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临床基础检验专业(1)分析前质量控制主要是通过室内质控和室间质评来加强加强实验室内部各实验环节的质量管理,提高高检验结果的精确性、准确性和可比性。检验医学质量控制包括:分析前、分析中、分析后三个部分。当今实验室仪器设备自动化、微量化程度在快速地提高,各种试剂稳定性能不断加强。分析中、分析后检验质量控制又已被检验界所重视,如果分析前质量控制做不好得不到正确的表白,那就无从谈结果的正确与否。因此,搞好分析前的质量控制是保证检验质量的前提。如何在实践中把认为因素引起的差错降到最低限度,消灭过失误差,尽量减少偶然和系统误差,必须引起检验人员的高度重视。1 .检验标本采集前的质量控制1.1各级医务人员要高度重视检验质量控制的重要性,宣传检验质量与疾病的诊断、治疗及疗效观察的关系,牢固树立“质量第一”的思想。1.2检验人员要给医护人员讲解收集标本的注意事项及其影响因素,最好通过护理部对护士进行检验标本采集的培训。如标本采集前的准备要求临床医生在下医嘱时告知患者需要注意的事项。检测血脂、蛋白质、酶类等生化项目时,应在3d内禁食或者减少食用高脂肪、高蛋白、肉类、动物血等食物及含叶绿素、胡萝卜素多的蔬菜。除急诊患者或特殊原因外,一般主张进食12h后空腹采血,并停服一切对检验项目有影响的药物,对患者讲清楚目的引起患者重视,配合做好检验标本留取前的准备工作。2 .检验标本采集时的质量控制2.1严格做好查对制度,采血试管的标签上要填写清楚患者室科、姓名、住院号、床号,与申请单一致。根据不同检验项目,将标本注入不同的试管内。2.2血液标本采集时的注意事项静脉采血应取坐位,使用止血带的时间不得超过1min,穿刺成功立即松开止血带,血液抽出后要沿着管壁慢慢注入到抗凝管或干净试管中。按检验项目加入特别规定的抗凝剂,如凝血酶原时间测定应加入1烧酸钠,送检标本中加入乙二胺四乙酸抗凝。血液标本中抗凝剂比例要适当,如血沉标本按1:4抗凝。标本采集后放置时间不要超过2h;采集标本时要检查医嘱用药情况,如静脉用葡萄糖、氯化钾或口服药物等。2.3尿液标本留取时的注意事项护理人员应指导住院患者正确留取尿液,容器应清洁干燥,避免经血、白带、精液、粪便等混入;标本应新鲜,以晨尿为宜,如放置时间过长,尿酮体中的乙酰乙酸易挥发,还应避光。尿培养标本应清洁外阴,无菌操作,留取中段尿或无菌穿刺膀胱留取尿液。2.4大便标本采集标本要求新鲜取有脓血或黏液部分,尽快送检,做潜血试验,应告诉患者3d内素食。禁服含铁药物和禁食含铁蔬菜等避免鼻血、牙龈出血、经血的影响;做细菌培养的标本应用无菌操作收集。1体液及分泌物标本留取时的质量控制脑脊液标本采集后要立即送检,一般不能超过1h,因时间过长细胞易破坏或沉淀、糖分解、细胞溶解。痰标本收集时间应向患者说明检验目的和收集标本方法,痰液的一般检查应收集新鲜痰留取标本前用清水漱口3次之后用力咳出。咳痰较困难者可用雾化蒸气吸入以利痰液咳出。幼儿可用手指轻叩胸骨柄上方以诱发咳痰。由于工作性质的不同,临床医护人员对检验工作影响因素不甚了解,在主观上没有引起重视,这是检验质量中最薄弱的环节。为了加强检验质量控制,笔者认为应定期与临床科室联系举办业务讲座,通过讲座使医护人员对检验技术有更深的了解。如各项指标的误差范围、误差来源、标本的正确采集等,完善各项规章制度,强化质量管理,重视检验质控实验室外部各环节的质量管理,达到预防和控制检验误差的目的。毛如血菅采血法手指按需要依次采血特酒精挥发干后捏紧果血部位.刺入之1 1褊E.E.