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课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数基础巩固1在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时又能抑制或者阻止其他种类微生物生长的培养基称做()A.鉴别培养基B.加富培养基C.选择培养基D.基础培养基解析:选择培养基可选择目标微生物,同时抑制或阻止其他微生物生长。答案:C2下列关于土壤取样的叙述,错误的是()A.土壤取样,应选取肥沃、湿润的土壤B.先铲去表层土,再取样C.取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌D.应在火焰旁称取土壤解析:土壤取样过程中,为防止杂菌污染,取样用的小铁铲和信封在使用前都必须灭菌。答案:C3下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是()A.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水B.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、葡萄糖、琼脂、水C.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、尿素、琼脂、水D.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO47H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水解析:分解尿素的细菌能利用尿素,因此选择培养基中应只有尿素这一种氮源。此外,培养基中还应含有碳源。答案:A4能够测定样品活菌数的方法是()A.稀释涂布平板法B.直接计数法C.重量法D.比浊法解析:利用稀释涂布平板法能够在不影响生活的情况下将细菌个体从固体培养基上分离出来,并可以繁殖形成菌落,可根据菌落数测定出样品活菌数,故稀释涂布平板法可用于测定样品活菌数。直接计数法计得的是活菌和死菌的总和。答案:A5下列关于微生物分离和培养的叙述,错误的是()A.微生物培养前,需对培养基进行消毒B.测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法C.分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度D.分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一的氮源解析:微生物培养前,需对培养基进行灭菌,而不是消毒;测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法,而一般不用活菌计数法;分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度以便能选择出菌落数在30300的平板进行计数;分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一的氮源。答案:A6下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是()A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板B.取104,105,106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平板上C.将实验组和对照组平板倒置,37 恒温培养2448 hD.确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数解析:检测土壤中细菌总数时,用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板,取104,105,106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平板上,将实验组和对照组平板倒置,37 恒温培养2448 h,在确定对照组无菌后,选择菌落数在30300的平板进行计数。答案:D7下列属于菌种鉴定重要依据的是()A.细菌的大小、形状和颜色B.菌落的大小、形状和颜色C.有无鞭毛D.培养基的不同解析:不同种类的细菌所形成的菌落在大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等方面具有不同的特征,所以,每种细菌在一定条件下所形成的菌落,可以作为菌种鉴定的重要依据。单个的细菌用肉眼是看不见的,故细菌的个体特征不能作为菌种鉴定的依据。答案:B8若大肠杆菌和圆褐固氮菌混合在一起,采用下列哪组培养基可将它们分离?()A.加食盐的培养基和牛肉膏蛋白胨培养基B.伊红美蓝培养基和无氮培养基C.斜面培养基和液体培养基D.加青霉素的培养基和液体培养基解析:大肠杆菌的代谢产物可与伊红美蓝结合,使菌落呈黑色;圆褐固氮菌能自行固氮,可用无氮培养基选择。答案:B9有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株,请回答下列问题。(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于培养基。(2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即和。(3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株降解原油的能力。(4)通常情况下,在微生物培养过程中,实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、和。