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第第1讲讲微生物的利用和生物技术在食品加工微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用中的应用考纲要求考纲要求三年考情三年考情命题趋势命题趋势1.微生物的利用微生物的利用(1)微生物的分离和微生物的分离和培养培养(2)培养基对微生物培养基对微生物的选择作用的选择作用(3)利用微生物发酵利用微生物发酵来生产特定的产物来生产特定的产物2013江苏、安江苏、安徽、山东、全徽、山东、全国国、四川、四川2012北京、山北京、山东东2011全国新课全国新课标、山东标、山东1.趋势分析：趋势分析：(1)通过果酒、果醋、通过果酒、果醋、泡菜制作等生产实例或大肠杆菌的泡菜制作等生产实例或大肠杆菌的分离纯化操作考查最基本知识。分离纯化操作考查最基本知识。(2)植物有效成分的提取与生产生植物有效成分的提取与生产生活实际相联系，或与实验结合进行活实际相联系，或与实验结合进行考查，难度不大。考查，难度不大。2备考指南：备考指南：(1)将果酒、果醋与将果酒、果醋与泡菜的制作、特定微生物的分离纯泡菜的制作、特定微生物的分离纯化等实践操作构建过程模型，可以化等实践操作构建过程模型，可以加深对知识的记忆与理解。加深对知识的记忆与理解。(2)从类型、特点和应用等方面列从类型、特点和应用等方面列表归纳比较不同微生物培养基。表归纳比较不同微生物培养基。(3)利用图解分析法理解特定成分利用图解分析法理解特定成分的提取。的提取。2.运用发酵加工食运用发酵加工食品的基本方法品的基本方法2013江苏、全江苏、全国国2012山山东、江苏、海东、江苏、海南南2011江苏江苏3.生物材料中提取生物材料中提取某些特定的成分某些特定的成分2013海南、山海南、山东东2011海南海南水、碳源、氮源、无机盐水、碳源、氮源、无机盐 配制培养基配制培养基灭菌灭菌接种接种培养培养尿素尿素 稀释涂布平板法稀释涂布平板法纤维素纤维素刚果红刚果红无氧无氧让豆腐生毛霉让豆腐生毛霉加卤汤装瓶加卤汤装瓶水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法压榨法压榨法萃取法萃取法纸层析法纸层析法3035 1通常采用哪种方法来推测样品中的活菌数目？通常采用哪种方法来推测样品中的活菌数目？稀释涂布平板法。稀释涂布平板法。2果酒和果醋制作中所用的发酵菌种在结构上的本质区别果酒和果醋制作中所用的发酵菌种在结构上的本质区别是什么？是什么？前者是真核生物，后者是原核生物，其本质区别是酵母菌有前者是真核生物，后者是原核生物，其本质区别是酵母菌有核膜包被的细胞核。核膜包被的细胞核。考点一考点一微生物的培养与应用微生物的培养与应用 (2013高考新课标全国高考新课标全国卷卷)临床使用抗生素前，有临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。不同抗生素的敏感性。回答下列问题：回答下列问题：(1)为了从样本中获取致病菌单菌落，可用为了从样本中获取致病菌单菌落，可用_法或法或_法将样本接种于固体培养基表面，经法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。过选择培养、鉴别等步骤获得。(2)取该单菌落适当稀释，用取该单菌落适当稀释，用_法接种于固体培养基表法接种于固体培养基表面，在面，在37 培养箱中培养培养箱中培养24 h，使其均匀生长，布满平板。，使其均匀生长，布满平板。划线划线稀释涂布稀释涂布(或涂布或涂布)涂布涂布(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素对抗生素A_；含；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素明该致病菌对抗生素B_；含含C的滤纸片周围的透明圈比含的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明的小，说明_；含含D的滤纸片周围的透明圈也比含的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素素D的的_。(4)根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素_。敏感敏感不敏感不敏感该致病菌对该致病菌对C的敏感性比对的敏感性比对A的弱的弱耐药菌耐药菌A【解析解析】(1)实验室中对微生物纯化培养时，常用的接种方法实验室中对微生物纯化培养时，常用的接种方法有划线法和稀释涂布法。