生物安全柜的选择使用及维护实用教案

目目 的的掌握生物安全柜的使用和维护掌握生物安全柜的使用和维护熟悉熟悉(shx)生物安全柜的检测方法生物安全柜的检测方法第1页/共42页第一页，共42页。需要需要(xyo)解决的六个问题解决的六个问题第2页/共42页第二页，共42页。选择选择(xunz)生物安全柜的理由生物安全柜的理由u工作对象具有生物危害工作对象具有生物危害u原代培养物、菌毒种以及原代培养物、菌毒种以及(yj)诊断性标本等诊断性标本等 -具具有潜在感染性的实验材料有潜在感染性的实验材料u属于人间传染的病原微生物名属于人间传染的病原微生物名录中第一、二、三和四类微生录中第一、二、三和四类微生物物第3页/共42页第三页，共42页。人间传染人间传染(chunrn)的病原的病原微生物名录微生物名录第4页/共42页第四页，共42页。类与级对应类与级对应(duyng)表表-GB19489-2004实验室生物安全通用(tngyng)要求第一类 第二类第三类第四类第5页/共42页第五页，共42页。选择生物选择生物(shngw)安全柜的理由安全柜的理由u容易产生气溶胶的工作行为容易产生气溶胶的工作行为u 对液体或半流体进行摇动、倾注或搅对液体或半流体进行摇动、倾注或搅拌操作时，拌操作时，u 将液体滴加到固体表面上或另一种液将液体滴加到固体表面上或另一种液体中时，体中时，u 在对琼脂板划线接种、用吸管接种细在对琼脂板划线接种、用吸管接种细胞培养瓶，胞培养瓶，u 采用多道加样器将感染性试剂的混悬采用多道加样器将感染性试剂的混悬液转移到微量培养板中，液转移到微量培养板中，u 对感染性物质进行匀浆及涡旋振荡，对感染性物质进行匀浆及涡旋振荡，u 对感染性液体进行离心对感染性液体进行离心(lxn)，u 进行动物操作时。进行动物操作时。第6页/共42页第六页，共42页。选择选择(xunz)生物安全柜的理由生物安全柜的理由u生物安全柜能够阻止工作中所产生的生物安全柜能够阻止工作中所产生的气溶胶对外环境或者气溶胶对外环境或者(huzh)操作者操作者本身产生危害，还可以减少样本之间本身产生危害，还可以减少样本之间由于气溶胶产生的交叉污染。由于气溶胶产生的交叉污染。第7页/共42页第七页，共42页。生物安全柜基本生物安全柜基本(jbn)工作原理工作原理l定向定向(dn xin)气流：气流：l 风幕风幕lHEPA滤器：滤器：l 一种一次性使用，一种一次性使用，l框架内有多重褶迭框架内有多重褶迭l的干性过滤材料的过滤器，对的干性过滤材料的过滤器，对0.3微米气溶微米气溶胶的过滤效胶的过滤效l能达到能达到99.97%。l 保证排出气体和内循环气体的无菌状态。保证排出气体和内循环气体的无菌状态。第8页/共42页第八页，共42页。生物生物(shngw)安全柜的选择安全柜的选择要素：要素：样品的生物危害样品的生物危害第一第一(dy)、二、三和四类病、二、三和四类病原微生物原微生物保护样品保护样品I级生物安全柜不保护样品级生物安全柜不保护样品其他其他是否涉及到挥发性、放射性是否涉及到挥发性、放射性核素或化学品核素或化学品第9页/共42页第九页，共42页。生物生物(shngw)安全柜的选择（一）安全柜的选择（一）生物安全柜生物安全柜进风面速率进风面速率（m/s）气流百分数气流百分数排风系统排风系统重新循环重新循环部分部分排出部分排出部分 I 级级0.360100硬管硬管级级A1型型0.380.517030排到房间或套管排到房间或套管连接处连接处外排风型外排风型级级A2型型0.517030套管连接处套管连接处级级B1型型0.513070硬管硬管级级B2型型0.510100硬管硬管III级级不适用不适用0100硬管硬管第10页/共42页第十页，共42页。