【SN商检标准】snt 2209 进出口水产品中有毒生物胺的检测方法 高效液相色谱法

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖 犜 进出口水产品中有毒生物胺的检测方法 高效液相色谱法狅狀犻狉狋犳犲狀犿犪狅犻狅狋犇犻犲犫犻犿 狆狋狉狅犪狀犱狓犲犵犮犻狀犲犪狉狊犲犺犲狀狊犿犻犳狆狋狉狅 犎犘犔犆犺狅犱犿狋犲狔狆 狊狉狋狅犳犮狅犱狌狉 发布 实施中华人民共和国发 布国家质量监督检验检疫总局中华人民共和国出入境检验检疫行 业 标 准进出口水产品中有毒生物胺的检测方法 高效液相色谱法 中 国 标 准 出 版 社 出 版北京复兴门外三里河北街 号邮政编码：网址电话 ： 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本 印张 字数千字年 月第一版 年 月第一次印刷 印数 书号 ： 定价 元犜 犛犖前 言本标准的附录 为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国上海出入境检验检疫局。 本标准主要起草人：方晓明、唐毅锋、陈迪、王传现、徐向华。 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。进出口水产品中有毒生物胺的检测方法 高效液相色谱法 范围本标准规定了用高效液相色谱法测定水产品中有毒生物胺含量的方法。本标准适用于虾肉、鱼肉、贝肉中苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、章鱼胺、酪胺和亚精胺的检测。 测定方法 方法提要试样中的生物胺用高氯酸溶液提取，经丹酰氯衍生化，用配有紫外检测器的高效液相色谱进行分离检测，外标法定量。 试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为去离子水，配流动相水为超纯水。 甲醇：级 。 乙腈：级 。 丙酮：级 。 丹酰氯：级 ，纯度 。 碳酸氢钠。 高氯酸： 氢氧化钠。 。 浓氨水： 。 高氯酸溶液：量取 高氯酸（ ）， 用水稀释到 。 氢氧化钠溶液：称取 氢氧化钠，溶于 水中。 饱和碳酸氢钠溶液。 丹酰氯溶液：称取 丹酰氯，用 丙酮溶解。 标 准 品： 盐 酸 苯 乙 胺（， ，：，纯度 ）、 盐酸腐胺（， （ ） ，： ，纯度 ）、 盐 酸 尸 胺（， （ ） ，：，纯度 ）、 盐酸组胺（， ，：，纯度 ）、 盐酸章 鱼 胺（， （ ） ，：， 纯 度）、 盐 酸 酪 胺（ ， ，：， 纯 度）、 盐酸亚精胺（ ，纯度 ）。