高中生物 专题5 课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段课件 新人教版

教师用书独具演示教师用书独具演示演示结束演示结束PCR技术的原理及条件技术的原理及条件 模板模板 脱氧核脱氧核 苷酸苷酸 引物引物 多聚酶链式反应多聚酶链式反应 体外体外 扩增扩增DNA 片段片段 DNA DNA拷贝拷贝 80100 DNA的的 双螺旋结构双螺旋结构 双链双链 变性变性 降低降低 两条彼此分离的两条彼此分离的 DNA链链 3 5 3 DNA 模板链模板链 脱氧核苷酸脱氧核苷酸 Taq DNA聚合酶聚合酶 缓冲溶液缓冲溶液 90以上以上 解聚解聚 50左右左右 碱基互补配对碱基互补配对 72左右左右 脱氧核苷酸脱氧核苷酸 DNA聚合酶聚合酶 DNA 序列序列 指数扩增指数扩增 260nm 温度温度 DNA扩增扩增 恒温水浴锅恒温水浴锅 水浴锅水浴锅 PCR反应的微量离心管反应的微量离心管 0.5mL PCR 反应反应 外源外源DNA 高压灭菌高压灭菌 缓冲液缓冲液 酶酶 20 枪头枪头 手指轻轻弹击管的侧壁手指轻轻弹击管的侧壁 PCR技术原理及分析技术原理及分析 细胞内细胞内DNA复制和复制和PCR反应的比较反应的比较 体内体内DNA复制复制PCR反应反应不同点不同点场所场所细胞内细胞内细胞外细胞外能量能量ATP提供能量提供能量不需不需ATP提供能量提供能量解旋解旋在解旋酶作用下在解旋酶作用下，细胞提供能量，细胞提供能量，部分解开，部分解开加热至加热至90 以上时，以上时，双链全部解开，不需双链全部解开，不需解旋酶解旋酶不同点不同点引物引物一小段一小段RNA可以是可以是RNA或单链或单链DNA分子片段分子片段合成子链合成子链在引物基础上，在引物基础上，一条链连续合成一条链连续合成，另一条链不连，另一条链不连续合成续合成分别从两条链的引物分别从两条链的引物端开始，都是连续合端开始，都是连续合成，控制温度成，控制温度72 特点特点边解旋边复制，边解旋边复制，半保留复制半保留复制体外迅速扩增体外迅速扩增不同点不同点Taq DNA聚合酶聚合酶不需要不需要需要需要循环次数循环次数受生物体自身控受生物体自身控制制30多次多次温度温度体内温和条件体内温和条件高温高温(可变可变)相同点相同点需提供需提供DNA复制的模板复制的模板四种脱氧核苷酸为原料四种脱氧核苷酸为原料都需要一定的缓冲溶液都需要一定的缓冲溶液子链延伸的方向都是从子链延伸的方向都是从5端到端到3端端网网 络络 构构 建建