江苏省宿迁市马陵中学高考生物专题复习 酵母细胞的固定化课件2

酶是活细胞产生的一类具有生物酶是活细胞产生的一类具有生物催化作用的催化作用的有机物有机物. .一一. .酶的概念：酶的概念：产生场所产生场所:作用部位作用部位:作作 用用:化学本质化学本质:活细胞内活细胞内细胞内或外细胞内或外催化催化作用作用多数是蛋白质多数是蛋白质,少数是少数是RNA 作用机理作用机理: 降低化学反应的活化能降低化学反应的活化能组成单体组成单体:合成部位合成部位: 如果你是工程技术人员，你如何解决如果你是工程技术人员，你如何解决这个问题？这个问题？包埋法包埋法化学结合法化学结合法物理吸附法物理吸附法六、固定化细胞常用的载体材料六、固定化细胞常用的载体材料 ：1 1、明胶、明胶2 2、琼脂糖、琼脂糖3 3、海藻酸钠、海藻酸钠4 4、醋酸纤维素、醋酸纤维素5 5、聚丙烯酰胺等、聚丙烯酰胺等共同的特点：共同的特点：是不溶于水的多孔是不溶于水的多孔性载体性载体八、固定化细胞实验操作：八、固定化细胞实验操作：制备固定化酵母细胞制备固定化酵母细胞1 1、酵母细胞的活化、酵母细胞的活化 2 2、配制物质的量浓度为、配制物质的量浓度为0.05mol/L 0.05mol/L 的的CaClCaCl2 23 3、配制海藻酸钠的溶液、配制海藻酸钠的溶液4 4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合5 5、固定化酵母细胞、固定化酵母细胞，以便形成稳定，以便形成稳定的结构。的结构。 如何检验凝胶珠的质量是否合格？如何检验凝胶珠的质量是否合格？ 一、是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌一、是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压，如果凝胶珠不容易破裂，没有上用手挤压，如果凝胶珠不容易破裂，没有液体流出，就表明凝胶珠的制作成功。液体流出，就表明凝胶珠的制作成功。 二、是在实验桌上用力摔打凝胶珠，如果二、是在实验桌上用力摔打凝胶珠，如果凝胶珠很容易弹起，也能表明制备的凝胶珠凝胶珠很容易弹起，也能表明制备的凝胶珠是成功的。是成功的。 三、三、观察凝胶珠的颜色和形状观察凝胶珠的颜色和形状原因分析：原因分析：1、如果制成的凝胶珠容易破裂？、如果制成的凝胶珠容易破裂？海藻酸钠或海藻酸钠或CaClCaCl2 2的浓度过低的浓度过低在在CaClCaCl2 2溶液中浸泡的时间短溶液中浸泡的时间短原因分析：原因分析： 如果制作的凝胶珠颜色过浅、如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏 ，固定的酵母细胞数目固定的酵母细胞数目 ；如果形；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的浓度偏说明海藻酸钠的浓度偏 ，制作失，制作失败，需要再作尝试。败，需要再作尝试。（二）用固定化细胞发酵（二）用固定化细胞发酵1 1、将固定好的酵母细胞、将固定好的酵母细胞( (凝胶凝胶珠珠) )用蒸馏水冲洗用蒸馏水冲洗2-32-3次。次。 2 2、 将将150mL150mL质量分数为质量分数为10%10%的的葡萄糖溶液转移到葡萄糖溶液转移到200mL200mL的锥形的锥形瓶中，再加入固定好的酵母细瓶中，再加入固定好的酵母细胞，置于胞，置于2525下发酵下发酵24h24h。怎样评价这一阶段成功与否？怎样评价这一阶段成功与否？发酵产生酒精，会闻到酒味，发酵产生酒精，会闻到酒味，可以看到产生了很多气泡。可以看到产生了很多气泡。如果发现发酵液有酸味，如果发现发酵液有酸味，发酵装置密封，分析原因？发酵装置密封，分析原因？发酵装置漏气，分析原因？发酵装置漏气，分析原因？练习：练习：1 1、下列说法不正确的是（、下列说法不正确的是（ ）A A、葡萄糖与固定化葡萄糖异构酶接触，葡萄糖与固定化葡萄糖异构酶接触，转化成的是果糖转化成的是果糖B B、从固定化酶反应柱下端流出的是果糖从固定化酶反应柱下端流出的是果糖C C、高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、龋齿和心血管病糖尿病、龋齿和心血管病D D、酶溶解于葡萄糖溶液，可以从糖浆中酶溶解于葡萄糖溶液，可以从糖浆中回收回收2、制备固定化酵母细胞的过程中错误的、制备固定化酵母细胞的过程中错误的是（是（ ）A、取干酵母，加入蒸馏水，使其活化取干酵母，加入蒸馏水，使其活化B、配制海藻酸钠时，加热用大火，直配制海藻酸钠时，加热用大火，直到海藻酸钠溶化为止到海藻酸钠溶化为止C、将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入已活化的酵母细胞温，加入已活化的酵母细胞D、将凝胶珠在将凝胶珠在Cacl2溶液中浸泡溶液中浸泡30 min左右左右3、下列叙述不正确的是（、下列叙述不正确的是（ ）A、从操作角度来考虑，固定化细胞比从操作角度来考虑，固定化细胞比固定化酶容易固定化酶容易B、固定化细胞比固定化酶对酶的活性固定化细胞比固定化酶对酶的活性影响更小影响更小C、固定化细胞固定的是一种酶固定化细胞固定的是一种酶D、将微生物的发酵过程变成连续的酶将微生物的发酵过程变成连续的酶反应应选择固定化细胞技术反应应选择固定化细胞技术4 4、研究认为，用固定化酶技术处理污、研究认为，用固定化酶技术处理污染物是很有前途的。如将从大肠杆菌染物是很有前途的。如将从大肠杆菌得到的磷酸三酯酶固定到尼龙膜上制得到的磷酸三酯酶固定到尼龙膜上制成制剂，可以用来降解残留在土壤中成制剂，可以用来降解残留在土壤中的有机磷农药，与用微生物降解相比，的有机磷农药，与用微生物降解相比，其作用不需要适宜的（其作用不需要适宜的（ ）A A、温度温度 B B、PHPHC C、水分水分 D D、营养营养5.5.使用固定化细胞的优点是使用固定化细胞的优点是( )( )。A.A.能催化大分子物质的水解能催化大分子物质的水解 B.B.可催化一系列化学反应可催化一系列化学反应C.C.与反应物易接近与反应物易接近 D.D.有利于酶在细胞外发挥作用有利于酶在细胞外发挥作用6.6.酶的固定方法不包括酶的固定方法不包括( )( )。A.A.将酶吸附在固体表面上将酶吸附在固体表面上 B B将酶相互连接起来将酶相互连接起来C C将酶包埋在细微网格里将酶包埋在细微网格里 D D将酶制成固体酶制剂，如加酶洗将酶制成固体酶制剂，如加酶洗衣粉中的酶衣粉中的酶