有划线法和稀释涂布法。(2)若让已经获得的单个菌落在固体若让已经获得的单个菌落在固体培养基上大量且均匀繁殖，常用涂布器把稀释的菌液均匀涂培养基上大量且均匀繁殖，常用涂布器把稀释的菌液均匀涂满整个平板。满整个平板。(3)对某种抗生素越敏感的致病菌，在该抗生素对某种抗生素越敏感的致病菌，在该抗生素存在的范围内，越不易生存，形成的透明圈就越大。但是，存在的范围内，越不易生存，形成的透明圈就越大。但是，如果在透明圈中还有菌落生存，则说明这个菌落的细菌耐药如果在透明圈中还有菌落生存，则说明这个菌落的细菌耐药性很强。性很强。(4)通过通过(3)可知可知,在应用时在应用时,要想杀死某致病菌要想杀死某致病菌,就得选就得选择能使该致病菌大量死亡择能使该致病菌大量死亡,即产生的透明圈大的那种抗生素。即产生的透明圈大的那种抗生素。【链接提升链接提升】1微生物的培养微生物的培养2微生物的分离微生物的分离选择培养基选择培养基(1)培养基中加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。培养基中加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。(2)培养基中加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。培养基中加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。(3)培养基中缺乏氮源时，可以分离固氮微生物，因为非固氮培养基中缺乏氮源时，可以分离固氮微生物，因为非固氮微生物不能在此培养基上生存。微生物不能在此培养基上生存。(4)当培养基的某种营养成分为特定化学成分时，也具有分离当培养基的某种营养成分为特定化学成分时，也具有分离效果。如石油是唯一碳源时，可以抑制不能利用石油的微生效果。如石油是唯一碳源时，可以抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油的微生物生存，达到分离能消除物的生长，使能够利用石油的微生物生存，达到分离能消除石油污染的微生物的目的。石油污染的微生物的目的。(5)改变微生物的培养条件，也可以达到分离微生物的目的，改变微生物的培养条件，也可以达到分离微生物的目的，如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。3微生物的计数微生物的计数(1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数：土壤中分解尿素的细菌的分离与计数：筛选菌株筛选菌株:利用以尿素为唯一氮源的选择培养基筛选菌株。利用以尿素为唯一氮源的选择培养基筛选菌株。计数方法：活菌计数法和显微镜直接计数法。计数方法：活菌计数法和显微镜直接计数法。过程：土壤取样过程：土壤取样样品的稀释样品的稀释微生物的培养与观察。微生物的培养与观察。(2)分解纤维素的微生物的分离：分解纤维素的微生物的分离：实验原理：实验原理：即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。流程：土壤取样流程：土壤取样选择培养选择培养梯度稀释梯度稀释涂布平板涂布平板挑选挑选菌落。菌落。4微生物的鉴定微生物的鉴定鉴定分解鉴定分解尿素的细尿素的细菌菌鉴定纤维鉴定纤维素分解菌素分解菌含酚红指示剂的尿素为唯一氮源的培养基含酚红指示剂的尿素为唯一氮源的培养基细菌细菌指示剂变红，则该菌能分解尿素指示剂变红，则该菌能分解尿素跟踪训练跟踪训练请回答下列与大肠杆菌有关的问题。请回答下列与大肠杆菌有关的问题。(1)从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于_，它的同化作用类型是它的同化作用类型是_。(2)如表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配如表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。根据用途划分，该培养基属于方。根据用途划分，该培养基属于_(填填“选择选择”或或“ 鉴 别鉴 别 ” ) 培 养 基 。 该 培 养 基 中 的 碳 源 是培 养 基 。 该 培 养 基 中 的 碳 源 是_。