结核病现状与现场筛查为王卫峰招标

结核分枝杆菌（结核分枝杆菌（TB）抗体诊断）抗体诊断试剂盒试剂盒（胶体金法）（胶体金法）目录 结核病的现状结核病的现状 结核病的防治结核病的防治 结核病的诊断结核病的诊断/筛查方法筛查方法 中新科炬的产品中新科炬的产品 产品原理产品原理 预期用途预期用途 检测方法与判读检测方法与判读 样本要求样本要求 操作注意事项操作注意事项 产品特点产品特点结核病的现状 自1882年Robert Koch发现结核杆菌（mycobacterium tuberculosis MTB）以来，结核病仍然是仅次于爱滋病的第二大致死性感染性疾病。联合国1995年确定每年的3月24日为世界防治结核病日。 据世界卫生组织公布2000年度全世界因结核病致死人数达220万，占世界总死亡人数的4%。全世界有20亿人感染过结核分枝杆菌，每年约有800万新结核病患者产生。儿童感染率为9.6%。 据世界卫生组织公布2010 年度全球新发结核病患者880 万例（区间为850 万至920 万例），艾滋病毒阴性结核病患者死亡人数为110万人（区间为90万至120万人），另有35 万人（位于32 万至39万人之间）死于艾滋病病毒相关结核病。 结核病现状 2013年3月24日是第18个“世界防治结核病日” 据报道：全球每年夺走140万人的生命。我国结核病人数居世界第2位，中国疾控中心结核病预防控制中心副主任陈明亭介绍说，中国有5.5亿人感染结核，其中约有10%的人会发病。每年有5万人死于结核病。我国75%的肺结核病人年龄在1554岁之间，给社会、家庭造成严重的经济负担；80%的肺结核病人在农村。 结核病的现状 在过去的十年间，不断加大防治工作投入和力度，取得了举世瞩目的成就。但是，中国作为结核病高负担国家之一的现状并没有根本改变。目前，全国约有肺结核患者499万，位居全球第二位；每年新发病人约100万，始终位居全国甲乙类传染病报告发病数的前列。 国家卫生统计数据显示2011年肺结核的发病953275例，死亡2840例。在28种传染病中发病例数仅次于病毒性肝炎，死亡人数仅次于艾滋病。 结核病在全球范围和中国仍是一个严重的公共卫生问题。结核病在全球范围和中国仍是一个严重的公共卫生问题。 结核病的防治 控制传染病的三大环节控制传染病的三大环节 控制传染源（通过筛查发现病人）切断传播途径（通过治疗病人切断传播途径）保护易感人群（卡介苗免疫效果不理想） 可见，结核筛查是控制结核病的重要手段。2011年11月由国务院办公厅下发全国结核病防治规划（全国结核病防治规划（2011201120152015年）年）提出，到2015年全国活动性肺结核患者发现并治疗人数达400400万万和结核病患者周围接触者筛查率达筛查率达95%95%以上的工作指标。鼓励应用鼓励应用新技术、新方法，提高患者发现水平。对结核病密切接触者、艾滋病新技术、新方法，提高患者发现水平。对结核病密切接触者、艾滋病病毒感染者、羁押人群等高危人群以及老年人、学生、流动人口等重病毒感染者、羁押人群等高危人群以及老年人、学生、流动人口等重点人群的结核病筛查工作，尽早发现肺结核患者。点人群的结核病筛查工作，尽早发现肺结核患者。结核病的诊断/筛查方法病原学检测病原学检测：1.痰涂片镜检：为各国结核病实验室都在使用的最基本的细菌学检查方法，具有快速简便且价廉等优点，缺点是无法判别细菌是死还是活，而且敏感性较低；特异性差，各种抗酸杆菌均可着色，同时受到染色剂质量的影响，因此往往抗酸染色法的误诊率高。而且由于受到检测原理的限制，检测的突破性的很难得以进展。2.分离培养：结核菌常规培养法的优点是灵敏度、特异度、正确率较高 ，是鉴定死、活菌的可靠方法，是目前活菌检测不可替代的方法，也是化疗反应的主要监测指标; 缺点是培养时间过长，需要-周才能报告结果。结核病的诊断/筛查方法 免疫学检测：免疫学检测： 结核菌素实验（OT试验）：结核菌素皮肤试验是最初 用于诊断的免疫学诊断试验，主要用来了解被试者是否感染了结核分枝杆菌或作为有无结核病的辅助诊断依据，在结核病流行病学方面，可以作为人群感染后结核的危险度的指标，同时也是检测卡介苗接种效果的一种方法。缺点是：由于是一种间接诊断结核病的方法，假阳性率高极不易标准化。结核病的诊断/筛查方法 免疫血清学检测：免疫血清学检测： 酶联免疫法：此法在临床运用广泛。特异性，灵敏度较高。 免疫胶体金技术：免疫胶体金技术：具有快速，简便，适用于结核结核病的筛查，病的筛查，涂片培养阴性有临床症状的鉴别诊断。 分子生物学技术：分子生物学技术： PCR：灵敏度高，特异性强，需要专业人士操作，目前处于研究状态。中新科炬的产品25人份/盒40人份/盒检测原理本试剂是利用重组表达纯化的结核分枝杆菌38KD、16KD抗原包被的NC膜和胶体金标记的鼠抗人IgG及其它试剂制成的胶体金免疫诊断试剂。