高考生物一轮总复习 第五十课时 动物细胞工程课件 新人教版选修3

第五十课时第五十课时 动物细胞工程动物细胞工程组织组织 单个细胞单个细胞 培养基培养基 生长和增殖生长和增殖 胰蛋白酶胰蛋白酶或胶原蛋白酶或胶原蛋白酶 单个细胞单个细胞 细胞悬液细胞悬液 原代原代 传代传代 贴附在瓶壁上贴附在瓶壁上 细胞贴壁细胞贴壁 相互接触相互接触 停止分裂增殖停止分裂增殖 细胞的接触抑制细胞的接触抑制 无菌、无毒的环境无菌、无毒的环境 无菌无菌 抗生素抗生素 代谢产物积累对细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害自身造成危害 营养营养 血清、血浆血清、血浆 温度和温度和pH 36.50.5 7.27.4 气体环境气体环境 空气空气 CO2 细胞代谢细胞代谢 维持培养液的维持培养液的pH C 【解析解析】考查动物细胞的非克隆条件下的培养，动物细考查动物细胞的非克隆条件下的培养，动物细胞培养要求在无菌条件下，因此，需要对实验小鼠进行胞培养要求在无菌条件下，因此，需要对实验小鼠进行消毒获得皮肤组织。加入胰蛋白酶消化组织中的胶原纤消毒获得皮肤组织。加入胰蛋白酶消化组织中的胶原纤维和细胞外的其他成分，可获得单个皮肤细胞。皮肤细维和细胞外的其他成分，可获得单个皮肤细胞。皮肤细胞原代培养时胞原代培养时(丙过程丙过程)遗传物质不发生变化，细胞能保遗传物质不发生变化，细胞能保持正常的二倍体核型；皮肤细胞传代培养时持正常的二倍体核型；皮肤细胞传代培养时(丁过程丁过程)，从原代培养物或细胞系中可获得具有特殊性质的细胞，从原代培养物或细胞系中可获得具有特殊性质的细胞，具有异质性。具有异质性。考点二动物体细胞核移植技术考点二动物体细胞核移植技术【回扣教材回扣教材】1动物核移植是将动物的一个细胞的动物核移植是将动物的一个细胞的_，移入，移入一个已经去掉细胞核的一个已经去掉细胞核的_中，使其重组并中，使其重组并发育成一个新的发育成一个新的_，这个新的胚胎最终发育为，这个新的胚胎最终发育为_。用核移植的方法得到的是。用核移植的方法得到的是_。2动物细胞核移植可以分为动物细胞核移植可以分为_核移植核移植(比较容比较容易易)和和_核移植核移植(比较难比较难)。动物体细胞。动物体细胞核移植选用去核卵核移植选用去核卵(母母)细胞的原因：卵细胞的原因：卵(母母)细胞细胞_；卵；卵(母母)细胞细胞_。细胞核细胞核卵母细胞卵母细胞胚胎胚胎动物个体动物个体克隆动物克隆动物胚胎细胞胚胎细胞体细胞体细胞比较大，容易操作比较大，容易操作细胞质多，营养丰富细胞质多，营养丰富良种动物良种动物 医用蛋白医用蛋白 细胞细胞 组织组织 器官器官 【知识拓展知识拓展】动物体细胞移植的特点：动物体细胞移植的特点：动物体细胞移植依据的原理是细胞核的全能性，与植物组动物体细胞移植依据的原理是细胞核的全能性，与植物组织培养一样属于无性生殖。虽然细胞核内具有发展成为一织培养一样属于无性生殖。虽然细胞核内具有发展成为一个完整个体所需的全套基因，但动物体细胞分化程度较高，个完整个体所需的全套基因，但动物体细胞分化程度较高，因此很难表达全能性。卵细胞体积大，易于操作，含有促因此很难表达全能性。卵细胞体积大，易于操作，含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件。将体细胞核移植使细胞核表达全能性的物质和营养条件。将体细胞核移植入去核卵细胞内，既保证了重组细胞的完整性，又能刺激入去核卵细胞内，既保证了重组细胞的完整性，又能刺激体细胞核表达其全能性，发展成为一个新的个体。动物体体细胞核表达其全能性，发展成为一个新的个体。动物体细胞核移植产生的新个体的亲本有三个：体细胞核供体、细胞核移植产生的新个体的亲本有三个：体细胞核供体、卵细胞细胞质供体、代孕母体。新个体细胞核基因型与体卵细胞细胞质供体、代孕母体。新个体细胞核基因型与体细胞核供体完全一样，因此新个体性状与体细胞核供体基细胞核供体完全一样，因此新个体性状与体细胞核供体基本相同。