分解者分解者异养型异养型鉴别鉴别乳糖、蔗糖、蛋白胨乳糖、蔗糖、蛋白胨成分成分含量含量蛋白胨蛋白胨10.0 g乳糖乳糖5.0 g蔗糖蔗糖5.0 gK2HPO42.0 g显色剂显色剂0.2 g琼脂琼脂12.0 g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL(3)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行和培养皿进行_(填填“消毒消毒”或或“灭菌灭菌”)，操作者的双手需要，操作者的双手需要进行清洗和进行清洗和_。空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因。空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能是紫外线能使蛋白质变性，还能_。培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和_。通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落。通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的_。培。培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染，对于养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染，对于固体培养基应采用的检测方法是固体培养基应采用的检测方法是_ _若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过过_处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。灭菌灭菌消毒消毒破坏破坏DNA的结构的结构稀释涂布平板法稀释涂布平板法鉴定鉴定(分类分类)将未接种的培养基在适宜温度下放置适当时间后，观察培养基上是否将未接种的培养基在适宜温度下放置适当时间后，观察培养基上是否有菌落产生有菌落产生灭菌灭菌(4)以下微生物发酵生产特定产物时，所利用的主要微生物的以下微生物发酵生产特定产物时，所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是细胞结构与大肠杆菌相同的是_(多选多选)。A制作果酒制作果酒B由果酒制作果醋由果酒制作果醋C制作泡菜制作泡菜 D制作腐乳制作腐乳(5)利用培养基不仅可以分离、培养微生物，也可以进行植物利用培养基不仅可以分离、培养微生物，也可以进行植物组织培养。在植物组织培养的过程中，也要对外植体等进行组织培养。在植物组织培养的过程中，也要对外植体等进行一系列的消毒、灭菌处理，并且要求无菌操作，原因是一系列的消毒、灭菌处理，并且要求无菌操作，原因是_(答出两条即可答出两条即可)。外植体体积小，抗性差；微生物会和外植体争夺培养基中的外植体体积小，抗性差；微生物会和外植体争夺培养基中的营养物质；营养物质；微生物有可能产生对组织培养有害的物质微生物有可能产生对组织培养有害的物质(任意答出两条即可任意答出两条即可)BC考点二考点二传统发酵技术的应用传统发酵技术的应用 (2013高考新课标全国高考新课标全国卷卷)回答下列有关泡菜制作回答下列有关泡菜制作的问题：的问题：(1)制作泡菜时，所用盐水需煮沸，其目的是制作泡菜时，所用盐水需煮沸，其目的是_。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的作用是泡菜液，加入陈泡菜液的作用是_。(2)泡菜制作过程中，乳酸发酵的过程即为乳酸菌进行泡菜制作过程中，乳酸发酵的过程即为乳酸菌进行_的过程。该过程发生在乳酸菌细胞的的过程。该过程发生在乳酸菌细胞的_中。中。杀灭杂菌杀灭杂菌增加乳酸菌数量增加乳酸菌数量无氧呼吸无氧呼吸细胞质细胞质(3)泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有_、_和和_等。等。(4)从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，泡菜液逐渐变从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸。这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是酸。这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是_，原因是，原因是_。温度温度腌制时间腌制时间食盐用量食盐用量乳酸菌数量增多，杂菌数量减少乳酸菌数量增多，杂菌数量减少乳酸菌比杂菌更为耐酸乳酸菌比杂菌更为耐酸【解析解析】结合泡菜制作过程的相关知识回答问题。