， （ ） （ ） ，： 混合标准储备液：准确称取盐酸苯乙胺、盐酸腐胺、盐酸尸胺、盐酸组胺、盐酸章鱼胺、盐酸酪胺和盐酸亚精胺标准品各 、 、 、 、 、 和 于 容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，得到混合标准储备液 。 此溶液于 保存可使用 周 。 工作标准液：根据需要，取适量标准储备液，用水稀释至所需浓度。 仪器和设备 高效液相色谱仪，配有紫外 可见光检测器或二极管阵列检测器。犛犖 犜 涡旋混合器。 均质机。 有机相滤膜： 。 离心机：小于等于 。 进样瓶： 带刻度和带盖。 测定步骤 提取称取 （精确至 ）样品于 离心管中，加入 高氯酸溶液（），均质 ，于 离心，上层清液移入棕色容量瓶中。 残渣再用高氯酸溶液（）提取一次，充 分 混 匀 后， 于 离 心 ， 上 清 液 合 并 于 容 量 瓶 中， 最 后 用 高 氯 酸 溶 液（）定容至 。 取 出 移 入 带 盖 的 进 样 瓶 中， 依 次 加 入 氢 氧 化 钠 溶 液（）、 饱 和 碳 酸 氢 钠 溶 液 和 丹 酰 氯 溶 液（）， 旋 紧 瓶 盖， 于 避 光 反 应。 反应完毕后，加入 浓氨水，静置，用乙腈定容到，振荡混匀，取适量的溶液过有机相针式滤膜，供液相色谱测定。 测定 液相色谱条件 ） 色谱柱： 柱 （， ）， 或相当者； ） 柱温： ； ） 流动相： ，梯度洗脱见表 。 乙酸铵； ，水 乙腈（）含表 梯度洗脱 乙酸铵。时间 ） 流速： ； ） 进样量： ； ） 检测波长：。 色谱测定根据样液中生物胺的含量情况，选定浓度相近的标准工作液，标准工作液和样液中生物胺的响应值均应在仪器检测的线性范围内。 标准工作液和样液等体积参插进样测定。 在上述色谱条件下，标准品 的色谱图参见附录 。 空白实验除不加试样外，均按上述测定步骤进行。 结果计算与表述结果按式（ ）计算，计算结果应扣除空白值。式中：犡 犃 犮 犞 犃 犿（ ）犡 试样中被测物的残留量，单位为微克每克（ ）；犛犖 犜 犃 试样中被测物的色谱峰面积；犃 标准工作液中被测物的色谱峰面积；犮 标准工作液中被测物的浓度，单位为微克每毫升（ ）；犞 样液最终定容体积，单位为毫升（ ）；犿 最终样液所代表的试样量，单位为克（ ）。 测定低限和回收率 测定低限腐胺、亚精胺、尸胺、组胺、酪胺、章鱼胺、苯乙胺的定量低限为 。 回收率 苯乙胺的回收率实验数据添加浓度在 时 ，平均回收率为；相对标准偏差；添加浓度在 时 ，平均回收率为；相对标准偏差；添加浓度在 时 ，平均回收率为；相对标准偏差。 腐胺的回收率实验数据添加浓度在 时 ，平均回收率为；相对标准偏差；添加浓度在 时 ，平均回收率为；相对标准偏差；添加浓度在 时 ，平均回收率为；相对标准偏差。 