卵细胞细胞质中也有少量的本相同。卵细胞细胞质中也有少量的DNA，新个体性状与，新个体性状与卵细胞细胞质供体有一些地方相同。代孕母体没有为新个卵细胞细胞质供体有一些地方相同。代孕母体没有为新个体提供遗传物质，新个体性状与代孕母体基本没有联系。体提供遗传物质，新个体性状与代孕母体基本没有联系。D (2)小羊小羊a、小羊、小羊b、小羊、小羊c的性状表现相同，原因是的性状表现相同，原因是_。(3)要检测产奶羊要检测产奶羊N的细胞中染色体的细胞中染色体DNA上是否插入了牛上是否插入了牛乳蛋白基因，通常采用乳蛋白基因，通常采用_技术。技术。(4)当重组细胞发育至形态正常的桑椹胚或囊胚时，方可当重组细胞发育至形态正常的桑椹胚或囊胚时，方可进行胚胎分割，原因是进行胚胎分割，原因是_。若小羊。若小羊a为雌性，可采用体外受精的方为雌性，可采用体外受精的方法使小羊法使小羊a在一年内繁殖数千头自己的后代，该方法主要在一年内繁殖数千头自己的后代，该方法主要包括包括_、_、受精等几、受精等几个主要步骤。个主要步骤。三只小羊是由同一个重组细胞发育而成的三只小羊是由同一个重组细胞发育而成的DNA分子杂交分子杂交(基因探针基因探针)全能性高全能性高该时期的细胞分化程度低，该时期的细胞分化程度低，卵母细胞的采集卵母细胞的采集精子的获取精子的获取【考查类型考查类型】本题主要考查了动物细胞核移植技术。本题主要考查了动物细胞核移植技术。【解析解析】该图涉及的生物技术有基因工程、动物体细胞该图涉及的生物技术有基因工程、动物体细胞核移植及胚胎移植等，由于小羊核移植及胚胎移植等，由于小羊a、小羊、小羊b、小羊、小羊c是由是由胚胎分割而来的，具有相同的遗传物质，性状表现也相胚胎分割而来的，具有相同的遗传物质，性状表现也相同。同。【方法归纳方法归纳】本题有较强的综合性，包括了基因工程、本题有较强的综合性，包括了基因工程、动物体细胞核移植及胚胎移植等现代生物技术，在复习动物体细胞核移植及胚胎移植等现代生物技术，在复习时要有意识地找出有联系的知识点，通过比较学习才能时要有意识地找出有联系的知识点，通过比较学习才能对知识有进一步的巩固。对知识有进一步的巩固。考点三动物细胞融合与单克隆抗体考点三动物细胞融合与单克隆抗体【回扣教材回扣教材】1动物细胞融合动物细胞融合(1)动物细胞融合也称动物细胞融合也称_，是指两个或多个动物，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来_细胞遗传信息的单核细胞，称为细胞遗传信息的单核细胞，称为_。(2)动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似，常用的诱导因素有似，常用的诱导因素有_等。等。细胞杂交细胞杂交两个或多个两个或多个杂交细胞杂交细胞、电激、电激聚乙二醇聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、灭活的病毒(3)动物细胞融合的意义：突破了有性杂交方法的局限，动物细胞融合的意义：突破了有性杂交方法的局限，克服了克服了_，成为研究细胞遗，成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育的重要手段。2单克隆抗体单克隆抗体(1)单克隆抗体：一个单克隆抗体：一个B淋巴细胞只分泌一种淋巴细胞只分泌一种_。要想获得大量的单一抗体，必须克隆单一的要想获得大量的单一抗体，必须克隆单一的B淋巴细胞，淋巴细胞，形成细胞群，其产生的抗体就是单克隆抗体。传统方法形成细胞群，其产生的抗体就是单克隆抗体。传统方法从血清中分离出的抗体从血清中分离出的抗体_。(2)杂交瘤细胞的特点：既能大量杂交瘤细胞的特点：既能大量_，又能产生，又能产生_。(3)单克隆抗体的优点：单克隆抗体的优点：_。 