结合泡菜制作过程的相关知识回答问题。(1)制作泡菜时需要先形成无菌环境，所用盐水需煮沸，以杀制作泡菜时需要先形成无菌环境，所用盐水需煮沸，以杀灭盐水中的杂菌。想要缩短制作时间，应该缩短菌株的生长灭盐水中的杂菌。想要缩短制作时间，应该缩短菌株的生长时间，陈泡菜液中含有一定量的乳酸菌，这样菌体数量扩增时间，陈泡菜液中含有一定量的乳酸菌，这样菌体数量扩增速度会加快。速度会加快。(2)乳酸菌为厌氧菌，进行无氧呼吸产生乳酸，该过程只能在乳酸菌为厌氧菌，进行无氧呼吸产生乳酸，该过程只能在细胞质中进行。细胞质中进行。(3)温度过高、腌制时间过短、食盐用量不足等，容易造成杂温度过高、腌制时间过短、食盐用量不足等，容易造成杂菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。(4)从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，氧气浓度逐渐降从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，氧气浓度逐渐降低，泡菜液逐渐变酸，不适宜杂菌生长，而适宜乳酸菌生长低，泡菜液逐渐变酸，不适宜杂菌生长，而适宜乳酸菌生长,因此乳酸菌数量增加，其他杂菌数量减少。因此乳酸菌数量增加，其他杂菌数量减少。【链接提升链接提升】1果酒和果醋制作的注意事项果酒和果醋制作的注意事项(1)材料的选择与处理材料的选择与处理选择新鲜的葡萄，榨汁前先冲洗后去枝梗，以防葡萄汁流失选择新鲜的葡萄，榨汁前先冲洗后去枝梗，以防葡萄汁流失及污染。及污染。(2)防止发酵液被污染防止发酵液被污染榨汁机要清洗干净并晾干。榨汁机要清洗干净并晾干。发酵瓶要洗净并用发酵瓶要洗净并用70%酒精消毒。酒精消毒。装入葡萄汁后要封闭充气口。装入葡萄汁后要封闭充气口。(3)发酵条件的控制发酵条件的控制葡萄汁装入发酵瓶时，要留约葡萄汁装入发酵瓶时，要留约1/3的空间，目的是先让酵母的空间，目的是先让酵母菌进行有氧呼吸快速繁殖，耗尽菌进行有氧呼吸快速繁殖，耗尽O2后再进行酒精发酵。后再进行酒精发酵。严格控制温度：严格控制温度：1825 利于酵母菌的繁殖和酒精发酵；利于酵母菌的繁殖和酒精发酵；3035 利于醋酸菌的繁殖和醋酸发酵。利于醋酸菌的繁殖和醋酸发酵。充气：酒精发酵为无氧发酵，需封闭充气口；醋酸发酵为充气：酒精发酵为无氧发酵，需封闭充气口；醋酸发酵为有氧发酵，需适时通过充气口充气。有氧发酵，需适时通过充气口充气。2腐乳制作的注意事项腐乳制作的注意事项(1)控制好材料的用量控制好材料的用量:对卤汤、盐和酒的用量需要严格控制。对卤汤、盐和酒的用量需要严格控制。(2)防止杂菌的污染防止杂菌的污染用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用沸水消毒。用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用沸水消毒。装瓶时，操作要迅速小心。加入卤汤后，要用胶条将瓶口装瓶时，操作要迅速小心。加入卤汤后，要用胶条将瓶口密封。封瓶时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，防止瓶口被密封。封瓶时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染。污染。(3)温度：温度影响菌丝的生长和代谢，如温度过低，则菌丝温度：温度影响菌丝的生长和代谢，如温度过低，则菌丝生长缓慢，不能进入豆腐块的深层；温度高，菌丝易老化和生长缓慢，不能进入豆腐块的深层；温度高，菌丝易老化和死亡，影响腐乳的品质。死亡，影响腐乳的品质。(4)发酵时间：发酵时间影响生化反应速度及生化产物的量。发酵时间：发酵时间影响生化反应速度及生化产物的量。3泡菜制作的注意事项泡菜制作的注意事项(1)材料的选择及用量材料的选择及用量蔬菜应新鲜，若放置时间过长，蔬菜中的硝酸盐易被还原蔬菜应新鲜，若放置时间过长，蔬菜中的硝酸盐易被还原成亚硝酸盐。成亚硝酸盐。清水和盐的质量比为清水和盐的质量比为41，盐水要煮沸后冷却。煮沸有两，盐水要煮沸后冷却。煮沸有两大作用，一是除去水中氧气，二是杀灭盐水中其他细菌。大作用，一是除去水中氧气，二是杀灭盐水中其他细菌。(2)防止杂菌污染：每次取样用具要洗净，要迅速封口。防止杂菌污染：每次取样用具要洗净，要迅速封口。(3)氧气需求氧气需求泡菜坛要选择透气性差的容器，以创造无氧环境，有利于泡菜坛要选择透气性差的容器，以创造无氧环境，有利于乳酸菌发酵，防止蔬菜腐烂。