无菌技术要求实验操作应在酒精灯附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。解析:(1)要获得能分解原油的细菌,应选择以原油为唯一碳源的培养基,以保证这种细菌可以大量繁殖,而其他细菌不能生存。此种培养基属于选择培养基。(2)纯化菌种常用平板划线法和稀释涂布平板法。(3)在以原油为唯一碳源的培养基上,菌落周围的原油因被分解而形成分解圈,分解圈越大,说明该菌株降解原油的能力越强。(4)实验室灭菌的方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌,实验操作要在酒精灯火焰附近的无菌区进行。答案:(1)原油选择(2)平板划线法稀释涂布平板法(3)强(4)干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰10请回答下列与大肠杆菌有关的问题。(1)大肠杆菌的同化作用类型是。(2)下表是某公司研发的一种检测大肠杆菌菌群的培养基的配方。成分含量/g蛋白胨10.0乳糖5.0 蔗糖5.0 K2HPO42.0 显色剂0.2 琼脂12.0 将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL根据用途划分该培养基属于(填“选择”或“鉴别”)培养基。该培养基中的碳源是。(3)培养大肠杆菌时,常用的接种方法是平板划线法和,为防止杂菌污染,需对培养基和培养皿进行。(4)现有1 L水样,用无菌吸管吸取1 mL转至盛有 9 mL无菌水的试管中,依次稀释到103稀释度。各取0.1 mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养,一段时间后记录的菌落数分别为55,56,57,则每升原水样中大肠杆菌数为。解析:(1)大肠杆菌不能制造有机物,必须利用现成的有机物来合成组成自身的物质,属于异养型生物。(2)根据题表中培养基的配方可看出,该培养基中添加了显色剂,可判断此培养基为鉴别培养基。(3)培养大肠杆菌等微生物时,常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。为防止杂菌污染,需要对培养基和培养皿进行灭菌。(4)根据公式计算:每升原水样中大肠杆菌数=(55+56+57)30.1103103=5.6108。答案:(1)异养型(2)鉴别乳糖、蔗糖(蛋白胨)(3)稀释涂布平板法灭菌(4)5.6108能力提升1下列操作需要在火焰旁进行的有()土壤取样称取土壤稀释土壤溶液涂布平板微生物的培养A.B.C.D.解析:除了土壤取样和微生物的培养不便于在火焰旁进行外,其他均要在火焰旁进行,以防止杂菌污染。答案:D2以下关于能分解尿素的细菌的说法,正确的是()A.能分解尿素的原因是能合成蛋白酶B.分离该种细菌时以尿素作为唯一碳源C.环境中含有大量的尿素诱导该细菌产生了分解尿素的特性D.用以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基培养该菌后不会使酚红指示剂变红解析:酶具有专一性,分解尿素的细菌之所以能分解尿素是因为能合成、分泌脲酶;分离能分解尿素的细菌时以尿素作为唯一氮源;环境中含有的大量的尿素对分解尿素的细菌起了选择作用,而非诱导作用;该菌产生的脲酶把尿素分解为氨后,使pH升高,可使酚红指示剂变红,但添加酸碱缓冲剂后,阻止了pH的升高,因此培养基不使酚红指示剂变红。答案:D3用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时,通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数。原因是()A.平板上的一个菌落就是一个细菌B.菌落中的细菌数是固定的C.此时的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌D.此方法统计的菌落数一定与活菌的实际数相同解析:用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时,平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌,但偶尔也可能来自两个细菌,所以此方法统计的菌落数可能与活菌的实际数不相同。答案:C4下列不属于菌种计数方法的是()A.平板划线法B.稀释涂布平板法C.显微镜直接计数D.滤膜法解析:平板划线法可用于菌种的纯化和分离,不能用于计数。稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌的数目,显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法。滤膜法常用于检测水样中大肠杆菌的数目,通常是将已知体积的水样过滤后,将滤膜放到伊红美蓝培养基上培养,根据培养基上黑色菌落的数目,计算出水样中大肠杆菌的数量。答案:A5将硝化细菌接种到下列培养基中,其中可以长出硝化细菌菌落的是()A.无氮培养基,试管密闭B.无氮培养基,试管口用棉塞塞住C.含氮(无机氮源)培养基,试管密闭D.含氮(无机氮源)培养基,试管口用棉塞塞住解析:硝化细菌是自养需氧型微生物,利用的是无机氮源,因此培养硝化细菌需要含无机氮源的培养基且试管口用棉塞塞住。答案:D6“筛选”是生物学中培育生物新类型常用的手段,下列做法不可能筛选成功的有()A.在无氮培养基上筛选圆褐固氮菌B.在不含精氨酸的培养液中筛选能合成精氨酸的微生物C.用含青霉素的培养基筛选酵母菌和霉菌D.用不含碳源的培养基筛选根瘤菌解析:圆褐固氮菌可以固氮,所以可以在无氮培养基上生长;青霉素可抑制细菌细胞壁的形成,而对酵母菌和霉菌无抑制作用;根瘤菌是异养型生物,在不含碳源的培养基上不能生长。答案:D7实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应,用3种细菌在事先准备好的琼脂块平板上画3条平行线(3条线均与下图中的链霉素带接触),将平板置于37 条件下恒温培养3 d,结果如下图所示。