爆去第一清血,爆去第一清血,果血完毕,用干输球压住饬口片刻,用左手姆指和食指右手持栗血针,迅速用于高血微量的检查的检查一、采血部位k k不宜使用成人: 左手无名指或中指指端内隰(WHO)(WHO)I I娶幼儿:大揩趾或是跟内外恻绛严重烧伤患者;皮肤完整处,枭血针三、窠血步舞轻轻技岸采皿部位,使其自然充血75%75%酒精棉球消毒.J J血液标本的采集毛细血菅用应差_四、注意事项713-Numbered_45eceb76-19c1-4ba1-99b2-9f40bc28631d-Numbered_5a52dce6-efae-4074-ab14-9baa0a9568a2-Numb.采血部位不能有冻疮、紫州、水肿和炎症等.713-Numbered_45eceb76-19c1-4ba1-99b2-9f40bc28631d-Numbered_5a52dce6-efae-4074-ab14-9baa0a9568a2-Numb.消毒后,待酒精干后采血。713-Numbered_45eceb76-19c1-4ba1-99b2-9f40bc28631d-Numbered_5a52dce6-efae-4074-ab14-9baa0a9568a2-Numb. .取血时切忌用力挤压.713-Numbered_45eceb76-19c1-4ba1-99b2-9f40bc28631d-Numbered_5a52dce6-efae-4074-ab14-9baa0a9568a2-Numb.手工法时, 采集标本的次序为:PLTPLT、RBCRBC、HbHb、WBCWBC 及分类血液标本的采集静脉采血法用于需血较多或全自动血液分析仪测定.一、采血部位常用肘部静脉。也可手背或外踝静脉等。二、采血器材注射器、压脉带、垫枕、7575、酒精、碘酒、无菌棉釜(球)等.血液标本的采集,静脉采血法三、采血步哪四、注意事项.防止标本溶血. .压脉带压迫时间不能过长. .切忌将注射器往酵脉内推.抗凝;用物理或化学的方法,去除或抑制某些凝血因子,阻止血液凝固。抗凝剂(anticoagulantanticoagulant):):能够阻止血液凝固的化学试剂或物质.一.枸格酸钠(柠檬酸钠)抗般原理:与血中钙离子结合形成螯合物适用项目:凝血象检查、红细胞沉降率、血液保养液I血液标本的抗兼.常用的抗豪剂二.草酸钠三.双草酸盐抗凝剂抗凝原理:与钙离子形成草酸钙沉淀.草酸钾(钠)使RBCRBC 蝮缩,草籁铉使RBCRBC胀大.适用项目:血细胞比容、红细胞计数不适于血小板计数和白细胞分类计数I血波标本的抗凝.常用的抗聚剂四.乙二胺四乙酸(EDTAEDTA)盐抗凝原理:与钙离子结合形成鳌合物适用项目:EDTA*2EDTA*2 用于血细胞计数(ICSHICSH)血细胞比容测定不适于凝血象检查及血小板功能试验.血液标本的抗粲常用的抗豪剂优点:防溶血防标本污染防交叉感染可多管采集缺点:成本较高血液标本的聚集真空静脉(负压)采血法I I 血演标本的执掘,常用的抗我剂五.肝素抗凝原理;加强抗凝血廉IIIIII灭活丝期酸蛋白酶,从而阻止凝血酹形成、抑制血小板聚集.通用项目,红细胞潘遗脆性试监血细胞比客IIII定各种生化分析不适于白细胞计效及分类计数(3)分析前质量控制手工法白细胞计数原理:血液经稀酸稀释后,成熟红细胞全部被溶解,注入汁数池后,在显微镜下计数白细胞。.仪器:OLYMPUS显微镜、血球计数板.试剂:冰醋酸2ml,蒸储水98ml,10g/L亚甲蓝溶液3滴,混匀过滤后备用。.样本要求:静脉采血使用EDTA-K2抗凝。毛细血管采血应擦去第一滴血,以免混入组织液影响结果。标本采集完成放置5-10分钟后测定。.操作步骤:.小试管1支,加白细胞稀释液0.38ml。.