生物生物(shngw)安全柜的选择（二）安全柜的选择（二）生物安全柜生物安全柜保护类型保护类型保护对象保护对象 I 级级第二、三和四类病原微生物；第二、三和四类病原微生物；挥发放射性核素挥发放射性核素/化学品化学品操作者，环境操作者，环境级级A1型型第二、三和四类病原微生物第二、三和四类病原微生物操作者，环境和样品操作者，环境和样品外排风型外排风型级级A2型型第二、三和四类病原微生物；第二、三和四类病原微生物；痕量挥发放射性核素痕量挥发放射性核素/化学品化学品操作者，环境和样品操作者，环境和样品级级B1型型第二、三和四类病原微生物；第二、三和四类病原微生物；少量挥发放射性核素少量挥发放射性核素/化学品化学品操作者，环境和样品操作者，环境和样品级级B2型型第二、三和四类病原微生物；第二、三和四类病原微生物；挥发放射性核素挥发放射性核素/化学品化学品操作者，环境和样品操作者，环境和样品III级级第一、二、三和四类病原微生第一、二、三和四类病原微生物；挥发放射性核素物；挥发放射性核素/化学品化学品操作者，环境和样品操作者，环境和样品第11页/共42页第十一页，共42页。II级级A2型生物型生物(shngw)安全柜安全柜室内空气污染的空气HEPA 滤过的空气正压污染空气第12页/共42页第十二页，共42页。生物生物(shngw)安全柜的选择（三）安全柜的选择（三）l生物安全柜的宽度：工作需要；生物安全柜的宽度：工作需要；空间空间l费用：安全柜本身费用：安全柜本身(bnshn)；运输费用；附件费用（支架，紫运输费用；附件费用（支架，紫外灯，椅子等）；排风和送风系外灯，椅子等）；排风和送风系统：统： 风机和管道（风机和管道（II级级B2）l认证：认证：l NSF 49 美国美国l EN12469 欧欧洲洲l YY05692005 中国中国第13页/共42页第十三页，共42页。生物生物(shngw)安全柜放置安全柜放置l 五个远离点（气流）五个远离点（气流）l 门门l 风扇风扇l 空调空调l 开着的窗户开着的窗户l 人员活动频繁的区域人员活动频繁的区域(qy)l 摆放要求摆放要求l 稳固的平台或支架稳固的平台或支架l 两侧、后面和上端留两侧、后面和上端留30cmAir Register设备首选位置候选位置工 作 台设备视频(shpn)第14页/共42页第十四页，共42页。反面反面(fnmin)教材(jioci)第15页/共42页第十五页，共42页。生物安全柜的使用生物安全柜的使用(shyng)要求要求个人防护要求个人防护要求柜内物品的摆放柜内物品的摆放紫外灯紫外灯明火明火工作前准备工作前准备(zhnbi)工作中操作及溢出处理工作中操作及溢出处理工作结束后处理工作结束后处理第16页/共42页第十六页，共42页。生物生物(shngw)安全柜的使用安全柜的使用个人防护要求：个人防护要求： 在使用在使用(shyng)生物安全柜时生物安全柜时必须穿个人防护服，戴手套必须穿个人防护服，戴手套（手套应套在隔离衣的外面）（手套应套在隔离衣的外面）最好带口罩和帽子，根据需要带防最好带口罩和帽子，根据需要带防护眼罩或者面罩。护眼罩或者面罩。视频(shpn)第17页/共42页第十七页，共42页。生物生物(shngw)安全柜的使用安全柜的使用生物安全柜内物品摆放生物安全柜内物品摆放(bi fn)原原则则按照从洁净区到污染区的方向摆放按照从洁净区到污染区的方向摆放(bi fn)所有物品尽可能放在工作台后部所有物品尽可能放在工作台后部将废弃物袋、盛放废弃吸管的盘子以将废弃物袋、盛放废弃吸管的盘子以及吸滤瓶等体积较大的物品放在柜及吸滤瓶等体积较大的物品放在柜内某一侧内某一侧前进气格栅不能被纸、仪器设备或者前进气格栅不能被纸、仪器设备或者其他物品阻挡其他物品阻挡第18页/共42页第十八页，共42页。生物生物(shngw)安全柜的使用安全柜的使用洁净区半污染区污染区第19页/共42页第十九页，共42页。