海南省文昌市高中生物《DNA的粗提取与鉴定》课件 新人教版选修1

自主学习（实验思路）自主学习（实验思路） 1、DNA从哪提取？（用什么方法破碎细胞而从哪提取？（用什么方法破碎细胞而DNA不受破坏）不受破坏） 2、怎样将、怎样将DNA与细胞中的其他生物大分子分离？与细胞中的其他生物大分子分离？ 3、怎样鉴定我们提取的、怎样鉴定我们提取的DNA？一、基础知识一、基础知识（一）提取（一）提取DNADNA的方法的方法阅读课本阅读课本5454页，思考：页，思考：提取生物大分子的基本思路是什么？提取生物大分子的基本思路是什么？DNADNA主要与哪些生物大分子分离？主要与哪些生物大分子分离？方法方法1 1：根据：根据DNADNA和蛋白质等其他成分在不同和蛋白质等其他成分在不同浓度的浓度的NaClNaCl溶液中的溶解度不同，提取溶液中的溶解度不同，提取DNADNA结合图，思考回答课本的问题结合图，思考回答课本的问题 在在NaClNaCl溶液浓度小于溶液浓度小于0.14 mol/L0.14 mol/L时，时，DNADNA的溶的溶解度随解度随NaClNaCl溶液浓度的溶液浓度的增 加 而 逐 渐 降 低 ； 在增 加 而 逐 渐 降 低 ； 在0.14 mol/L0.14 mol/L时，时，DNADNA溶解溶解度最小；当溶液浓度继度最小；当溶液浓度继续增加时，续增加时，DNADNA的溶解度的溶解度又逐渐增大。又逐渐增大。当当NaClNaCl的物质的量浓度为的物质的量浓度为2 mol2 molL L时，时，DNADNA的溶解度最大，浓度为的溶解度最大，浓度为 0.14 mol0.14 molL L时，时，DNADNA的溶解度最的溶解度最低。利用这一原理，可以使低。利用这一原理，可以使DNADNA在在盐溶液中溶解或析出盐溶液中溶解或析出1、DNADNA在在0.14 mol0.14 molL NaClL NaCl溶液中溶解度最低而蛋白质溶液中溶解度最低而蛋白质此时的溶解度最高的特点，可以使此时的溶解度最高的特点，可以使DNADNA与蛋白质分离，与蛋白质分离，形成沉淀析出，通过过滤，得到初提取的滤出物形成沉淀析出，通过过滤，得到初提取的滤出物DNADNA。2 2、利用、利用DNADNA不溶于不溶于酒精酒精，细胞中的某些蛋白质可溶于酒，细胞中的某些蛋白质可溶于酒精的特点，可以将精的特点，可以将DNADNA与蛋白质进一步分离。与蛋白质进一步分离。3 3、蛋白酶蛋白酶能水解蛋白质，但是对能水解蛋白质，但是对DNADNA没有影响没有影响4 4、大多数蛋白质不能忍受、大多数蛋白质不能忍受60608080C C的高温的高温，而，而DNADNA在在8080C C以上才会变性（蛋白质变性后溶解度降低而产生以上才会变性（蛋白质变性后溶解度降低而产生沉淀）沉淀）5 5、洗涤剂洗涤剂能够瓦解细胞膜（脂质），但对能够瓦解细胞膜（脂质），但对DNADNA没有影响没有影响（在植物材料中提取（在植物材料中提取DNADNA使用）使用）（二）检验原理：（二）检验原理： 1 1、DNADNA遇二苯胺（沸水浴）呈蓝色遇二苯胺（沸水浴）呈蓝色 2 2、甲基绿与、甲基绿与DNADNA结合，呈绿色结合，呈绿色（二）破碎细胞，获取含（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液的滤液(DNA释放和溶解）释放和溶解） 