乳酸菌发酵，防止蔬菜腐烂。泡菜坛内要注满水，以保证乳酸菌发酵所需要的无氧环境泡菜坛内要注满水，以保证乳酸菌发酵所需要的无氧环境,并注意在发酵过程中经常补水。并注意在发酵过程中经常补水。(4)温度：发酵温度控制在室温即可，最好在温度：发酵温度控制在室温即可，最好在2636 。温。温度过高，则易滋生杂菌，温度过低则发酵时间延长。度过高，则易滋生杂菌，温度过低则发酵时间延长。跟踪训练跟踪训练人们的日常生活与传统发酵技术密切相关。请回人们的日常生活与传统发酵技术密切相关。请回答下列相关问题：答下列相关问题：(1)制作腐乳过程中所用到的微生物主要是制作腐乳过程中所用到的微生物主要是_。(2)在制作果醋、腐乳、泡菜的过程中需要提供氧气的是在制作果醋、腐乳、泡菜的过程中需要提供氧气的是_。在发酵产物制作过程中都需要培养微生。在发酵产物制作过程中都需要培养微生物，为防止杂菌污染，需要对培养液物，为防止杂菌污染，需要对培养液(基基)和培养器皿进行和培养器皿进行_(填填“消毒消毒”或或“灭菌灭菌”)。(3)利用酵母菌酿酒时，一开始持续通入空气，导致酵母菌数利用酵母菌酿酒时，一开始持续通入空气，导致酵母菌数量量_(填填“增多增多”、“不变不变”或或“减少减少”),然后再密封然后再密封,使酒精使酒精_(填填“增产增产”“”“减产减产”或或“不产生不产生”)。毛霉毛霉制作果醋和腐乳制作果醋和腐乳灭菌灭菌增多增多增产增产(4)制作腐乳过程中在腐乳表面往往有一层致密的皮，这层皮制作腐乳过程中在腐乳表面往往有一层致密的皮，这层皮实际上是微生物的实际上是微生物的_，对人体无害。在制作腐乳过程，对人体无害。在制作腐乳过程中加盐的作用是中加盐的作用是_和和_。(5)在制作泡菜的过程中，要检测亚硝酸盐的含量。亚硝酸盐在制作泡菜的过程中，要检测亚硝酸盐的含量。亚硝酸盐与某些化学物质发生反应后形成与某些化学物质发生反应后形成_色染料。先将泡菜色染料。先将泡菜样品及一系列已知浓度的亚硝酸盐溶液分别与化学物质发生样品及一系列已知浓度的亚硝酸盐溶液分别与化学物质发生显色反应，再通过不同颜色的显色反应，再通过不同颜色的_，可以估测出泡菜样，可以估测出泡菜样品中亚硝酸盐的含量。品中亚硝酸盐的含量。菌丝菌丝析出豆腐中的水分使其变硬析出豆腐中的水分使其变硬抑制微生物生长，避免豆腐块变质抑制微生物生长，避免豆腐块变质玫瑰红玫瑰红对比对比考点三考点三植物有效成分的提取植物有效成分的提取 (2013高考山东卷高考山东卷)胡萝卜素是一种常用的食用色素，胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得，流可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得，流程如下：程如下：(1)筛选产胡萝卜素的酵母菌筛选产胡萝卜素的酵母菌R时，可选用时，可选用_或平板划线法接种。采用平板划线法接或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需先灼烧接种环，其目的是种时需先灼烧接种环，其目的是_。(2)培养酵母菌培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌菌R的生长提供的生长提供_和和_。(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和_以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用_方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤，其目方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是的是_。(4)纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。鉴定过程中需用胡萝卜素标纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为准品作为_。 稀释涂布平板法稀释涂布平板法(或稀释混合平板法或稀释混合平板法)灭菌灭菌(或防止杂菌污染或防止杂菌污染)碳源碳源氮源氮源时间时间水浴水浴滤去不溶物滤去不溶物(实验实验)对照对照【解析解析】(1)接种微生物的方法主要是稀释涂布平板法和平板接种微生物的方法主要是稀释涂布平板法和平板划线法。接种过程中为了避免杂菌的污染，要进行无菌操作划线法。接种过程中为了避免杂菌的污染，要进行无菌操作,必须对接种环进行灼烧处理。必须对接种环进行灼烧处理。