用微量吸管准确吸取末梢血20口擦去管尖外部余血,将吸管插入小试管中稀释液的底部,轻轻将血放出,并吸取上层清液,清洗吸管二次,混匀。.充池,静置23min,待白细胞下沉。.用低倍镜计数四角4个大方格内的白细胞数。.计算白细胞数/L=4个大方格内白细胞总数*10*20*106/4即4个大方格内白细胞总数*50*106=白细胞数/L手工法红细胞计数原理:用等渗稀释液将血液按一定倍数稀释,充人计数池后显微镜下计数一定体积内红细胞数,换算求出每升血液中红细胞的数量。试剂与耗材.红细胞稀释液枸檬酸钠1.0g;36%甲醛液1.0ml氯化钠0.6g加蒸储水至100ml;混匀、过滤两次后备用。.其他显微镜、改良Neubauer血细胞计数板等。操作.取中号试管1支,加红细胞稀释液2.0ml。.用清洁干燥微量吸管取末梢血10口擦去管外余血后加至红细胞稀释液底部,再轻吸上层清洗吸管2-3次立即混匀。.混匀后,用干净微量吸管将红细胞悬液充人计数池,不得有空泡或外溢,充池后静置2-3min后计数。.高倍镜下依次计数中央大方格内四角和正中共5个中方格内的红细胞。对压线细胞按数上不数下、数左不数右的原则进行计数。四、计算红细胞数/L=5个中方格内红细胞数X5X10X200X10的中方格内红细胞数如果经过落映F F段都不船髀决失控的同题, 废联聚厂家L L程师进行维护、维修和性器校册.填3 3失控处打单(5)形态异常:白细胞:中性粒细胞变性和中毒性变化:表现为着色反应减退或胞浆嗜碱性增强, 嗜中性颗粒减少或变性,以及出现大小不等、分布不匀的紫黑色中毒性颗粒。根据有中毒颗粒的中性粒细胞在中性粒细胞总数中所占比例的多少,可将之分为轻度(25%)、中度(50%)、重度(75%)和严重(100%)四级。空泡变性也为常见的中个血播拌品中小送抖网个水平的质控品.我邕送持厂中.低水中题作糜控品使用阙应放置到室温(人约1515诃】,二次,I I,山为弗的.t-/t-/;V-JV-Jl l. .h I IttM.fflgfffiTttM.fflgfffiT蒋国蒯鲁n n柄上累于新fl内双手心手来卜怫如。 次.摩容要我康脓削试管,隹愣而代以屉投函好WS3WS3题避步管蹴 5。 分冲左mImI爨醛循例迎句1 1: T T钟%1;类咽足弛机的还是奈统的.1 13S3S现则失控,遣常指示能机误差增大造成的失控.属于2222s s现期的失控冲往提小仃连续的控制值超出同学控制跟的失控,提示系统谩差问题. H H工竞旭和尖柱曲囚的花格造成系统谟工的囚堂,如使用不同批当的试制、不同批”的校准的,校掂值设足锅以总生M M误的问题.试剌的质量间量或使用不H H至曜博现.光源灯泡之化的向题.唐瞪人员的变劭等.造成的机次十的闪靠也廿变.如次剂椒或试剂帏血中由气泡、试剂没有充分混勾,电源电“不桓.构撒人员操作不粘熔.质箱品未充分混匀.一放置室温等.,7,7、失控后处理的方法 (T T如期是所仃坷H H都伯岛或偏低.町他乩质物品的问.应浦定新的质控品.即不解决.梅一找一器聃问题.聊量是般个皿月出现晌砂机以整+应核在质怦品右无气泡.t tr r无充分混勾*新率加的漆制有无气泡:试剂有无交鹿,优麟的甘道有无堵本麻,设定的外折拿软布无更改】逐一排在后根恻质柠品.室内质控品的选择与操作、质控规则毒性表现,常与中毒颗粒同时存在,它是细胞浆或核中的物质脂肪变性后,被染液中的有机溶剂脱脂的结果,较多的细胞有此变化时才有意义。核溶解也是中毒性变化,表现为粒细胞核染色质和核膜模糊不清,结构消失以及核固缩等,后者指染色质深染并聚集成块。有时在粒细胞胞浆内可见散在的、直径约12(im的圆形天蓝或蓝灰色区域,称Dohle小体,系核糖体或粗内质网的聚集物。