第7章苯乙胺类拟肾上腺素类药物的分析

第七章第七章苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析第一节第一节 结构与性质结构与性质*苯环苯环盐酸盐盐酸盐硫酸盐硫酸盐酒石酸盐酒石酸盐肾上腺素肾上腺素儿茶酚儿茶酚盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素重酒石酸去甲肾上腺素重酒石酸去甲肾上腺素2盐酸苯乙双胍盐酸苯乙双胍胍基胍基盐酸麻黄碱盐酸麻黄碱ClH2NClCHOHCH2NH C(CH3)3HCl盐酸克仑特罗盐酸克仑特罗性性 质质1.弱碱性弱碱性 烃氨基侧链，显弱碱性烃氨基侧链，显弱碱性 2.酚羟基特性酚羟基特性 o发生三氯化铁反应发生三氯化铁反应o易氧化变色易氧化变色性性 质质3.具有手性碳原子，具旋光性具有手性碳原子，具旋光性4.紫外吸收紫外吸收 苯环苯环第二节第二节 鉴别试验鉴别试验一、三氯化铁反应一、三氯化铁反应铁的络合物（绿色）本类药物3Fe OH)-(Ar 紫色紫色或或紫红紫红色色加入碱性加入碱性溶液溶液氧化为醌氧化为醌二、与甲醛二、与甲醛硫酸反应（硫酸反应（Marquis反应）反应）原理：苯酚结构，与甲醛在硫酸中反应，原理：苯酚结构，与甲醛在硫酸中反应，形成醌式结构的形成醌式结构的有色有色化合物化合物肾上腺素肾上腺素红色红色盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素棕色至暗紫色棕色至暗紫色重酒石酸去甲肾上腺素重酒石酸去甲肾上腺素淡红色淡红色三、氧化反应三、氧化反应o 分子中具有邻苯二酚或苯酚的结构，易分子中具有邻苯二酚或苯酚的结构，易被被碘、过氧化氢碘、过氧化氢等氧化剂氧化呈色。等氧化剂氧化呈色。o 肾上腺素、盐酸异丙肾上腺素、重酒石肾上腺素、盐酸异丙肾上腺素、重酒石酸去甲肾上腺素鉴别（酸去甲肾上腺素鉴别（Ch.P）四、双缩脲反应四、双缩脲反应o 在碱性溶液（在碱性溶液（NaOH）中，双缩脲中，双缩脲（H2NOCNHCONH2）能与铜离）能与铜离子（子（Cu2+）作用，形）作用，形成紫色络合物成紫色络合物。（-CO-NH-）、（）、（-CO-NH2）、（）、（-CHOH-NH2）、）、（-CS-CS-NH2）等基团亦有此反应。）等基团亦有此反应。侧链具有氨基醇结构的化合物侧链具有氨基醇结构的化合物盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素盐酸麻黄碱盐酸麻黄碱例：例：Chp2010，鉴别盐酸麻黄碱，鉴别盐酸麻黄碱方法：取本品方法：取本品1%水溶液水溶液1ml，加硫酸，加硫酸铜试液铜试液2滴与滴与20%氢氧化钠液氢氧化钠液1ml，即显蓝，即显蓝紫色，加乙醚紫色，加乙醚1ml振摇、放置，乙醚层显振摇、放置，乙醚层显紫红色，水层变为蓝色。紫红色，水层变为蓝色。五、五、 脂肪族伯胺的专属反应脂肪族伯胺的专属反应（Rimini反应）反应） 与亚硝基铁氰化钠反应与亚硝基铁氰化钠反应红紫色丙酮亚硝基铁氰化钠重酒石酸间羟胺 NaHCO3第三节 特殊杂质检查一、酮体杂质的检查一、酮体杂质的检查来源：原料残存。来源：原料残存。检查方法：检查方法： UV法法 检查原理：检查原理：利用酮体在利用酮体在310nm波长处有最波长处有最大吸收，而药物本身在此波长处几乎没有吸大吸收，而药物本身在此波长处几乎没有吸收，规定一定浓度溶液在收，规定一定浓度溶液在310nm波长处的吸波长处的吸收度限制酮体的量。收度限制酮体的量。OOOHOHH二、光学纯度的检查二、光学纯度的检查o 本类药物多数具有光学活性特征，需进行光本类药物多数具有光学活性特征，需进行光学纯度检查。学纯度检查。o ChP2010采用比旋度值进行光学纯度检查。采用比旋度值进行光学纯度检查。