根据实验结果分析以下叙述,不正确的是()A.链霉素能阻止结核杆菌的生长B.链霉素对结核杆菌的抑制作用比对霍乱菌更有效C.链霉素对结核杆菌的抑制作用比对伤寒杆菌更有效D.链霉素可以用于治疗伤寒病人解析:由题图可知,链霉素能阻止霍乱菌和结核杆菌的生长繁殖,不能阻止伤寒杆菌的生长繁殖,所以它不能用于治疗感染伤寒杆菌的病人。链霉素对结核杆菌的抑制作用比对霍乱菌更有效。答案:D8回答下列关于微生物和酶的问题。高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了能高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如下页左上图所示。(1)过程称为,过程是为了。(2)号培养基称为(按功能分);该培养基中除了加入淀粉外,还需加入的另一种重要的营养成分为。A.琼脂B.葡萄糖C.硝酸铵D.碳酸氢钠(3)一般对配制的培养基采用高压灭菌,其中“高压”是为了。解析:(1)图示中过程后试管中单位体积内微生物数量减少,所以过程称为稀释,过程是将试管内液体培养基中的微生物涂布在培养皿中的固体培养基上,所以过程是为了筛选单个菌落。(2)号培养基的功能是筛选,所以称为选择培养基。该培养基中除了加入淀粉外,还需加入另一种重要的营养成分硝酸铵,以作为培养微生物的氮源。(3)一般对配制的培养基采用高压灭菌,其中“高压”是为了杀死培养基中的芽孢。答案:(1)稀释筛选单个菌落(或筛选)(2)选择培养基C(3)杀死培养基中的芽孢9某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。(1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了和。除此之外,培养基还必须含有的基本成分是和。(2)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是。(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种了湖水样品的平板置于中培养,培养的温度设定在37 。要使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种作为对照进行实验。(4)培养20 h后,观察到平板上有形态和颜色不同的菌落,这说明湖水样品中有种细菌。一般说来,菌落总数越多,湖水遭受细菌污染的程度越。(5)如果提高培养基中NaCl的浓度,可以用于筛选耐细菌,这种培养基被称为。解析:(1)蛋白胨来源于动物材料,含有维生素、糖和有机氮等营养物质,主要是为微生物提供氮源。培养微生物的培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐。(2)实验室的灭菌方法一般有灼烧灭菌(适合于接种工具的灭菌)、干热灭菌(适合于耐高温的、需要保持干燥的物品的灭菌)、高压蒸汽灭菌(适合于培养基等物体的灭菌)。(3)要想使微生物快速繁殖,就要将平板置于适宜的条件下,特别是温度要适宜,所以要置于恒温培养箱中。对照组应接种无菌水,以排除其他因素的干扰。(4)不同的细菌形成的菌落具有不同的形态,细菌菌落的特征是识别不同细菌的主要依据。菌落一般是由一个细菌细胞繁殖而来的,菌落多则说明细菌的数目多。(5)加入了特定的物质,用于筛选各种特定细菌的培养基就是选择培养基。例如加入了NaCl就可以用于筛选耐盐细菌。答案:(1)氮源(碳源,不作要求)碳源无机盐水(2)高压蒸汽灭菌法(3)恒温培养箱无菌水(4)多高(5)盐(或NaCl)选择培养基10(2017全国理综)某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。回答下列问题。(1)有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,原因是前者能产生。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源,原因是。但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是(答出两点即可)。(2)为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培养基时,应选择(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作为氮源,不选择其他两组的原因是。(3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有(答出两点即可)。解析:(1)有些细菌能分解尿素是因为其能产生分解尿素的酶,即脲酶。能分解尿素的细菌是异养生物,不能利用CO2来合成有机物。葡萄糖既能作为能源,为细胞的代谢提供能量,也能作为碳源,为其他有机物的合成提供原料。(2)利用尿素作为唯一氮源的选择培养基可筛选分解尿素的细菌。其他两组都含有NH4NO3,能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3,不能起到筛选作用。(3)培养基中的KH2PO4和Na2HPO4既可为细菌生长提供无机营养,又可作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定。答案:(1)脲酶分解尿素的细菌是异养生物,不能利用CO2来合成有机物为细胞生命活动提供能量,为其他有机物的合成提供原料(2)尿素其他两组都含有NH4NO3,能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3,不能起到筛选作用(3)为细菌生长提供无机营养,作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定
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