尸胺的回收率实验数据添加浓度在 时 ，平均回收率为；相对标准偏差；添加浓度在 时 ，平均回收率为；相对标准偏差；添加浓度在 时 ，平均回收率为；相对标准偏差。 组胺的回收率实验数据添加浓度在 时 ，平均回收率为；相对标准偏差；添加浓度在 时 ，平均回收率为；相对标准偏差；添加浓度在 时 ，平均回收率为；相对标准偏差。 章鱼胺的回收率实验数据添加浓度在 时 ，平均回收率为；相对标准偏差；添加浓度在 时 ，平均回收率为；相对标准偏差；添加浓度在 时 ，平均回收率为；相对标准偏差。 酪胺的回收率实验数据添加浓度在 时 ，平均回收率为；相对标准偏差；添加浓度在 时 ，平均回收率为；相对标准偏差；添加浓度在 时 ，平均回收率为；相对标准偏差。 亚精胺的回收率实验数据添加浓度在 时 ，平均回收率为；相对标准偏差；添加浓度在 时 ，平均回收率为；相对标准偏差；添加浓度在 时 ，平均回收率为；相对标准偏差。犛犖 犜 附 录 犃（资料性附录）标准色谱图 苯乙胺（ 腐胺 （ 尸胺 （ 组胺 （ 章鱼胺（ 酪胺 （ 亚精胺（）；）；）；）；）；）；）。图 犃 种生物胺标准品衍生物的色谱图（ 犵 犿犔 ）犛犖 犜 犲犉狉狅狑犱狉狅犃狀犲狓犃狊犳狅犻犱狉犪狀犺犱犪狋狊犻犪狀狏狉狅犲犻犿狋犪狀狀犲狓狊犻犜犱狉犪狀犺犱犪狋狊狑狊犪狆狅狉狆 狅狊犲犱犫狔 犪狀犱狊犻狌狀狉犱犲犺犲狋狉犮犺犪犵狅狀犻狀犻犪狋犪犮犪狊犪狀狋犪犱犻犲犱犻狀犳犿犲犱狉犻犮犪犻犳狅狋狉犮犲狅狀犻狋犳狅犺犲狋犘犲狅狆犲犾狊犚犲狆犮犻犾犳狅狌犫狀犪犻犆犺狊犻犜犱狉犪狀犺犱犪狋狊狑狊犪犲犱狋犳犪狉犱犫狔 犛犺犪狀犵犻犺犪狉犈狋狀狔狋狀狊犈犻犐狓狆狅狀犻狋犲犮犪狀犱狀犲犻狋犙犪狀狉狌犪犅犲犪狌狉狌犳狅犺犲狋犘犲狅狆犲犾 狊犚犲 狆犮犻犳犾狅狌犫狀犪犻犆犺狀犕犻狉犲犪狋犳狊犪犳犇狅狉犻犱犺狉狀犪狋犱犪狋狊犲狉犪犉犪狀犵 犪狅犡犻狀犿犻 犺狌犪犵 ，犜犪狀犵 犲狀犳犻犢犵 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），犪狀犱狋狊狉狅犳狀犿犻犪狀犱犲犿犱狉犲狋犲狌犾狏狅犿犲犺狋狑犻狅狋狀犮犲犪犵 犺 犿 犿犲犿犪狀犲狉犫犪狀犱犲犪犱狉狔 狉狅犳犎犘犔犆 狅狀犻狉狋犇犲狀犪狋犿犲犻 犎犘犔犆狅狆狀犻狋犪狉犲犵 狅狋狀犮狅犻狀犱犪 ） 狌犆犾犿狅狀：犆 犿犿 狓 犿犿（犻 犱 ）， 犿 犲狕犲犾狆犻犮狊犻狋狉犪，狉狅犺犲狋犲狇狋犲狀犾狏犪犻狌；犫 ） 狌犾犮犿狅狀犲狋犿狆犲狉狌狋犪狉犲： ；犮 ）犲犾犕犻狅犫狆 狊犲犺犪：犃 ： 犿犾狅犔 犪犿犿狌犻狅狀犿犲狋犪狋犮犲犪；犲犾犻犅狉狋犻狅狋狀犮犲犪狑狉犲狋犪（）狀犻狀犻犪犮狅狋狀犵 犿犾狅犔犪犿犿狌犻狅狀犿犲狋犪狋犮犲犪，狅犵狀犻狋犲狀狋狌犻狊犲犾犪犱狉犾犲犪犫狋；犲犾犜犪犫狅狀犻狋犲狀狋狌犻犾犪犱犌狉犲犻犜犿犲 狀犿犻犃 犅 犱 ） 狅犾犉狑犲狋犪狉： 犿犔 狀犿犻；犲 ） 狀犐 犼狅狀犻狋犲犮狌犾狏犿狅狀： 犔 ；犳 ） 犠犲狀犾犪狏犲犵犺狋：狀犿犛犖 犜 狅狀犻狉狋犇犲狀犪狋犿犲犻狀犻犃犱犮狉狅犵 狅狋犺犲狋犪狆 犻狅狉狅犿狓狀犻犲狋犪狋犪狉犳犮狅狀狋犮犲狀犾犪狀犪狔犲狋狀犻犪狊犿狆狅狀犻犲犾狋狌犾狊狅狋，犲犮犾犺犲狋犲狊犱狉狀犪犱犪狋狊狑犽狉狅狀犻 犵狅狀犻狋狌犾犺狉狊狋狅犪狑犾犻犲狊犻狉犿 犱狉犪狀犱犪狋狊狀犻狑犽狉狅狆 狅狀狊犲狊狅狋狋犺犪狋犳狅犪狊犿狆狅犲狀犻犾狋狌犾狊狅 犵狅狀犻狋狌狀犪犱犾狊狅犪狊犿狆狅狀犻犲犱狋犾狌狊犺犾狅犾狌狊狅犫犲狀狉狀犻犲犪狀犻犺狉犲狋狑犻犾犜犺犲犲狊狉狆 狅狀狊犲狊犳狅犺犲狋犾犪狀犪犵 犲犳狅狌狉犺犲狋犿狀狊犻狋犲狀犱犲狔犲狋狀犻犺犲狋狅狀犻狋犲犮狋犝狀狉犱犲犺犲狋犪犫狅狏犲犎犘犔犆狅狆狀犻狋犪狉犲犵狅狀犻狋犮狅犻狀犱，狅狉犮犺犿狅狋犪犵犪狉犿狊犳狅犺犲狋犱狊狉犪狀犱犪狋狊狊犲犲犃狀犲狓犃 犪狀犽犾狋犅犲狊狋犜犺犲狅狆狅狀犻狋犪狉犳犲狅犺犲狋犪狀犽狋狊犾犲狊犫狋犻犺犲狋犪狊犿犲狊犪犺犲狋犫犲犱犻狀狉犻犱犮犲狊犺犲狋犿犺狋狅犲犱狅狀犳犻狅狉狋犲狀犪狋犱犿犲犻犺犲狋狅狀狅犻狊犿犻犳狅犪狊犿狆狅狀犻犲犾狋犻犪犱，犫狋狌犺狋狑犻 狅狀犻狋犪狀犱犾犮狌犾犆犪犲狓狆狅狀犻狊犲狊狉狋犳狅犾犲狊狌狉狅狀犻狋犺犪犲狋犱狌犾狊犲犻犮狌狀犲狊狉犾犻犆犪犺犲狋狋犲狊狋犪狊犿狆犲犾犫狔 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犜犲犺犪狉狏犪犲犵犲狉狅犮狏犲狉狔狊犻犱狀犪犚犛犇狊犻狅狀犻犱犲犳狋犻狅犪狋，犲狉犪犺犳狋犻狀犲犮狅犮狀狑狋狀犲犺狉狅犳 犵犵 ； 犜犲犺犪狉狏犪犲犵犲狉狅犮狏犲狉狔狊犻狀犱犪犚犛犇狊犻狅狀犻犱犲犳狋犻狅犪狋，犲狉犪犺犳狋犻狀犲犮狅犮狀狑狋狀犲犺狉狅犳 犵犵 ； 犜犲犺犪狉狏犪犲犵犲狉狅犮狏犲狉狔狊犻狀犱犪犚犛犇狊犻狅狀犻犱犲犳狋犻狅犪狋，犲狉犪犺犳狋犻狀犲犮狅犮狀狑狋狀犲犺狉狅犳 犵犵 犚犲犮狅狏狉犲狔 犳狅狀犲犻犆犪犱犺犪狏狉犲犻犱狔犱犲犻狉狅犾狅狉犮犺犱 犜犲犺犪狉狏犪犲犵犲狉狅犮狏犲狉狔狊犻犱狀犪犚犛犇狊犻狅狀犻犱犲犳狋犻狅犪狋，犲狉犪犺犳狋犻狀犲犮狅犮狀狑狋狀犲犺狉狅犳 犵犵 ； 犜犲犺犪狉狏犪犲犵犲狉狅犮狏犲狉狔狊犻狀犱犪犚犛犇狊犻狅狀犻犱犲犳狋犻狅犪狋，犲狉犪犺犳狋犻狀犲犮狅犮狀狑狋狀犲犺狉狅犳 犵犵 ； 犜犲犺犪狉狏犪犲犵犲狉狅犮狏犲狉狔狊犻狀犱犪犚犛犇狊犻狅狀犻犱犲犳狋犻狅犪狋，犲狉犪犺犳狋犻狀犲犮狅犮狀狑狋狀犲犺狉狅犳 犵犵 犚犲犮狅狏狉犲狔 犳狅犪狋狀狊犲犿犻犎犺犻犱狔犱犲犻狉狅犾狅狉犮犺犱 犜犲犺犪狉狏犪犲犵犲狉狅犮狏犲狉狔狊犻犱狀犪犚犛犇狊犻狅狀犻犱犲犳狋犻狅犪狋，犲狉犪犺犳狋犻狀犲犮狅犮狀狑狋狀犲犺狉狅犳 