(2)在微生物培养过程中，蔗糖主要提供碳源，也可以作为能在微生物培养过程中，蔗糖主要提供碳源，也可以作为能源物质；硝酸盐中含有氮元素，可提供氮源。源物质；硝酸盐中含有氮元素，可提供氮源。(3)提取胡萝卜素时，温度过高、时间过长会导致胡萝卜素分提取胡萝卜素时，温度过高、时间过长会导致胡萝卜素分解；由于萃取剂通常具有挥发性，直接加热时挥发出来的有解；由于萃取剂通常具有挥发性，直接加热时挥发出来的有机溶剂遇明火易爆炸，故常采用水浴加热；萃取和浓缩前进机溶剂遇明火易爆炸，故常采用水浴加热；萃取和浓缩前进行过滤是为了将原料中的不溶物滤去。行过滤是为了将原料中的不溶物滤去。(4)提取出来的胡萝卜素往往不纯，鉴定时常用标准品作为对提取出来的胡萝卜素往往不纯，鉴定时常用标准品作为对照。照。【链接提升链接提升】1水蒸气蒸馏三种常用方法的原理相同，但原料位置不同水蒸气蒸馏三种常用方法的原理相同，但原料位置不同(1)水中蒸馏：原料放于蒸馏容器的水中，水完全浸没原料。水中蒸馏：原料放于蒸馏容器的水中，水完全浸没原料。(2)水上蒸馏：容器中水的上方有筛板，原料置于筛板上，水水上蒸馏：容器中水的上方有筛板，原料置于筛板上，水量以沸腾时不浸湿原料为宜。量以沸腾时不浸湿原料为宜。(3)水气蒸馏：蒸馏容器下方有一排气孔，连接外源水蒸气，水气蒸馏：蒸馏容器下方有一排气孔，连接外源水蒸气，上方有筛板，筛板上面放原料。上方有筛板，筛板上面放原料。三种方法中，水中蒸馏设备简单，成本低，易操作，而水上三种方法中，水中蒸馏设备简单，成本低，易操作，而水上蒸馏和水气蒸馏时间短，出油率高。蒸馏和水气蒸馏时间短，出油率高。2三种提取方法的比较三种提取方法的比较提取提取方法方法水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法压榨法压榨法有机溶剂萃取法有机溶剂萃取法实验实验原理原理方法方法步骤步骤适用适用范围范围利用水蒸气将挥利用水蒸气将挥发性较强的植物发性较强的植物芳香油携带出来芳香油携带出来通过机械加压通过机械加压,压压榨出果皮中的芳榨出果皮中的芳香油香油使芳香油溶解在有使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸发溶机溶剂中，蒸发溶剂获得芳香油剂获得芳香油水蒸气蒸馏水蒸气蒸馏分离油层分离油层除水过滤除水过滤石灰水浸泡、石灰水浸泡、漂洗漂洗压榨、过滤、压榨、过滤、静置静置再次过滤再次过滤粉碎、干燥粉碎、干燥萃取、过滤萃取、过滤浓缩浓缩适用于提取玫瑰适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥油、薄荷油等挥发性强的芳香油发性强的芳香油适用于柑橘、适用于柑橘、柠檬等易焦糊柠檬等易焦糊原料的提取原料的提取适用范围广，要求适用范围广，要求原料的颗粒要尽可原料的颗粒要尽可能细小，能充分浸能细小，能充分浸泡在有机溶液中泡在有机溶液中跟踪训练跟踪训练柑橘是重要的经济植物，橘皮中含有大量橘皮精柑橘是重要的经济植物，橘皮中含有大量橘皮精油，具有很高的经济价值。请回答下列相关问题：油，具有很高的经济价值。请回答下列相关问题：(1)利用植物组织培养技术可以快速繁殖优良的柑橘种苗，常利用植物组织培养技术可以快速繁殖优良的柑橘种苗，常用用_培养基进行培养，该培养基中除含有大量元素、培养基进行培养，该培养基中除含有大量元素、微量元素和有机物等营养物质外，常常需要添加微量元素和有机物等营养物质外，常常需要添加_。(2)植物组织培养过程需在无菌条件下进行，对该培养基进行植物组织培养过程需在无菌条件下进行，对该培养基进行灭菌的常用方法是灭菌的常用方法是_，接种前需对外植体进，接种前需对外植体进行行_处理。处理。MS植物激素植物激素(或生长素和细胞分裂素或生长素和细胞分裂素)高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌消毒消毒(3)橘皮中贮藏了大量橘皮精油，由于橘皮精油的有效成分在橘皮中贮藏了大量橘皮精油，由于橘皮精油的有效成分在水蒸气蒸馏时会水蒸气蒸馏时会_，使用水中蒸馏法又会，使用水中蒸馏法又会_，所以一般采用压榨法。，所以一般采用压榨法。(4)采用压榨法提取橘皮精油时，存在多种因素影响出油率。采用压榨法提取橘皮精油时，存在多种因素影响出油率。为了提高出油率，压榨前要对橘皮进行处理，将柑橘皮为了提高出油率，压榨前要对橘皮进行处理，将柑橘皮_，并用，并用_浸泡。浸泡。发生部分水解发生部分水解产生原料焦糊产生原料焦糊干燥去水干燥去水石灰水石灰水
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