不同生物远缘杂交的障碍不同生物远缘杂交的障碍特异性抗体特异性抗体特异性差特异性差产量低、纯度低、产量低、纯度低、繁殖繁殖专一的抗体专一的抗体能大量制备能大量制备特异性强，灵敏度高，并特异性强，灵敏度高，并(4)单克隆抗体的应用：单克隆抗体的应用：作为诊断试剂，具备作为诊断试剂，具备_的优点；的优点；用于治疗疾用于治疗疾病和运载药物，如用于癌症的治疗。单抗药物可单独病和运载药物，如用于癌症的治疗。单抗药物可单独使用，也可与使用，也可与_、药物结合使用，制、药物结合使用，制成成“生物导弹生物导弹”。准确、高效、简易、快速准确、高效、简易、快速同位素、毒素同位素、毒素【知识拓展知识拓展】植物体细胞杂交和动物细胞融合的拓展分析植物体细胞杂交和动物细胞融合的拓展分析(1)植物植物A、B是二倍体，体细胞中的染色体数是是二倍体，体细胞中的染色体数是2n，则，则杂种细胞杂种细胞C就是就是4n，称为异源四倍体。，称为异源四倍体。(2)利用植物体细胞杂交的方法培育作物新品种的过程中，利用植物体细胞杂交的方法培育作物新品种的过程中，其遗传物质的传递不遵循孟德尔的遗传规律，因为生物其遗传物质的传递不遵循孟德尔的遗传规律，因为生物在进行有性生殖时才遵循孟德尔的遗传规律，而植物体在进行有性生殖时才遵循孟德尔的遗传规律，而植物体细胞杂交的过程不属于有性生殖。细胞杂交的过程不属于有性生殖。(3)动物细胞融合后获得的杂种细胞，目前还没有办法让动物细胞融合后获得的杂种细胞，目前还没有办法让其发育成一个个体，它不同于其发育成一个个体，它不同于“克隆克隆”，也不同于植物，也不同于植物体细胞杂交。体细胞杂交。(4)两者在融合过程中都会发生多种融合方式，如两者在融合过程中都会发生多种融合方式，如AA、BB、AB，因此要进行筛选。，因此要进行筛选。(5)两者都要用到细胞融合和细胞培养两个技术手段。两者都要用到细胞融合和细胞培养两个技术手段。(6)动物细胞培养中用选择性培养基先后选择出杂交瘤细动物细胞培养中用选择性培养基先后选择出杂交瘤细胞和能产生特定抗体的细胞群。胞和能产生特定抗体的细胞群。(7)植物体细胞杂交的终点不是杂种细胞，而是杂种植株，植物体细胞杂交的终点不是杂种细胞，而是杂种植株，所以其原理有两个：一是细胞的全能性；二是细胞膜的所以其原理有两个：一是细胞的全能性；二是细胞膜的流动性。动物细胞融合是形成杂交瘤细胞，不是形成新流动性。动物细胞融合是形成杂交瘤细胞，不是形成新个体，所以其原理只有一个，即体现细胞膜的流动性。个体，所以其原理只有一个，即体现细胞膜的流动性。 【典例精析典例精析】【例例3】(2013重庆重庆)下图是单克隆抗体制备流程的简下图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述，正确的是明示意图。下列有关叙述，正确的是( )DA是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞淋巴细胞B中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成C同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性D是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群【解析解析】是从已免疫的小鼠脾脏中获得的是从已免疫的小鼠脾脏中获得的B淋巴细胞；淋巴细胞；胰蛋白酶可用于动物组织细胞的分离，胰蛋白酶可用于动物组织细胞的分离，中使用胰蛋白中使用胰蛋白酶则不利于杂交细胞的融合；酶则不利于杂交细胞的融合；为杂交融合细胞，其中为杂交融合细胞，其中包括包括B淋巴细胞与淋巴细胞与B淋巴细胞的融合细胞，鼠骨髓瘤细淋巴细胞的融合细胞，鼠骨髓瘤细胞与鼠骨髓瘤细胞的融合细胞，而这两类细胞不可能同胞与鼠骨髓瘤细胞的融合细胞，而这两类细胞不可能同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性；时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性；是经筛选培是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群，养获得的能分泌特异性抗体的细胞群，D对。