生物生物(shngw)安全柜的使用安全柜的使用对紫外灯的三点要求：对紫外灯的三点要求：每周进行清洁，除去可能影响杀菌每周进行清洁，除去可能影响杀菌效果的灰尘和污垢效果的灰尘和污垢每次生物安全柜的认证，要检查紫每次生物安全柜的认证，要检查紫外线强度，以确保有适当的光发外线强度，以确保有适当的光发射量射量房间中有人时一定要关闭紫外灯，房间中有人时一定要关闭紫外灯，以保护眼睛和皮肤以保护眼睛和皮肤(p f)，避，避免因不慎暴露而造成伤害免因不慎暴露而造成伤害第20页/共42页第二十页，共42页。生物生物(shngw)安全柜的使用安全柜的使用工作前需要准备的内容：工作前需要准备的内容： 首先紫外灯照射首先紫外灯照射30分钟分钟 关紫外灯，打开安全柜的日光灯和风机关紫外灯，打开安全柜的日光灯和风机(fn j)，用消毒剂对生物安全柜的内，用消毒剂对生物安全柜的内表面进行消毒擦拭表面进行消毒擦拭 将实验中需要用到的物品集中用消毒剂将实验中需要用到的物品集中用消毒剂擦拭后放在台面相应位置上（切记勿阻擦拭后放在台面相应位置上（切记勿阻挡风口！）挡风口！）等待等待5min，净化工作区的空气污染物，净化工作区的空气污染物视频(shpn)第21页/共42页第二十一页，共42页。生物生物(shngw)安全柜的使用安全柜的使用工作时操作工作时操作(cozu)规范：规范： 双臂垂直缓慢进入前面的开口，在生物双臂垂直缓慢进入前面的开口，在生物安全柜中等待大约一分钟，以使安全安全柜中等待大约一分钟，以使安全柜调整完毕后才可对物品进行处理。柜调整完毕后才可对物品进行处理。所有操作所有操作(cozu)应在离前窗应在离前窗10cm以以外的工作区进行。外的工作区进行。废弃物应丢弃在生物安全柜内的处理容废弃物应丢弃在生物安全柜内的处理容器中器中视频(shpn)第22页/共42页第二十二页，共42页。生物生物(shngw)安全柜的使用安全柜的使用操作时注意事项：操作时注意事项：避免胳膊在前开口处快速移动和频繁避免胳膊在前开口处快速移动和频繁进出。进出。尽量避免污染的物品进入洁净区。尽量避免污染的物品进入洁净区。在生物安全柜内进行操作时，不能进在生物安全柜内进行操作时，不能进行文字工作行文字工作(gngzu)。尽量减少操作者身后的人员活动。尽量减少操作者身后的人员活动。视频(shpn)第23页/共42页第二十三页，共42页。生物生物(shngw)安全柜的使用安全柜的使用 溢出处理溢出处理(chl)： GB194892007实验实验室生物安全通用要求中生物安室生物安全通用要求中生物安全柜内溢出时的处理全柜内溢出时的处理(chl)方法方法滴状溢出或体积不足滴状溢出或体积不足1 mL 的，可的，可简单地用消毒剂擦洗。简单地用消毒剂擦洗。第24页/共42页第二十四页，共42页。生物生物(shngw)安全柜的使用安全柜的使用n 大量溢出，则要做特殊的处理：大量溢出，则要做特殊的处理：n 1、 使生物安全柜保持开启使生物安全柜保持开启(kiq)状态。状态。n 2、 在溢出物上覆盖浸有消毒剂的吸水材料，作用大约在溢出物上覆盖浸有消毒剂的吸水材料，作用大约10分钟以发挥消毒作分钟以发挥消毒作用。用。n 3、 在安全柜内对污染的手套消毒后，脱下手套。如果衣服已经污染，也要在安全柜内对污染的手套消毒后，脱下手套。如果衣服已经污染，也要先脱下消毒。穿戴干净的手套和衣服作如下进一步的清洁工作。先脱下消毒。穿戴干净的手套和衣服作如下进一步的清洁工作。第25页/共42页第二十五页，共42页。生物生物(shngw)安全柜的使用安全柜的使用4、 用消毒剂喷洒或擦拭安全柜内壁、工作表面以及前视窗的内侧。作用用消毒剂喷洒或擦拭安全柜内壁、工作表面以及前视窗的内侧。作用20 min后，擦干消毒剂并将擦拭物置于生物危害袋中。后，擦干消毒剂并将擦拭物置于生物危害袋中。5、 如果溢出情况需要浸泡如果溢出情况需要浸泡(jnpo)接液槽，则不得现场清理接液槽。应报接液槽，则不得现场清理接液槽。应报告实验室主管后采用适当的气体消毒方式。告实验室主管后采用适当的气体消毒方式。第26页/共42页第二十六页，共42页。生物生物(shngw)安全柜的使用安全柜的使用6、 将所有清理将所有清理(qngl)用物品以及防护服进行高压消毒。