三、有关物质检查三、有关物质检查盐酸去氧肾上腺素：盐酸去氧肾上腺素：TLC盐酸苯乙双胍：纸色谱盐酸苯乙双胍：纸色谱其他药物：其他药物：HPLC盐酸麻黄碱 【有关物质】o 用十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂；以磷用十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂；以磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾6.8g，三乙胺三乙胺5ml，磷酸，磷酸4ml，加水至，加水至1000ml，用稀磷酸，用稀磷酸或三乙胺调节或三乙胺调节pH 值至值至 3.00. 1)-乙腈（乙腈（90：10)为流动相；检测波长为为流动相；检测波长为210nm。 o 理论板数按盐酸麻黄碱峰计算不低于理论板数按盐酸麻黄碱峰计算不低于3000。精密量取供试品溶液与对照溶液各精密量取供试品溶液与对照溶液各10l ，分别注人液相色谱仪，记录色谱图至主分别注人液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的成分峰保留时间的2倍。供试品溶液的色倍。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，各杂质峰面积的和谱图中如有杂质峰，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍（倍（0.5 %)。第四节第四节 含量测定含量测定o原料药：多采用非水溶液滴定法，也原料药：多采用非水溶液滴定法，也有溴量法和亚硝酸钠法。有溴量法和亚硝酸钠法。o制剂：制剂：UV、比色法、比色法、HPLC一、非水溶液滴定法一、非水溶液滴定法 1.原理原理：脂烃胺基脂烃胺基侧链，显侧链，显弱碱性弱碱性2.溶剂溶剂 冰醋酸（冰醋酸（PKb为为810）3.滴定液滴定液高氯酸（高氯酸（0.1mol/L）4.指示剂指示剂结晶紫（紫色结晶紫（紫色-黄色）黄色）5.注意注意（2）加入）加入醋酸汞醋酸汞试液消除氢卤酸的干扰试液消除氢卤酸的干扰（3）结晶紫滴定不同强度碱性药物时，终）结晶紫滴定不同强度碱性药物时，终点颜色也不同，碱性到酸性为紫、蓝紫、点颜色也不同，碱性到酸性为紫、蓝紫、蓝绿、绿、黄。可用电位法指示终点。蓝绿、绿、黄。可用电位法指示终点。（1）若碱性较弱（）若碱性较弱（PKb 为为10-12），可加入醋），可加入醋酐，提高碱性。酐，提高碱性。低温加入醋酐，可防止氨基低温加入醋酐，可防止氨基乙酰化。乙酰化。盐酸异丙肾上腺素盐酸异丙肾上腺素o 【含量测定】取本品约【含量测定】取本品约0.15 g，精密称定，精密称定，加冰醋酸加冰醋酸30 ml，微温使溶解，放冷，加，微温使溶解，放冷，加醋醋酸汞酸汞试液试液5 ml与结晶紫指示液与结晶紫指示液1滴，用高氯滴，用高氯酸滴定液（酸滴定液（0. lmol/L)滴定至溶液显滴定至溶液显蓝色蓝色，并将滴定的结果用空白试验校正。并将滴定的结果用空白试验校正。硫酸沙丁胺醇硫酸沙丁胺醇o 【含量测定】取本品约【含量测定】取本品约0.4g，精密称定，加，精密称定，加冰醋酸冰醋酸10ml，微温使溶解，放冷，加醋酑，微温使溶解，放冷，加醋酑15ml与结晶紫指示液与结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液滴，用高氯酸滴定液（0. lmol/L)滴定至溶液显滴定至溶液显蓝绿色蓝绿色，并将滴，并将滴定的结果用空白试验校正。定的结果用空白试验校正。（二）溴量法（二）溴量法1.原理原理 盐酸去氧肾上腺素盐酸去氧肾上腺素Br2+2KI 2KBr+I2I2+2Na2S2O3 NaI+Na2S4O62.