对。课时练习五十课时练习五十一、选择题一、选择题(每小题只有一个正确选项每小题只有一个正确选项)1下列叙述中，正确的是下列叙述中，正确的是( )A培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞细胞B克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变变C二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的D恶性细胞系的细胞可进行传代培养恶性细胞系的细胞可进行传代培养D【解析解析】培养的细胞在培养瓶壁上发生接触抑制时只培养的细胞在培养瓶壁上发生接触抑制时只有单层细胞，此时若要继续培养，则需用胰蛋白酶处有单层细胞，此时若要继续培养，则需用胰蛋白酶处理后进行传代培养，理后进行传代培养，A错误；克隆培养法培养过程中错误；克隆培养法培养过程中多数细胞的增殖会停止，只有部分细胞的基因型会发多数细胞的增殖会停止，只有部分细胞的基因型会发生改变，生改变，B、C错误；恶性细胞系的细胞已经发生突错误；恶性细胞系的细胞已经发生突变，获得不死性，可进行传代培养。变，获得不死性，可进行传代培养。2下列人体细胞中分化程度最低的是下列人体细胞中分化程度最低的是( )A胚胎干细胞胚胎干细胞 B造血干细胞造血干细胞C胰腺细胞胰腺细胞 D肌肉细胞肌肉细胞【解析解析】 胰腺细胞和肌肉细胞都是高度分化的细胞，分胰腺细胞和肌肉细胞都是高度分化的细胞，分化程度越高的，全能性越低；胚胎干细胞和造血干细胞化程度越高的，全能性越低；胚胎干细胞和造血干细胞都是可以进行分裂分化的细胞，但胚胎干细胞分化程度都是可以进行分裂分化的细胞，但胚胎干细胞分化程度比造血干细胞低。比造血干细胞低。A3下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( )A培养中的人效应培养中的人效应T细胞能产生单克隆抗体细胞能产生单克隆抗体B培养中的人培养中的人B细胞能够无限增殖细胞能够无限增殖C人的成熟红细胞经过培养能形成细胞群人的成熟红细胞经过培养能形成细胞群D用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞【解析解析】 效应效应B细胞与骨髓瘤细胞融合后可以产生单克细胞与骨髓瘤细胞融合后可以产生单克隆抗体，单独的隆抗体，单独的B细胞是不能无限增殖的，细胞是不能无限增殖的，A、B错误；错误；人的成熟红细胞没有细胞核，不能继续增殖培养，人的成熟红细胞没有细胞核，不能继续增殖培养，C错错误。误。DC C C进行细胞核移植时，受体细胞宜采用进行细胞核移植时，受体细胞宜采用M期的卵母细期的卵母细胞胞D在在过程培养重组细胞时需添加动物血清、抗生素等过程培养重组细胞时需添加动物血清、抗生素等物质物质【解析解析】A正确，正确，PCR技术是一项在生物体外复制特定技术是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术；片段的核酸合成技术；B正确，正确，过程是构建重组过程是构建重组DNA分子，通常用同一种限制性内切酶切割目的基因和分子，通常用同一种限制性内切酶切割目的基因和运载体；运载体；C错误，细胞核移植技术中，受体卵母细胞处于错误，细胞核移植技术中，受体卵母细胞处于M期期(减数第二次分裂中期减数第二次分裂中期)；D正确，进行动物细胞培正确，进行动物细胞培养时，加入动物血清为细胞提供必须的营养，加入抗生素养时，加入动物血清为细胞提供必须的营养，加入抗生素杀菌以创设无菌环境。杀菌以创设无菌环境。