运用免疫层析法检测血清或血浆中的抗结核分枝杆菌抗体，用于结核病的辅助诊断。此法具有特异性强、灵敏度高、重复性好、使用方便、显示结果快捷、易于保存等优点。TB抗体诊断试纸条结构示意图抗体诊断试纸条结构示意图预期用途预期用途 本产品为结核分枝杆菌(TB)抗体诊断试剂盒(胶体金法)，检测被检血清或血浆中的抗TB IgG抗体，用于结核病的辅助诊断。 检验方法检验方法 1将检测卡和待检标本平衡至室温，撕开铝箔袋，取出检测卡，平放于桌面上。 2用移液枪调节加样量为4ul，从样品管中取出4ul血清或血浆，加入检测卡的NC膜区中间位置，待样品完全吸收后，在加样孔加入5080ul稀释液，使胶体金层析。同时计时。 315分钟内观察实验结果（强阳性样本几分钟内可显示结果），超过30分钟，结果无效。检测方法与判读样本要求样本要求 血清（血浆）标本按常规方法由静脉采集。5天内测定的标本可放置4保存。标本放置在-20至少可保存3个月。标本尽可能避免溶血或反复冻溶。混浊或有沉淀的标本应离心或过滤澄清后再检测。需保存的血清（血浆）在采集、保存过程中应注意无菌操作。操作注意事项 加样量必须在4-6ul之间。 加样位置必须在反应窗口中间的蓝线上，加样时注意不要划破NC膜。 加缓冲液（稀释液）的位置必须在标有“缓冲液”的小孔中。 加缓冲液（稀释液）的时间必须在样本刚刚扩散超过T线和C线的位置后即刻加入2滴（50-80ul）缓冲液（稀释液）。 15分钟内判读结果。30分钟后结果无效。中新科炬产品特点 独特抗原独特抗原 不受卡介苗的影响不受卡介苗的影响 专利技术专利技术 微量加样微量加样 灵敏度和特异性高灵敏度和特异性高 可检测出非开放期结核病可检测出非开放期结核病 适合现场筛查使用适合现场筛查使用独特抗原 包被抗原是重组表达制备包被抗原是重组表达制备TB16 KDa、TB38KDa和独特抗原。和独特抗原。 TB16抗原抗原是一种毒力相关基因hspX所编码的低分子质量蛋白质，是TB处于静息期时分泌的主要膜蛋白，大多数人体对16kd产生体液免疫应答，其抗体在TB患者中有相当高的阳性率(46 %50 %)。 38 kD蛋白蛋白是 1986年 YoungD等人首次用单克隆抗体为基础经亲和层析纯化而成。 独特抗原：灵敏度高，特异性好。不受卡介苗的影响l16kD抗体在抗体在BCG免疫后产生中的量极少，免疫后产生中的量极少，检测患者血清中16kD抗体与人型 PPD 抗体对于诊断结核的敏感性和特异性均无显著差异，然而BCG阳性者中特异性要高于PPD，能将结核病患者与BCG接种区别开来 。lAndersen AB等从结核杆菌中分离了该蛋白的基因 ,认为38 kD只能在致病的分枝杆菌中检出，BCG中只能检出非常少的量，而其他分枝杆菌不能检出。不受卡介苗的影响l 我国数十年来已开始BCG的接种，几乎所有人都进行过接种，BCG的阳性率非常高，小学生阳性水平达50-90%，成人亦基本不低于30%。l 16KD、38KD和独特抗原作为诊断抗原的敏感性和特异性与有显著差异，也证明了抗原和BCG的交叉反应率极低。l 试剂选用重组表达的抗原也避免了因抗原不纯，含有和BCG相似的少量杂质蛋白而产生的交叉反应。l 研发人员对不同的抗原、包被抗原的用量和比例进行多重的试验和优化，使其最低检出量控制在一定的水平，能有效区分出感染和接种抗体含量差别，避免了BCG的交叉感染。 专利技术 专利受理号：200710059908.X微量加样，快速判读 独特的NC膜上加样检测技术 15分种内快速观察结果灵敏度特异性高l 临床单位与样本数临床单位与样本数：在华北油田总医院、北京老年医院和南昌大学第二附属医院进行临床试验，分别收集临床样本331、372和328例，共1031例，l 临床样本：临床样本：按中华医学会出版临床技术操作规范（结核病分册）要求综合诊断确诊(金标准金标准)为结核病患者或非结核病患者血清(血浆)样本，其中结核病患者样本511例，非结核病患者样本520例。灵敏度特异性高l 临床结果：临床结果： 和金标准相比考核中新科炬试剂的灵敏度为78.3%，特异性为 90.4%；总符合率为总符合率为84.4%。奥普生物试剂的敏度为69.3%，特异性为89.2%；总总符合率为符合率为79.3%。 中新科炬试剂与上中新科炬试剂与上海奥普的试剂的阳性符合率为阳性符合率为90.0，阴性符合率为，阴性符合率为87.0，总符合率为，总符合率为88.2 相对上海奥普的TB抗体胶体金试剂盒，中新科炬试剂显示出了相对较好的灵敏度和特异性，性能达到或超过上海奥普的试剂，能较好检测结核病患者的TB抗体，起到筛查结核病人、辅助诊断的作用。 可检测出非开放期结核可检测出非开放期结核 本试剂盒为血清学检测方法，可检测出在非开放本试剂盒为血清学检测方法，可检测出在非开放期结核。期结核。适合现场筛查使用适合现场筛查使用 选择产品配件可在筛查现场完成取样选择产品配件可在筛查现场完成取样