1、破碎动物细胞的方法、破碎动物细胞的方法2、破碎植物细胞的方法、破碎植物细胞的方法渗透吸水胀破渗透吸水胀破洗涤剂洗涤剂+食盐搅拌研磨食盐搅拌研磨（三）去除滤液中的杂质（三）去除滤液中的杂质（DNADNA的纯化）的纯化） 阅读课本阅读课本5555页的三个方案页的三个方案新鲜的鸡血新鲜的鸡血 鸡血细胞鸡血细胞 离心离心鸡血鸡血细胞细胞足量的蒸馏水足量的蒸馏水玻璃棒一个方向玻璃棒一个方向快速充分搅拌快速充分搅拌细胞细胞破裂破裂一层纱布一层纱布过滤（过滤（1）含染色质的滤液含染色质的滤液3、去除滤液中的杂质，获取、去除滤液中的杂质，获取DNA的粗提取物的粗提取物 （DNA的的纯化）纯化） 染色染色质滤质滤液液玻璃棒一个方向搅拌玻璃棒一个方向搅拌DNA溶液溶液3、去除滤液中的杂质，获取、去除滤液中的杂质，获取DNA的粗提取物的粗提取物 （DNA的的纯化）纯化） DNA溶液溶液蓝色蓝色无蓝色无蓝色1、在制备鸡血细胞液的过程中，加入柠檬酸钠的目的、在制备鸡血细胞液的过程中，加入柠檬酸钠的目的是（是（ ） A .防止凝血防止凝血 B. 加快加快DNA析出析出 C .加快加快DNA溶解溶解 D.加速凝血加速凝血2、DNA的溶解度最低时，的溶解度最低时，NaCl的物质的量浓度为（的物质的量浓度为（ ） A . 2mol/l B. 0.1mol/l C . 0.14mol/l D. 0.015mol/l3、在向溶解、在向溶解DNA的的NaCl溶液中，不断加入蒸馏水的目的是溶液中，不断加入蒸馏水的目的是（ ） A .加快加快DNA溶解的速度溶解的速度 B. 加快溶解杂质的速度加快溶解杂质的速度 C .减小减小DNA的溶解度，加快的溶解度，加快DNA析出析出 D.减小杂质的溶解度，加快杂质的析出减小杂质的溶解度，加快杂质的析出4、向溶有、向溶有DNA的的2mol/L的的NaCl溶液中不断加溶液中不断加入蒸馏水入蒸馏水,在这个过程中在这个过程中DNA的溶解度变化情况的溶解度变化情况分别是分别是 A 减小减小;减小减小 B 增大增大;增大增大 C 先减小后增大先减小后增大 D增大增大; 减小减小5、欲使溶有、欲使溶有DNA的的2mol/L的的NaCl溶液中的溶液中的DNA析出，最有效的办法是析出，最有效的办法是 A 加蒸馏水加蒸馏水 B 加矿泉水加矿泉水 C 加清水加清水 D 加生理盐水加生理盐水6、与析出、与析出DNA粘稠物有关的叙述，不正确的是粘稠物有关的叙述，不正确的是A 操作时缓慢滴加蒸馏水，降低操作时缓慢滴加蒸馏水，降低DNA的溶解度的溶解度B 操作时用玻棒轻缓搅拌以保证操作时用玻棒轻缓搅拌以保证DNA分子的完整分子的完整C 加蒸馏水可以同时降低加蒸馏水可以同时降低DNA和蛋白质的溶解度和蛋白质的溶解度D 当丝状粘稠物不再增加时，当丝状粘稠物不再增加时，NaCl溶液的浓度可溶液的浓度可以认为是以认为是0.14mol/L7、你能采用其他方法对、你能采用其他方法对DNA进行鉴定吗？进行鉴定吗？用甲基绿染液。结果丝状呈现绿色。用甲基绿染液。结果丝状呈现绿色。8、DNA遇二苯胺会染成（沸水浴）遇二苯胺会染成（沸水浴） A 硅红色硅红色 B 红色红色 C 紫色紫色 D 蓝色蓝色