6单克隆抗体与血清抗体相比，优越之处主要在于单克隆抗体与血清抗体相比，优越之处主要在于( )A单克隆抗体能够制成单克隆抗体能够制成“生物导弹生物导弹”B单克隆抗体可以在体外制备单克隆抗体可以在体外制备C单克隆抗体的特异性强、灵敏度高，产量也大大高单克隆抗体的特异性强、灵敏度高，产量也大大高于血清抗体于血清抗体D单克隆抗体的制备过程简单单克隆抗体的制备过程简单【解析解析】 血清抗体虽然容易获得，但由于含有多种抗血清抗体虽然容易获得，但由于含有多种抗体，所以应用范围比较窄。体，所以应用范围比较窄。C7关于动物细胞培养的叙述错误的是关于动物细胞培养的叙述错误的是( )A用于培养的细胞最好取自健康动物体内的组织细胞用于培养的细胞最好取自健康动物体内的组织细胞B将所取的组织先用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理将所取的组织先用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理使其分散成单个细胞，再稀释制成细胞悬液培养使其分散成单个细胞，再稀释制成细胞悬液培养C在培养瓶中要定期用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处在培养瓶中要定期用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖D传代培养的细胞在传至传代培养的细胞在传至1050代左右时，增殖会逐代左右时，增殖会逐渐减慢，以至于完全停止，所培养的细胞全部衰老死亡渐减慢，以至于完全停止，所培养的细胞全部衰老死亡【解析解析】D错，细胞传至错，细胞传至1050代时，部分细胞的细胞代时，部分细胞的细胞核型发生变化，当继续传代培养时，少部分细胞会克服核型发生变化，当继续传代培养时，少部分细胞会克服细胞寿命的极限获得不死性，这些细胞已发生突变，朝细胞寿命的极限获得不死性，这些细胞已发生突变，朝癌细胞方向发展。癌细胞方向发展。D8通过细胞工程生产单克隆抗体时，要涉及到以下三个通过细胞工程生产单克隆抗体时，要涉及到以下三个筛选过程，这三个过程的先后顺序是筛选过程，这三个过程的先后顺序是( )在特定培养基中筛选出杂交瘤细胞在特定培养基中筛选出杂交瘤细胞选出能产生抗体选出能产生抗体的的B淋巴细胞淋巴细胞选出能产生特定抗体并能大量增殖的细选出能产生特定抗体并能大量增殖的细胞群胞群A B C D【解析解析】 生产单克隆抗体时，经抗原处理后，先选出能产生产单克隆抗体时，经抗原处理后，先选出能产生抗体的生抗体的B淋巴细胞，将这些淋巴细胞，将这些B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，融合的结果可能出现亲本核相互融合的细胞和杂交瘤合，融合的结果可能出现亲本核相互融合的细胞和杂交瘤细胞，所以先在特定培养基上选出杂交瘤细胞，再选出能细胞，所以先在特定培养基上选出杂交瘤细胞，再选出能产生特定抗体并能大量增殖的细胞群。产生特定抗体并能大量增殖的细胞群。C9动物细胞融合的目的中最重要的是动物细胞融合的目的中最重要的是( )A克服远缘杂交不亲和克服远缘杂交不亲和B制备单克隆抗体制备单克隆抗体C培育新物种培育新物种D生产杂种细胞生产杂种细胞【解析解析】动物细胞融合获得的是杂种细胞，目前还没动物细胞融合获得的是杂种细胞，目前还没有办法让其发育成一个个体，它不同于克隆和植物体有办法让其发育成一个个体，它不同于克隆和植物体细胞杂交，所以动物细胞融合的最重要目的是生产杂细胞杂交，所以动物细胞融合的最重要目的是生产杂种细胞。种细胞。D10动物细胞体外培养一般需要满足以下条件动物细胞体外培养一般需要满足以下条件( )无毒的环境无毒的环境无菌的环境无菌的环境合成培养基需加血合成培养基需加血浆浆温度与动物体温相近温度与动物体温相近需要需要O2，不需要，不需要CO2CO2能调节培养液能调节培养液pHA BC D【解析解析】中不需中不需CO2错误，细胞培养所需气体环境错误，细胞培养所需气体环境主要有主要有O2和和CO2，O2是细胞代谢必需的，是细胞代谢必需的，CO2能维持能维持培养液的培养液的pH。