方法方法 取本品约取本品约0.1g，精密称定，置碘瓶中，加水，精密称定，置碘瓶中，加水20ml使溶解，使溶解，精密加溴滴定液精密加溴滴定液（0.05mol/L）50ml，再加盐酸，再加盐酸5ml，立即密塞，放置，立即密塞，放置15分分钟并时时振摇，注意微开瓶塞，加钟并时时振摇，注意微开瓶塞，加碘化钾碘化钾试试液液10ml，立即密塞，振摇后，用，立即密塞，振摇后，用硫代硫酸硫代硫酸钠滴定液钠滴定液（0.1mol/L）滴定，至）滴定，至近终点近终点时，时，加加淀粉指示液淀粉指示液，继续滴定至，继续滴定至蓝色消失蓝色消失，并将，并将滴定结果用空白试验校正。每滴定结果用空白试验校正。每1ml溴滴定液溴滴定液相当于相当于3.395mg的的C9H13NO2HCl。三、亚硝酸钠法三、亚硝酸钠法-芳伯胺基芳伯胺基o原理：在酸性溶液中，原理：在酸性溶液中，芳伯胺基芳伯胺基可与可与亚硝酸钠亚硝酸钠定量发生重氮化反应，生成定量发生重氮化反应，生成重氮盐，可用重氮盐，可用永停滴定法永停滴定法指示终点。指示终点。盐酸克伦特罗盐酸克伦特罗o【含量测定】取本品约【含量测定】取本品约0.25g，精密，精密称定，置称定，置100ml烧杯中，加盐酸溶液烧杯中，加盐酸溶液（12)25ml使溶解，再加水使溶解，再加水25ml，照永停滴定法，用亚硝酸钠滴定液照永停滴定法，用亚硝酸钠滴定液（0.05mol/L)滴定。滴定。芳胺类.ppt#48.幻灯片 48 四、紫外分光光度法与比色法四、紫外分光光度法与比色法紫外分光光度法：共轭结构紫外分光光度法：共轭结构比色法：重氮化偶合反应显色比色法：重氮化偶合反应显色 酚羟基与亚铁离子配位显色酚羟基与亚铁离子配位显色盐酸克仑特罗栓盐酸克仑特罗栓o 【含量测定】取本品【含量测定】取本品20粒，精密称定粒，精密称定，切成切成小片，精密称取适小片，精密称取适量量(约相当于盐酸克仑特罗约相当于盐酸克仑特罗0. 36mg)，置分液漏斗中，加温热的三氯甲烷，置分液漏斗中，加温热的三氯甲烷20ml使溶解，用盐酸溶液使溶解，用盐酸溶液(9-100)振摇提取振摇提取3次次（20ml、15ml、10ml)，分取酸提取液，分取酸提取液，置置 50ml量瓶中，用盐酸溶液（量瓶中，用盐酸溶液（9-100)稀释至刻度，稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；另取盐酸克仑特罗对照品适量，精密称定，另取盐酸克仑特罗对照品适量，精密称定，加盐酸溶液（加盐酸溶液（9-100)溶解并定溶解并定量量;稀释制成每稀释制成每l ml中含中含7.2 g的溶液作为对照品溶液。的溶液作为对照品溶液。o 精密量取对照品溶液与供试品溶液各精密量取对照品溶液与供试品溶液各15ml,分别置分别置25ml量瓶中，各加盐酸溶液量瓶中，各加盐酸溶液（9-100) 5ml与与0. 1%亚硝酸钠溶液亚硝酸钠溶液l ml，摇匀，放置摇匀，放置3分钟，各加分钟，各加0. 5%氨基磺酸铵氨基磺酸铵溶液溶液lml ，摇匀，时时振摇，摇匀，时时振摇10分钟，再各分钟，再各加加0. 1%盐酸萘乙二胺盐酸萘乙二胺溶液溶液lml，摇匀，放摇匀，放置置10分钟，用盐酸溶液（分钟，用盐酸溶液（9100)稀释至稀释至刻度，摇匀，照紫外刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法可见分光光度法（附录（附录IV A)，在，在500nm的波长处分别测的波长处分别测定吸光度，计箅，即得。定吸光度，计箅，即得。 （五）HPLCo 广泛用于本类药物制剂的分析。广泛用于本类药物制剂的分析。本章复习要点本章复习要点o 结构与性质：易氧化；弱碱性、旋光性结构与性质：易氧化；弱碱性、旋光性o 鉴别试验：与铁盐的反应；与甲醛硫酸反应；鉴别试验：与铁盐的反应；与甲醛硫酸反应；氧化反应；双缩脲反应；脂肪伯胺的氧化反应；双缩脲反应；脂肪伯胺的Rimini试验试验o 含量测定：非水溶液滴定法、溴量法含量测定：非水溶液滴定法、溴量法