犵犵 ； 犜犲犺犪狉狏犪犲犵犲狉狅犮狏犲狉狔狊犻狀犱犪犚犛犇狊犻狅狀犻犱犲犳狋犻狅犪狋，犲狉犪犺犳狋犻狀犲犮狅犮狀狑狋狀犲犺狉狅犳 犵犵 ； 犜犲犺犪狉狏犪犲犵犲狉狅犮狏犲狉狔狊犻狀犱犪犚犛犇狊犻狅狀犻犱犲犳狋犻狅犪狋，犲狉犪犺犳狋犻狀犲犮狅犮狀狑狋狀犲犺狉狅犳 犵犵 犚犲犮狅狏狉犲狔 犳狅犗狅狋犮狆犪狀犲犿犻犺狔犱犲犻狉狅犾狅狉犮犺犱 犜犲犺犪狉狏犪犲犵犲狉狅犮狏犲狉狔狊犻犱狀犪犚犛犇狊犻狅狀犻犱犲犳狋犻狅犪狋，犲狉犪犺犳狋犻狀犲犮狅犮狀狑狋狀犲犺狉狅犳 犵犵 ； 犜犲犺犪狉狏犪犲犵犲狉狅犮狏犲狉狔狊犻狀犱犪犚犛犇狊犻狅狀犻犱犲犳狋犻狅犪狋，犲狉犪犺犳狋犻狀犲犮狅犮狀狑狋狀犲犺狉狅犳 犵犵 ； 犜犲犺犪狉狏犪犲犵犲狉狅犮狏犲狉狔狊犻狀犱犪犚犛犇狊犻狅狀犻犱犲犳狋犻狅犪狋，犲狉犪犺犳狋犻狀犲犮狅犮狀狑狋狀犲犺狉狅犳 犵犵 犛犖 犜 犚犲犮狅狏狉犲狔 犳狅犜狔犪狉狀犲犿犻犺狔犱犲犻狉狅犾狅狉犮犺犱 犜犲犺犪狉狏犪犲犵犲狉狅犮狏犲狉狔狊犻犱狀犪犚犛犇狊犻狅狀犻犱犲犳狋犻狅犪狋，犲狉犪犺犳狋犻狀犲犮狅犮狀狑狋狀犲犺狉狅犳 犵犵 ； 犜犲犺犪狉狏犪犲犵犲狉狅犮狏犲狉狔狊犻狀犱犪犚犛犇狊犻狅狀犻犱犲犳狋犻狅犪狋，犲狉犪犺犳狋犻狀犲犮狅犮狀狑狋狀犲犺狉狅犳 犵犵 ； 犜犲犺犪狉狏犪犲犵犲狉狅犮狏犲狉狔狊犻狀犱犪犚犛犇狊犻狅狀犻犱犲犳狋犻狅犪狋，犲狉犪犺犳狋犻狀犲犮狅犮狀狑狋狀犲犺狉狅犳 犵犵 犚犲犮狅狏狉犲狔 犳狅犛狆犺狀犲犻狉犻犲犱犿狉犻狋狔犱犲犻狉狅犾狅狉犮犺犱 犜犲犺犪狉狏犪犲犵犲狉狅犮狏犲狉狔狊犻犱狀犪犚犛犇狊犻狅狀犻犱犲犳狋犻狅犪狋，犲狉犪犺犳狋犻狀犲犮狅犮狀狑狋狀犲犺狉狅犳 犵犵 ； 犜犲犺犪狉狏犪犲犵犲狉狅犮狏犲狉狔狊犻狀犱犪犚犛犇狊犻狅狀犻犱犲犳狋犻狅犪狋，犲狉犪犺犳狋犻狀犲犮狅犮狀狑狋狀犲犺狉狅犳 犵犵 ； 犜犲犺犪狉狏犪犲犵犲狉狅犮狏犲狉狔狊犻狀犱犪犚犛犇狊犻狅狀犻犱犲犳狋犻狅犪狋，犲狉犪犺犳狋犻狀犲犮狅犮狀狑狋狀犲犺狉狅犳 犵犵 犛犖 犜 犱狉犪狀犱犪犛狋狅狉犮犺犿狅狋犪犃狀犲狓 犃狏（狉狅犲犻犳狀犿犻狋犪狀狀犲狓）犵犪狉犿 犘犺犲狀狔犺狋犲犾狔犪狀犲犾犿犻犺犱犲狔犻狉狅犾狅犮犺狉犱（狀犿犻）； 狀犲犻犺犮狊犲犻狉犱狋犘狌犱犲狔犻狉狅犾狅犮犺狉犱（狀犿犻）； 狀犲犻犺犆犪犱犪狉狏犻犲犱犱犲狔犻狉狅犾狅犮犺狉犱（狀犿犻）； 犪狋狀犲狊犿犻犺犎犻犱犱犲狔犻狉狅犾狅犮犺狉犱（狀犿犻）； 狅犗狋犮狆犪狀犲犿犻犺犱犲狔犻狉狅犾狅犮犺狉犱（狀犿犻）； 犜 狔犪狉狀犲犿犻犺犱犲狔犻狉狅犾狅犮犺狉犱（狀犿犻）； 犛 狆犺狀犻犲犻狉犲犱犿犻狋犱犲狔犻狉狅犾狅犮犺狉犱（狀犿犻）。犻犉 犵犲狉狌犃 犛犲狏犲狀狅犻犫犵犮犻犲狀犪狀犲犿犻犱狉犪狀犱犪狋狊狅狉犮犺犿狅狋犪犵犪狉犿（ 犵 犿犔 ）犛 犖 犜 书号 ： 定价 ： 元