D11分化中的两栖类细胞核中，分化中的两栖类细胞核中，RNA的合成非常旺盛，的合成非常旺盛，但移植到去核卵细胞后，但移植到去核卵细胞后，RNA的合成立即停止。下列的合成立即停止。下列对这一实验现象的分析中，合理的解释是对这一实验现象的分析中，合理的解释是( )A移植的核基因结构改变了移植的核基因结构改变了B卵细胞内含有阻抑基因表达的物质卵细胞内含有阻抑基因表达的物质C卵细胞内缺少合成卵细胞内缺少合成RNA聚合酶的细胞器聚合酶的细胞器D实验中丢失了实验中丢失了RNA合成的模板合成的模板B12动物细胞培养和植物组织培养的主要区别是动物细胞培养和植物组织培养的主要区别是( )A动物细胞培养所用的培养基的成分与植物的不同动物细胞培养所用的培养基的成分与植物的不同B动物细胞培养是培养单个细胞，植物组织培养是培动物细胞培养是培养单个细胞，植物组织培养是培养组织养组织C动物细胞培养可以传代培养，而植物组织培养不能动物细胞培养可以传代培养，而植物组织培养不能传代培养传代培养D动物细胞培养过程中可发生遗传物质的改变，而植动物细胞培养过程中可发生遗传物质的改变，而植物组织培养不能物组织培养不能【解析解析】 动物细胞的液体培养基中添加了葡萄糖和血动物细胞的液体培养基中添加了葡萄糖和血浆等，植物细胞的培养基添加的是蔗糖，并需要加入琼浆等，植物细胞的培养基添加的是蔗糖，并需要加入琼脂形成固态。脂形成固态。A13某小鼠生活过程中被多种病原体感染过，科学家某小鼠生活过程中被多种病原体感染过，科学家以该小鼠为实验材料，利用单克隆抗体技术，获得了以该小鼠为实验材料，利用单克隆抗体技术，获得了抗某种病原体的高纯度单克隆抗体。下列叙述不正确抗某种病原体的高纯度单克隆抗体。下列叙述不正确的是的是( )A被多种病原体感染过的小鼠体内会产生多种效应被多种病原体感染过的小鼠体内会产生多种效应B细胞细胞B经细胞融合后形成的单个杂交瘤细胞可分泌多种经细胞融合后形成的单个杂交瘤细胞可分泌多种特异性抗体特异性抗体C用用“抗原抗原抗体检测法抗体检测法”可筛选出产生特定抗体的可筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞杂交瘤细胞D单克隆抗体的制备过程中使用了细胞培养和细胞单克隆抗体的制备过程中使用了细胞培养和细胞融合技术融合技术B动物细胞培养动物细胞培养 细胞核移植细胞核移植 脑垂体脑垂体(垂体垂体) F 具有全能性具有全能性 乳腺细胞的细胞核乳腺细胞的细胞核无性生殖无性生殖 (4)若若a、b分别是基因型为分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性纯合基因一对隐性纯合基因(rr或或hh)的作用，在光照强度大于的作用，在光照强度大于800 lx时都不能生长。要想从融合细胞的培养液中分离出基时都不能生长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为因型为HhRr的杂种细胞，较为简便的筛选方法是的杂种细胞，较为简便的筛选方法是_。(5)若若a、b表示两种植物体细胞，则由表示两种植物体细胞，则由d细胞形成杂种植细胞形成杂种植株的原理是株的原理是_。(6)若若a、b分别为骨髓瘤细胞和分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则淋巴细胞，则d细胞特点细胞特点是是_。由。由d细细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较，具有胞产生的抗体与普通血清抗体相比较，具有_的特点的特点(至少写出两点至少写出两点)。生产上一般。生产上一般不能通过直接培养不能通过直接培养B淋巴细胞的方法生产单克隆抗体的淋巴细胞的方法生产单克隆抗体的主要原因是主要原因是_。