开展为新型疫苗，此外，噬菌体外表展示技术已得到应用，其原理是将编码特定外源抗原的基因与丝状噬菌体衣壳蛋白的基因结合，外源蛋白与噬菌体衣壳蛋白被融合表达，展示于噬菌体外表，成为制备基因工程抗体的重要手段。此外，近年来T7、T4及入噬菌体展示系统也得以应用。用丝状噬菌体构建的肽库已商品化，可用于筛选表位与之互补的目的抗原，为抗原与药物的研究提供了便利手段。 细菌感染的治疗. v