用消毒肥皂和水用物品以及防护服进行高压消毒。用消毒肥皂和水洗手和暴露皮肤。洗手和暴露皮肤。7、 立即通知实验室主管。如果溢出物流入安全柜内，可能需要对安全柜进立即通知实验室主管。如果溢出物流入安全柜内，可能需要对安全柜进行更为广泛的消毒处理。行更为广泛的消毒处理。视频(shpn)第27页/共42页第二十七页，共42页。生物生物(shngw)安全柜的使用安全柜的使用工作结束后的要求：工作结束后的要求：将安全柜继续运行至少将安全柜继续运行至少3min来完成来完成(wn chng)“净化净化”过程。过程。将柜内物品移出前，应使用有效的消将柜内物品移出前，应使用有效的消毒剂擦拭毒剂擦拭每天实验结束后，对生物安全柜的内每天实验结束后，对生物安全柜的内壁和台面进行擦拭。壁和台面进行擦拭。等待等待5分钟后，关闭前窗，关灯，关分钟后，关闭前窗，关灯，关风机，紫外灯照射风机，紫外灯照射30分钟。分钟。视频(shpn)第28页/共42页第二十八页，共42页。生物生物(shngw)安全柜的维护安全柜的维护保持生物安全柜表面清洁和无污染状保持生物安全柜表面清洁和无污染状态态用用70%酒精或者合适的消毒剂擦拭内酒精或者合适的消毒剂擦拭内壁和工作台面；壁和工作台面；如果使用漂白剂等腐蚀性消毒剂后，如果使用漂白剂等腐蚀性消毒剂后，需要用无菌水再次进行擦拭除去需要用无菌水再次进行擦拭除去(ch q)残余的消毒剂；残余的消毒剂；定期抬起工作台面对其下面的区域进定期抬起工作台面对其下面的区域进行清洁；行清洁；消毒后，用玻璃清洁器对前窗玻璃和消毒后，用玻璃清洁器对前窗玻璃和紫外灯进行清洁。紫外灯进行清洁。第29页/共42页第二十九页，共42页。生物生物(shngw)安全柜的维护安全柜的维护l定期保养：定期保养：l用湿布擦拭内壁和工作台面；用湿布擦拭内壁和工作台面；l每年按需要更换紫外灯和日光每年按需要更换紫外灯和日光灯；灯；l每年至少认证每年至少认证(rnzhng)一一次次l 医学实验室医学实验室安全安全要求要求l YY0569-2005 生物安全柜生物安全柜l 实验室生物安实验室生物安全手册（第三版，全手册（第三版，2004）视频(shpn)第30页/共42页第三十页，共42页。生物生物(shngw)安全柜的维护安全柜的维护生物安全柜的污染清除生物安全柜的污染清除甲醛、过氧化氢熏蒸等方法甲醛、过氧化氢熏蒸等方法 应由有资质的专业人员来进行应由有资质的专业人员来进行在以下在以下(yxi)情况下需要进行熏蒸：情况下需要进行熏蒸：在检查和维修之前在检查和维修之前 在更换在更换HEPA滤器之前滤器之前在移动安全柜之前在移动安全柜之前 安全柜被严重安全柜被严重地污染地污染变换使用目的变换使用目的 长时间未用长时间未用需要熏蒸的其它时间需要熏蒸的其它时间第31页/共42页第三十一页，共42页。生物生物(shngw)安全柜的检测安全柜的检测什么情况下需要检测？什么情况下需要检测？应该应该(ynggi)由什么人来进行由什么人来进行检测？检测？需要进行哪些内容的检测？需要进行哪些内容的检测？第32页/共42页第三十二页，共42页。生物生物(shngw)安全柜的检测安全柜的检测生物生物(shngw)安全柜的检测的情安全柜的检测的情况发生在：况发生在：最初的购买安装完毕最初的购买安装完毕年检年检移动移动修理修理第33页/共42页第三十三页，共42页。生物生物(shngw)安全柜的检测安全柜的检测生物安全柜的检测应由有资质的单位检测生物安全柜的检测应由有资质的单位检测在美国必须有美国在美国必须有美国NSF授权的单位；没有授权的单位；没有NSF授权，也得有以下经历的：授权，也得有以下经历的： 有过检测经验；参加过技术课程或者厂商培训会；参加过象有过检测经验；参加过技术课程或者厂商培训会；参加过象CETA水平的商水平的商业会议；检测设备拥有的校准证书业会议；检测设备拥有的校准证书(zhngsh)在我国有检测资质的单位：在我国有检测资质的单位： 国家食品药品监督管理局国家食品药品监督管理局 医疗器械质量监督检验中心和军事医学科学院医疗器械质量监督检验中心和军事医学科学院第34页/共42页第三十四页，共42页。