大于大于800 lx光照光照植物细胞的全能性植物细胞的全能性既能无限繁殖，又能产生特定的抗体既能无限繁殖，又能产生特定的抗体学性质单一、灵敏度高学性质单一、灵敏度高特异性强、化特异性强、化未经免疫的未经免疫的B淋巴细胞不能产生抗体淋巴细胞不能产生抗体动物细胞融合动物细胞融合 胰蛋白酶胰蛋白酶 (2)A细胞的特点是细胞的特点是_，经选，经选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行择性培养的杂交瘤细胞，还需进行_和抗和抗体检测，经多次筛选就可获得足够数量的能分泌所需抗体检测，经多次筛选就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞，进行体内或体外培养。体的细胞，进行体内或体外培养。(3)单克隆抗体与常规抗体相比，具有单克隆抗体与常规抗体相比，具有_的特点。的特点。(4)过程优质奶牛的培育过程需要进行胚胎移植，移植过程优质奶牛的培育过程需要进行胚胎移植，移植后的胚胎能在受体子宫中存活，其生理基础是后的胚胎能在受体子宫中存活，其生理基础是_。(5)若要同时获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对若要同时获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对中囊胚进行中囊胚进行_，操作过程需，操作过程需要特别注意的问题是：要特别注意的问题是：_。否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步。否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。发育。 无限增殖和产生特定抗体无限增殖和产生特定抗体克隆化培养克隆化培养特异性强，灵特异性强，灵敏度高敏度高受体对移受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应胚胎分割移植胚胎分割移植(或胚胎分割或胚胎分割) 注意将囊胚的内细胞团进行注意将囊胚的内细胞团进行均等分割均等分割浆细胞不能无限增殖浆细胞不能无限增殖 抗原抗原 (3)在单克隆抗体制备过程中之所以选用在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有_、_的特性。的特性。(4)单克隆抗体制备过程运用了单克隆抗体制备过程运用了_和和_的动物细胞工程技术手段。的动物细胞工程技术手段。(5)动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、抗生素、维生素等，与植物细胞培养基有所不无机盐、抗生素、维生素等，与植物细胞培养基有所不同的是，还含有同的是，还含有_。(6)在动物细胞融合过程中，需要将所选取的组织细胞在动物细胞融合过程中，需要将所选取的组织细胞离散开，以利于细胞融合，可用离散开，以利于细胞融合，可用_处理离体组织细胞使之分散开。处理离体组织细胞使之分散开。在体外大量繁殖在体外大量繁殖产生特异性抗体产生特异性抗体动物细胞融合动物细胞融合动物细胞培养动物细胞培养动物血清动物血清胰蛋白酶胰蛋白酶(或胶原或胶原蛋白酶蛋白酶) (7)鼠源杂交瘤抗体与普通血清抗体相比较，具有鼠源杂交瘤抗体与普通血清抗体相比较，具有_的特点。的特点。(8)改造鼠源杂交瘤抗体，生产鼠改造鼠源杂交瘤抗体，生产鼠人嵌合抗体，属于人嵌合抗体，属于_(生物工程生物工程)的范畴。图示过程是根据预的范畴。图示过程是根据预期的期的_，设计，设计_，最终必须对最终必须对_进行操作。进行操作。(9)经过改造的鼠经过改造的鼠人嵌合抗体，与鼠源杂交瘤抗体相比人嵌合抗体，与鼠源杂交瘤抗体相比较，突出的优点是较，突出的优点是_。