资源描述
1： DH5a 菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的B-半乳糖苷酶氨基端实现a-互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。基因型：F-, 80dlacZ AM15, (lacZYA-argF)U169 , deoR , recAI , endAI , hsdR17(rk- , mk+), phoA , supE44 , 2t, thi-1 , gyrA96 , relA12：BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体 T7 启动子的表达载体(如 pET 系列)的基因。 T7 噬菌体 RNA 聚 合酶位于入噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。基因型： F-，ompT ，hsdS (rBB-mB -)， gal，dcm(DE3 )3：BL21(DE3) pLysS 菌株该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的 背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。 该菌适合表达毒性蛋白 和非毒性蛋白。基因型： F-，ompThsdS (rBB-mB -)， gal，dcm(DE3，pLysS ，Camr4：JM109 菌株该菌株在使用 pUC 系列质粒载体进行 DNA 转化或用 M13 phage 载体进行转染时，由于载体 DNA 产生的 LacZa多肽和JM09编码的LacZ M15进行a互补，从而显示B半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重 组体菌株基因型：recA1 , endA1 , gyrA96 , thi 1, hsdR17 , supE44 , relA1 , ( lac proAB ) /F traD36 proAB+ , lacIq lacZ M155：TOP10 菌株该菌株适用于高效的 DNA 克隆和质粒扩增 能保证高拷贝质粒的稳定遗传。基因型：F- , mcrA (mrr-hsd RMS-mcrBC) ,80 , lacZ AM15 , ac X 74 , recA1 ,ara 139 (ardeu)7697 , galU , galK , rps , (Strr) endA1 , nupG6：HB101 菌株该菌株遗传性能稳定 使用方便 适用于各种基因重组实验基因型：supE44 , hsdS20 (rB-mB ) , recA13 , ara 14 , proA2 , lacY1 , galK2 , rpsL20 , xyl-5 , mtl-1 , leuB6 thi-17：M110 或 SCS110大多数大肠杆菌菌株中含有 Dam 甲基化酶和 Dcm 甲基化酶 前者可以在 GATC 序列中腺嘌呤 N-6 位上引 入甲基 后者在 CCA/TGC 序列的第一个胞嘧啶 C-5 位置上引入甲基。常用的菌株都会产生 dam,dcm 从而受到甲基化的影响 .部分限制性内切酶对甲基化的 DNA 不能切割 如 FbaI 和 MboI 等 一般生物公司提供的内切酶说明中均 有说明。大多数酶切位点的甲基化不影响切割 而有些会影响 如 XbaI, BclI 等。而且甲基化只发生在特定序列 以 XbaI 为例 只有在位点序列旁出现 GA 或 TC 该 XbaI 位才会被甲基化。而要解除这种限制修饰作用通常有两种方法：(1) 选用上述酶的同功酶 如 Sau3AI DNA 识别切割位点与 MboI 相同；但不受甲基化影响；(2) 利用甲基化酶缺失的受体细胞进行DNA 的制备 如 E.coli JM110 和链霉菌等 前者 Dam 和 Dcm 甲基化酶已敲出 而后者细胞内本就没有甲基化酶 从这些细胞中抽提的DNA 就能被上述酶切割。8：E.coli JM110要排除 dam,dcm 甲基化的影响 需要用特定的 dam-,dcm- 的菌株 如 JM110 如果由 JM110 或 SCS110 等甲基化缺失的菌株 产生的质粒 则不会被甲基化 .各种感受态细胞的区别用途特征Xl1-Blue 菌株基因型：endAI gyrA96(nalR) thi- 1 recAI relAI lac glnV44 F Tn10 proAB+ laclq (lacZ)M15 hsdR17(rK mK+) 。特点：具有卡那抗性、四环素抗性和氯霉素抗性。 用途：分子克隆和质粒提取。BL21(DE3) 菌株基因型：F -ompT gal dcmlonhsdSB(rB- mB- )入(DE3 lacllacUV5-T7 gene 1 ind1 sam7 nin5) 。 特点：该菌株用于以 T7 RNA 聚合酶为表达系统的高效外源基因的蛋白表达宿主。 T7 噬菌体 RNA 聚合酶 基因的表达受控于 入噬菌体DE3区的lacUV5启动子，该区整合于 BL21的染色体上。该菌适合于非毒性 蛋白的表达。用途：蛋白质表达。BL21(DE3)ply 菌株基因型：F- ompT gal dcmlonhsdSB(rB- mB- )入(DE3) pLysS(cmR)。特点：该菌株带有 pLysS ，具有氯霉素抗性。此质粒还有表达 T7 溶菌酶的基因， T7 溶菌酶能够降低目的 基因的背景表达水平，但不干扰 lPTG 诱导的表达。适合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表达。 用途：蛋白质表达DH5菌株基因型：F- endA1 glnV44 thi- 1 recA1 relA1 gyrA96 deoRnupG 80dlacZ AM15 (lacZYA -argF)U169, hsdR17(rK-,入-特点：一种常用于质粒克隆的菌株。其80dlacZ AM15基因的表达产物与pUC载体编码的&半乳糖苷酶氨基端实现a互补，可用于蓝白斑筛选。recA1和endA1的突变有利于克隆 DNA的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取。用途：分子克隆、质粒提取和蛋白质表达。JM109 菌株基因型： endA1 glnV44 thi- 1 relA1 gyrA96 recA1 mcrB+ (lac-proAB) e14- F traD36 proAB+ laclq lacZ M15hsdR17(rK-mK+)。特点：部分抗性缺陷，适合重复基因表达 , 可用于 M13 克隆序列测定和蓝白斑筛选。 用途：分子克隆、质粒提取和蛋白质表达。DH10B 菌株基因型：F- mcrA (mrr-hsdRMS- mcrBC) 80dlacZ M15 lacX74 endA1 recA1 deoR (ara,leu)7697 araD139 galUgalKnupGrpsL 入The most widely used E. coli strain for BAC cloning is DH10B。host for pUC and other -complementation vectors; pBR322useful for generating genomic libraries containing methylated cytosine or adenine residues， useful forplasmid rescue procedures 。ELECTROMAX DH10B T1 CELLS说明：DH10B 细胞是高转化效率的 E. coli ，可以完美应用于大多数实验应用。DH10B 基因型具有以下特点：? lacZ M15用于重组克隆的蓝/白斑筛选? 消除了 mcrA、mcrBC 、mrr 和 hsdRMS 限制系统，允许构建更多具有代表性的基因组文库 (1,2)? endA1 突变，可以增加质粒产量和数量? 高效率转化大小为 150 kb 的质粒，用于产生 cDNA 或基因组文库DH10B? 可以表达 tonA 的基因型， tonA 能够提供对 T1 和 T5 噬菌体感染的抗性 (DH10B? T1R) 。DH10B?的基因型：F mcrA (msdRMS- mcrBC) 80lacZ M15 lacX74 recA1 endA1 araD139 (ara, leu)7697 galUgalK 入 rpsL (StrR) nupGDH10B? T1R 的基因型：F mcrA (-hrrdRMS- mcrBC) 80lacZ M15 lacX74 recA1 endA1 araD139 (ara, leu)7697 galUgalK入 rpsL (StrR) nupGtonA
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