生物生物(shngw)安全柜的检测安全柜的检测安全柜防护效果的评估涉及到以下内容：安全柜防护效果的评估涉及到以下内容：安全柜的完整性安全柜的完整性 人员、产品及交叉污染保护人员、产品及交叉污染保护HEPA过滤器的泄漏过滤器的泄漏 向下气流的速度向下气流的速度正面气流的速度正面气流的速度 负压换气负压换气(hun q)次数次数气流的烟雾模式气流的烟雾模式 警报和互锁系统警报和互锁系统电气安全电气安全 光照度光照度还包括紫外线强度、噪声水平、震动性、集液槽泄漏(xilu)、柜体稳定性（包括柜体抗翻倒、柜体抗变形、工作台面抗变形、柜体抗向前倾倒）、温升、电机与风机等性能的测试。第35页/共42页第三十五页，共42页。生物生物(shngw)安全柜的检测安全柜的检测人员、产品和交叉污染保护测试人员、产品和交叉污染保护测试 下降气流流速测试下降气流流速测试 流入气流流速测试流入气流流速测试 工作舒适度有关标准：噪音、照度和震动测试工作舒适度有关标准：噪音、照度和震动测试 高效过滤器完整性测试高效过滤器完整性测试 柜体泄漏的测试柜体泄漏的测试气流烟雾模式测试气流烟雾模式测试 排溢槽泄露排溢槽泄露(xilu)柜体稳定性柜体稳定性其他各类测试其他各类测试 ：电机和风机性能测试、工作区温升：电机和风机性能测试、工作区温升测试、压差测试。测试、压差测试。第36页/共42页第三十六页，共42页。生物生物(shngw)安全柜的检测安全柜的检测出厂出厂(ch chng)检验检验型式检验型式检验安装检验：安装检验： 安全柜安装完成、位置移动后安全柜安装完成、位置移动后常规维护检验：至少每年一次常规维护检验：至少每年一次 更换过滤器和内部部件维修后更换过滤器和内部部件维修后第37页/共42页第三十七页，共42页。ThanksThanks！第38页/共42页第三十八页，共42页。 二级生物安全防护实验室操作要点 实验室人口须贴上生物危险标志，注明危险因子、生物安全级别、负责人姓名和电话、进人实验室的特殊要求及离开实验室的程序； 禁止非工作人员进人实验室。参观实验室等特殊情况须经实验室负责人批准后方可进入； 禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物； 接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和离开实验室前要洗手(x shu)； 以移液器吸取液体，禁止口吸； 制定尖锐器具的安全操作规程； 按照实验室安全规程操作，降低溅出和气溶胶的产生； 每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要随时消毒；第39页/共42页第三十九页，共42页。 9. 所有培养物、废弃物在运出实验室之前必须进行灭活，如高压灭活。需运出实验室灭活的物品必须放在专用密闭防漏的容器内储存、运输及消毒灭菌(mi jn)； 10.如有条件工作人员应接受必要的免疫接种 (如卡介苗等)； 11.必要时收集从事危险性工作人员的基本血清留底，并根据需要定期收集血清样本，应有检测报告，如有问题及时处理； 12.将生物安全程序纳入标准操作规范或生物安全手册，由实验室负责人专门保管，工作人员在进入实验室之前要阅读规范并按照规范要求操作； 13.工作人员要接受有关的潜在危险知识的培训，掌握预防暴露以及暴露后的处理程序。每年要接受一次最新的培训； 14.实验设备在运出修理或维护前必须进行消毒； 15.人员暴露于病毒时，及时向实验室负责人汇报并记录。第40页/共42页第四十页，共42页。第41页/共42页第四十一页，共42页。感谢您的观看(gunkn)！第42页/共42页第四十二页，共42页。