《仪器分析》课程：第06章 高效液相色谱法

厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：Chapter Six High Performance Liquid ChromatographyHigh Performance Liquid Chromatography（HPLCHPLC）第六章 高效液相色谱法厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：高效液相色谱法高效液相色谱法 HPLCHigh Performance Liquid Chromatography液相色谱流程图液相色谱流程图PUMPDetectorWData station (Recorder) or Collection王秋泉王秋泉 博士博士厦门大学化学系，教育部现代分析科学重点实验室厦门大学化学系，教育部现代分析科学重点实验室Tel: 2181796; Email: 2001-2004厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：高效液相色谱法高效液相色谱法 HPLCHigh Performance Liquid Chromatography往复式高压恒流泵厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：高效液相色谱法高效液相色谱法 HPLCHigh Performance Liquid Chromatography注射泵厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：高效液相色谱法高效液相色谱法 HPLCHigh Performance Liquid Chromatography梯度洗脱（淋洗）低压梯度高压梯度PUMPPUMPPUMP浓度时间厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：高效液相色谱法高效液相色谱法 HPLCHigh Performance Liquid Chromatography液相色谱流程图液相色谱流程图PUMPDetectorWData station (Recorder) or Collection正相色谱正相色谱 反相色谱反相色谱 Reverse-phase ChromatographyReverse-phase Chromatography厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：液固色谱液固色谱Liquid-Solid Chromatography厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：液固吸附色谱液固吸附色谱Liquid-Solid ChromatographymadadmnMXnMX+以样品中各组分在固定相上的吸附作用不同来进行分离“相似相溶”原理异构体的分离厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：液液分配色谱液液分配色谱Liquid-Liquid ChromatographyaqorgiiKiStationary phaseMobile phase固定液易流失 化学键合固定相厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：化学键合相色谱化学键合相色谱Bonded Phase ChromatographySiO H+ ROHSiOR + H2OSiO H+ R3SiClSiOSiR3 + H C l1 功能基团的引入方法功能基团的引入方法厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：SO C l2C lR MgC lRSiOHSiClSOCl2RM gClSiR化学键合相色谱化学键合相色谱Bonded Phase Chromatography厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：化学键合相色谱化学键合相色谱Bonded Phase ChromatographyR-C4, -C8, -C18-C6H5, -CN, -NH2-SO3H, -COOH, -NR4Cl-厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：化学键合相色谱化学键合相色谱Bonded Phase Chromatography2正相色谱正相色谱3 反相色谱反相色谱 RP-HPLCRP-HPLC4 反相离子对色谱反相离子对色谱 RP-Ion-Pair HPLCRP-Ion-Pair HPLCNSO3HONSO3HOM2+NSO3HOHNM(HQS)n2-n厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：反相离子对色谱反相离子对色谱 RP-Ion-Pair HPLCRP-Ion-Pair HPLCMinutes02468101214Volts-0.10.00.10.20.30.4Volts-0.10.00.10.20.30.4 MgCdZnChromatogram of Mg, Cd and Zn separation厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：化学键合相色谱化学键合相色谱Bonded Phase Chromatography5 离子交换色谱离子交换色谱COOHCOO-COO-COOHCOOHCOOHCOOHCOOHCOO-COO-COO-COO-COOHCOO-Figure Interaction between REE-species and the carboxylic groupsof the ion exchangerREE3+REE3+nHmLj-REE(HmL)n(3-nj)+Mobile phase flown厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：Minutes051015202530mAU0246mAU02461 1.088 29.872 11.048 44.48 3 18.948 25.661: 658 nm, 8 nm430Soil-D20-3000Pk #Retention TimeArea Percent化学键合相色谱化学键合相色谱Bonded Phase Chromatography厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：Distribution of different REEs species inthe soluble extract of the soil sample29. 87%44. 48%25. 66%化学键合相色谱化学键合相色谱Bonded Phase Chromatography厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：空间排斥（阻）色谱空间排斥（阻）色谱Size Exclusion Chromatography硅胶型、聚苯乙烯型、葡聚糖凝胶型硅胶型、聚苯乙烯型、葡聚糖凝胶型厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：空间排斥（阻）色谱空间排斥（阻）色谱Size Exclusion ChromatographyM.W.tR厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：空间排斥（阻）色谱空间排斥（阻）色谱Size Exclusion ChromatographyM.W.tR厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：空间排斥（阻）色谱空间排斥（阻）色谱Size Exclusion ChromatographyM.W.tR厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：空间排斥（阻）色谱空间排斥（阻）色谱Size Exclusion ChromatographyM.W.tR厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：空间排斥（阻）色谱空间排斥（阻）色谱Size Exclusion ChromatographyM.W.tR厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：Conditions: Column, Vydac C18, 5-mm, 30 nm (1 mm ID100 mm) Flow rate, 40 mL/min Mobile phase, A: 0.05% Formic Acid in Water B: 0.05% Formic Acid in Acetonitrile Linear gradient programmed from 20% B to 100% B over 25 min,hold at 100% B for 5 minSample: mixture of 9 protein standards; 5-mL loopDetection: SCIEX TAGA 6000E triple quadrupole mass spectrometry equipped with ionspray atmospheric pressure ion source in positive ion mode1, substance P(1-9),MW=1104, 900 pmoles; 2, neurotensin, 1673, 150;3, angiotensin, 1296, 385; 4, somatostatin, 1638, 600; 5, bovine insulin,5732, 130; 6, bovine glucagon, 3482, 720; 7, mellitin, 2846, 175; 8, myo-Globin, 16950, 20; 9, lactoglobulin-B, 18277, 245.m m-HPLC-Mass Spectrometry -HPLC-Mass Spectrometry of Peptides and Proteinsof Peptides and Proteins厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：m m-HPLC-Mass Spectrometry -HPLC-Mass Spectrometry of Peptides and Proteinsof Peptides and Proteins厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：Mass Spectrum Mass Spectrum of Substance P from Peak 1of Substance P from Peak 1厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：Mass Spectrum Mass Spectrum of Bovine Insulin from Peak 5of Bovine Insulin from Peak 5厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：Mass Spectrum Mass Spectrum of Bovine Glucagon of Bovine Glucagon ( (胰增血糖素）胰增血糖素）from Peak 6from Peak 6厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：Mixed Mass Spectrum from Peak 8Mixed Mass Spectrum from Peak 8厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：Separation and detection of the pigments in narcissus leaves by m m-HPLC-APCI-MS厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：Separation and detection of the pigments in narcissus leaves by m m-HPLC-APCI-MS厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：Separation and detection of the pigments in narcissus leaves by m m-HPLC-APCI-MS厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：Separation and detection of the pigments in narcissus leaves by m m-HPLC-APCI-MS厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：Separation and detection of the pigments in narcissus leaves by m m-HPLC-APCI-MS厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：Separation and detection of the pigments in narcissus leaves by m m-HPLC-APCI-MS厦门大学精品课程厦门大学精品课程厦门大学精品课程 仪器分析仪器分析仪器分析( ( (含实验含实验含实验) ) )设计与编写教师：王秋泉教授设计与编写教师：王秋泉教授 Telephone：2181796 Email：Separation and detection of the pigments in narcissus leaves by m m-HPLC-APCI-MS