上述各种变化可单独或数种同时存在于中性粒细胞中,见于严重感染,特别多见于由葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌和厌氧菌引起的化脓性感染。一些药物及理化因素也可引起中毒性变化。在确定细胞有无中毒性变化时,应排除涂片或染色不良所造成的假象。大型中性粒细胞和多分叶核粒细胞:大型中性粒细胞胞体明显增大,直径可达1625dm,核分叶较多,常在5叶以上。在正常人血液中极少见到,可见于巨幼红细胞性贫血、一些大红细胞性贫血、真性红细胞增多症、慢性粒细胞性白血病、红白血病、放射性损伤、严重感染、中毒和抗叶酸药物治疗后等。也见于遗传性大型粒细胞症。分叶过多而体积不增大的粒细胞称为多分叶核粒细胞,是老化性粒细胞,增多时称核右移。粒细胞核棘突:为粒细胞胞核上的小芽状突出,呈锯齿或木梳等形状。此种核棘突大量出现,见于严重的中毒感染、癌肿转移、晚期结核病或放射治疗后。核棘突与鼓槌状核突不同,后者为突出于粒细胞核上的呈鼓槌状赘生物,有助于胎儿性别或两性畸形的鉴别。Alder畸形:指粒细胞胞浆内含有多量粗大的紫红色颗粒,有时成簇分布。这种异常颗粒也称Alder-Reilly小体,可同时出现于淋巴细胞、单核细胞或过渡型粒细胞胞浆中,应与嗜酸、嗜碱性颗粒相鉴别。含有此种异常颗粒的粒细胞,其核粗而圆,很少凹陷。是一种遗传性异常,病人常有先天性骨关节畸形。Pelger-Huet核畸形:是良性家族性的粒细胞畸形,成熟中性粒细胞的核呈带状或仅有二叶、凹陷不大、如肾形、圆形、哑铃状、眼镜状等。核染色质较正常粗而密,呈块状深染。浆中常伴有明显的中毒颗粒或空泡变性。这种畸形的粒细胞吞噬和抗感染能力等功能仍正常。应注意与白血病或炎症所致粒细胞核左移相区别。Pelger-Huet畸形,尚需和假性Pelger-Huet现象区别后者无家族性特征,往往发生于白血病前期。Chediak畸形:中性粒细胞或其它系统白细胞胞浆中含有很多粗大的直径约25dm的嗜天青颗粒,形状不一,过氧化物酶染色呈阳性。胞浆中常伴有Dohle小体,胞核萎缩、畸形,核染色质致密。这种畸形为先天性,多见于小儿,常伴有白化病。不典型淋巴细胞:Downey于1923年将这种淋巴细胞分为三型:I型(泡沫型),胞浆中有空泡或泡沫,核折叠或弯曲;11型(不规则型),胞浆多色淡并有空泡,核呈圆形或弯曲;出型(幼稚型),形态大,胞浆既蓝又多,也可有空泡,核也常有弯曲。也有人将不典型淋巴细胞分为五型:第一型,单核细胞型;第二型,浆细胞型;第三型,幼稚型;第四型,原始型;第五型为不能归入上述各型者,称异型淋巴细胞。不典型淋巴细胞在正常人血液中可见到,一般不超过2%。增多主要见于传染性单核细胞增多症,病毒性肺炎、病毒性肝炎、带状疱疹、流行性感冒、风疹等病毒性疾病。传染性单核细胞增多症时,可达10%以上,有时可存在数月之久。Auer小体:在Wright染色涂片上,呈红紫色细杆状,长度为16dm,一条或数条不等。细胞化学染色证明小体中含酸性磷酸酶和过氧化物酶,可能是嗜天青颗粒凝聚而成,也可能是溶酶体的一种异常形态。它仅见于急性粒细胞性白血病和急性单核细胞性白血病,可在原始及幼稚单核细胞、早幼粒细胞和中幼粒细胞的胞浆中见到。急性淋巴细胞性白血病不出现Auer小体。幼稚白细胞:正常人末梢血中偶可见到晚幼粒细胞。末梢血中出现幼稚细胞主要见于各种急性白血病和慢性粒细胞性白血病,后者除有早期粒细胞轻度增高外,同时尚有其它阶段粒细胞增多。急性红白血病时,还有有核红细胞增多。重度感染、失血和溶血性贫血,骨髓纤维化症,严重的类白血病反应等时,也常出现。
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