生物学发光检测法ATP实用教案

ATPATP检测技术检测技术(jsh)(jsh)应用（国外）应用（国外）l2020世纪世纪8080年代，英国首先年代，英国首先(shuxin)(shuxin)研制出便携式研制出便携式ATPATP检测仪检测仪l随后在欧洲、美国、日本展开应用随后在欧洲、美国、日本展开应用l应用范围涉及食品加工、超市、饮食、医药等行业应用范围涉及食品加工、超市、饮食、医药等行业l检测内容包括微生物和食品残渣检测内容包括微生物和食品残渣第1页/共11页第一页，共11页。检测检测(jin c)(jin c)技术应用（国内）技术应用（国内）l2020世纪末，世纪末，ATPATP检测技术被引进我国检测技术被引进我国l当时，除个别省级卫生监督单位装备，主要在一些当时，除个别省级卫生监督单位装备，主要在一些(yxi)(yxi)外资、合资企业用于自检外资、合资企业用于自检l20022002年我国卫生部颁发了食品加工企业的年我国卫生部颁发了食品加工企业的HACCPHACCP实施指南，实施指南，鼓励食品加工企业引入鼓励食品加工企业引入ATPATP检测技术检测技术l20052005年年3 3月卫生部新出台卫生监督机构建设指导意见，要月卫生部新出台卫生监督机构建设指导意见，要求省、市、地配置求省、市、地配置第2页/共11页第二页，共11页。什么什么(shn me)(shn me)是是ATPATPlATPATP三磷酸腺苷【三磷酸腺苷【adenosine adenosine triphosphatetriphosphate，C10H16N5P3O13C10H16N5P3O13】存在于所有存在于所有(suyu)(suyu)生物体中，生物体中，在细胞内主要作用是提供能量在细胞内主要作用是提供能量l通过检测通过检测ATP ATP ，可以间接地证明，可以间接地证明生物体的存在生物体的存在第3页/共11页第三页，共11页。 生物学发光(f un)检测法（ATP） 原理：ATP荧光检测仪基于萤火虫发光原理，利用“荧光素酶荧光素体系”快速检测三磷酸腺苷（ATP）。由于所有生物活细胞中含有恒量的ATP，细菌细胞裂解时会释放出ATP，ATP自细菌细胞释放出来后，使用荧光虫素和荧光虫素酶可使之释放出能量，这些能量产生莹光，光的强度就代表ATP的量。ATP含量可以清晰地表明样品中微生物与其他生物残余的多少(dusho)，用于判断卫生状况第4页/共11页第四页，共11页。使用使用(shyng)(shyng)方法方法-第第一步一步【SWABSWAB】 拭抹表面以获取标本拭抹表面以获取标本, ,如需如需获得获得(hud)(hud)清洗水溶液标本，清洗水溶液标本，则将棉拭子浸入水中则将棉拭子浸入水中3 3到到4 4秒钟。秒钟。1球管吸阀棉拭棒棉拭子检测管第5页/共11页第五页，共11页。使用使用(shyng)(shyng)方法方法-第第二步二步SNAP AND SQUEEZESNAP AND SQUEEZE 将拭子插入检测管，用拇指将拭子插入检测管，用拇指和中指和中指(zhngzh)(zhngzh)捏住球管，轻捏住球管，轻挤球管两次，挤出球管内液体。挤球管两次，挤出球管内液体。2第6页/共11页第六页，共11页。使用使用(shyng)(shyng)方法方法-第三步第三步INSERT AND DETECTINSERT AND DETECT 将检测将检测(jin c)(jin c)管放入管放入ATPATP荧光检测荧光检测(jin c)(jin c)仪中，仪中，盖上盖子，倒盖上盖子，倒 计计 时开始并检测时开始并检测(jin c)(jin c)。第7页/共11页第七页，共11页。ATPATP检测检测(jin c)(jin c)反应原理反应原理光（光（RLURLU）荧光素酶荧光素酶O2+Mg2+O2+Mg2+氧化氧化(ynghu)(ynghu)荧光素荧光素PPi+AMPPPi+AMP荧光荧光(ynggung)光度光度计测量计测量细胞细胞数量数量D-D-虫荧光素虫荧光素ATPATP微生物微生物植物植物动物动物第8页/共11页第八页，共11页。现场现场(xinchng)ATP(xinchng)ATP检测的意义检测的意义lATPATP检测技术实验结果准确可靠，值得检测技术实验结果准确可靠，值得(zh d)(zh d)信赖。美国多个专业信赖。美国多个专业权威机构研究了权威机构研究了10001000个以上的样品，这种只需十几秒就能完成检测个以上的样品，这种只需十几秒就能完成检测的快速检测法所得实验结果的快速检测法所得实验结果90%90%以上与以上与24-4824-48小时标准细菌培养法小时标准细菌培养法/ /平平皿法所得结果一致皿法所得结果一致l使细菌检查的工作量大幅度减轻，实现卫生监控的简捷化、效率化，使细菌检查的工作量大幅度减轻，实现卫生监控的简捷化、效率化，但只能用于细菌的定量分析，定性分析可用常规方法进行培养检测。但只能用于细菌的定量分析，定性分析可用常规方法进行培养检测。l应用于应用于HACCPHACCP的关键环节监测，方便有效。的关键环节监测，方便有效。第9页/共11页第九页，共11页。第10页/共11页第十页，共11页。感谢您的观看(gunkn)！第11页/共11页第十一页，共11页。