特异性强、灵敏度高特异性强、灵敏度高蛋白质工程蛋白质工程嵌合抗体功能嵌合抗体功能嵌合抗体的结构嵌合抗体的结构基因基因对人体的不良反应对人体的不良反应(或过敏反应或过敏反应等副作用等副作用)减少减少【解析解析】(1)由于浆细胞没有无限增殖的能力，因此不能由于浆细胞没有无限增殖的能力，因此不能通过培养浆细胞生产单克隆抗体；通过培养浆细胞生产单克隆抗体；(2)单克隆抗体制备时，单克隆抗体制备时，需要先把抗原注入小鼠的体内，刺激其产生浆细胞，然需要先把抗原注入小鼠的体内，刺激其产生浆细胞，然后从小鼠的脾脏中把浆细胞分离出来，与骨髓瘤细胞融后从小鼠的脾脏中把浆细胞分离出来，与骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞；合成杂交瘤细胞；(3)杂交瘤细胞具有无限增殖的特性，杂交瘤细胞具有无限增殖的特性，也具有合成抗体的能力；也具有合成抗体的能力；(4)单克隆抗体制备过程中使用单克隆抗体制备过程中使用了动物细胞融合、动物细胞培养等技术；了动物细胞融合、动物细胞培养等技术；(5)动物细胞培动物细胞培养液中，必须有动物血清；养液中，必须有动物血清；(6)用胰蛋白酶用胰蛋白酶(胶原蛋白酶胶原蛋白酶)可以把动物组织分散成单个细胞；可以把动物组织分散成单个细胞；(7)单克隆抗体具有特单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特性；异性强、灵敏度高的特性；(8)从图中看改造鼠源杂交瘤从图中看改造鼠源杂交瘤抗体，生产鼠抗体，生产鼠人嵌合抗体，属于蛋白质工程的范畴；人嵌合抗体，属于蛋白质工程的范畴；(9)鼠鼠人嵌合抗体的优点是副作用减少。人嵌合抗体的优点是副作用减少。注射相应的抗原注射相应的抗原 (2)细胞细胞DNA合成一般有两条途径。主途径是由糖和氨合成一般有两条途径。主途径是由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成基酸合成核苷酸，进而合成DNA，叶酸作为重要的辅酶，叶酸作为重要的辅酶参与这一合成过程。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺参与这一合成过程。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经次黄嘌呤磷酸核糖转化酶嘧啶核苷存在的情况下，经次黄嘌呤磷酸核糖转化酶(HGPRT)和胸腺嘧啶核苷激酶和胸腺嘧啶核苷激酶(TK)的催化作用合成的催化作用合成DNA。HAT培养基中有三种关键成分：次黄嘌呤培养基中有三种关键成分：次黄嘌呤(H)、氨甲蝶呤氨甲蝶呤(A)和胸腺嘧啶核苷和胸腺嘧啶核苷(T)，氨甲蝶呤是叶酸的拮，氨甲蝶呤是叶酸的拮抗剂。抗剂。在在HAT培养基中能将瘤细胞淘汰的物质是培养基中能将瘤细胞淘汰的物质是_。在在HAT培养基中脾细胞被淘汰的原因是培养基中脾细胞被淘汰的原因是_。第二次筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞所用的技术第二次筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞所用的技术是是_。 氨甲蝶呤氨甲蝶呤不能无限增殖不能无限增殖抗原抗原抗体杂交抗体杂交(3)培养杂交瘤细胞的培养基中需加入动物血清的原因培养杂交瘤细胞的培养基中需加入动物血清的原因是是_。(4)杂交瘤细胞有氧呼吸过程中产生的杂交瘤细胞有氧呼吸过程中产生的H来自于反应物来自于反应物中的中的_，在，在_处与氧结合。处与氧结合。(5)杂交瘤细胞在增殖过程中能形成杂交瘤细胞在增殖过程中能形成_个四分体。个四分体。(6)杂交瘤细胞体外培养过程中，为避免毒害，常采取杂交瘤细胞体外培养过程中，为避免毒害，常采取的措施是的措施是_。(7)如果破坏杂交瘤细胞中的核仁，抗体合成将不能进如果破坏杂交瘤细胞中的核仁，抗体合成将不能进行，因为该结构与行，因为该结构与_的合成有关。的合成有关。血清中含有未知的促进细胞增殖的物质血清中含有未知的促进细胞增殖的物质葡萄糖和水葡萄糖和水线粒体内膜线粒体内膜0定期更换培养液定期更换培养液核仁核仁