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专题20生物技术实践 微生物的培养和应用命题剖析考向扫描1以选择题的形式考查培养基的成分、制备方法,考查学生理解和应用知识的能力2以简答题的形式考查微生物的分离、纯化和培养过程,侧重对实验操作、设计和分析的考查,考查学生实验的操作和综合分析能力命题动向命题将会结合社会热点、科研发现等考查微生物的培养及实践应用,题型主要以非选择题为主1.(2011年重庆理综卷)下列有关细菌培养的叙述,正确的是()A.在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌B.在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长C.向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长D.在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动解析:本题考查培养基的用途和微生物的代谢知识。琼脂固体培养基上长出的单个菌落是由一个或少数同种细菌繁殖而成的同种个体的总和,A项错误;培养基中加入青霉素可选择酵母菌、霉菌等真菌而抑制细菌的生长,因为青霉素可抑制细菌细胞壁的合成,B项错误;破伤风杆菌的代谢类型为厌氧型,通入氧气可使培养基中的破伤风杆菌代谢活动受到抑制,C项错误;半固体培养基可用于观察细菌的运动,D项正确。答案:D。2.(2012年浙江自选模块,17,10分)幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后,进行分离培养。实验基本步骤如下:配制培养基灭菌、倒平板X培养观察请回答:(1)在配制培养基时,要加入尿素和酚红指示剂,这是因为Hp含有,它能以尿素作为氮源;若有Hp,则菌落周围会出现色环带。(2)下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是灭菌。A.高压蒸汽B.紫外灯照射C.70%酒精浸泡D.过滤(3)步骤X表示。在无菌条件下操作时,先将菌液稀释,然后将菌液到培养基平面上,菌液稀释的目的是为了获得菌落。(4)在培养时,需将培养皿倒置并放在中。若不倒置培养,将导致。(5)临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp,其基本原理是Hp能将14C标记的分解为NH3和14CO2。解析:本题考查的是微生物的培养及分离等知识。(1)幽门螺杆菌(Hp)中含有脲酶,该酶能催化尿素的分解,若有Hp,则培养基中尿素会被分解pH升高,酚红指示剂将变红。(2)由于尿素不耐高热, 在高温湿热灭菌中可能会降解,故一般制作尿素培养基时尿素溶液均用滤菌器来灭菌,称为过滤灭菌法。(3)培养细菌的过程为配制培养基,灭菌、倒平板,接种细菌,培养,最后观察现象。无菌条件下,首先将待测样品制成均匀的系列稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开,使成单个细胞存在,再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中,使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后,由单个细胞生长繁殖形成菌落,统计菌落数目,即可计算出样品中的含菌数。 (5)Hp中含有脲酶,该酶能催化尿素和水反应产生氨和二氧化碳。- 2 - / 12答案:(1)脲酶红(2)D(3)接种涂布单(4)恒温培养箱无法形成单菌落(5)尿素3.(2011年新课标全国理综卷)有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题:(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于培养基。(2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即和。(3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力。(4)通常情况下,在微生物培养过程中,实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、和。无菌技术要求实验操作应在酒精灯附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。解析:(1)筛选目的菌株应使用选择培养基,可以在这类培养基中加入某种营养物质,促进所需要的微生物生长,这就是微生物学家常用的“投其所好”的策略。(2)平板划线法和稀释涂布平板法都可以将聚集在一起的细菌分散或稀释成单个细胞,进而得到单菌落。(3)目的菌株可降解原油,从而在培养基上形成以目的菌株为中心的分解圈,分解圈越大表明菌株的降解能力越强。(4)常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌,酒精灯火焰附近是一个无菌区,故实验操作在此处进行可防周围环境中微生物的污染。答案:(1)原油选择(2)平板划线法稀释涂布平板法(3)强(4)干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰4.(2011年山东理综卷)研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用,两者的提取及应用如图所示。(1)柚皮易焦糊,宜采用法提取柚皮精油,该过程得到的糊状液体可通过除去其中的固体杂质。(2)筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或接种。对新配制的培养基灭菌时所用的设备是。实验前需对超净工作台进行处理。(3)培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供。电泳法纯化乳酸菌素时,若分离带电荷相同的蛋白质,则其相对分子质量越大,电泳速度。(4)抑菌实验时,在长满致病菌的平板上,会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。解析:本题考查微生物培养及应用知识。(1)柚皮的特点决定提取柚皮精油时应用压榨法。该过程得到糊状液体再通过过滤除去其中的固体杂质。(2)筛选乳酸菌A时,应使用选择培养基,接种时可用平板划线法或稀释涂布平板法。新配制培养基要先用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌,超净工作台应在实验前进行消毒处理。(3)微生物生长都需水、碳源、氮源、无机盐。培养基中尿素可为乳酸菌A提供氮源。电泳法纯化乳酸菌素时,分离带电荷相同的蛋白质,其相对分子质量越大,电泳速度越慢。(4)抑菌实验时,抑菌物质周围不会有致病菌生存,形成一个以抑菌物质为中心的透明圈,可通过测定透明圈直径(大小)来比较不同抑菌物质的抑菌效果。答案:(1)压榨过滤(2)稀释涂布平板法(或稀释混合平板法)高压蒸汽灭菌锅消毒(3)氮源越慢(4)直径(或大小)5.(2010年重庆理综卷)炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病。炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列,菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者,可根据噬菌体的宿主专一性,通过实验确诊。(1)细菌培养:采集疑似患者的样本,分离培养,获得可疑菌落。(2)细菌鉴定:实验流程如图所示。对配制的液体培养基等需采取方法灭菌;实验所用液体培养基的碳源为(填“无机碳”或“有机碳”)。挑选可疑菌落制片后,用观察,可看到呈竹节状排列的杆菌。接种可疑菌后,35 培养24小时,液体培养基变浑浊,原因是。对照组试管中应加入,与实验组同时培养6小时后,若实验组液体培养基的浑浊度比对照组(填“高”或“低”),则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染;反之则排除。对排除的疑似患者及易感人群,可接种炭疽杆菌疫苗,刺激机体产生相应抗体。与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外,还有。解析:(2)培养基的灭菌一般采用高压蒸汽灭菌法,炭疽杆菌为异养型,因此培养基的碳源应为有机碳。观察细菌,应使用显微镜。若液体培养基变浑浊,是由于细菌大量繁殖造成的。由于实验组是生理盐水配制的澄清噬菌体液,因此,对照组应用等量的生理盐水作为对照。若患者被炭疽杆菌感染,实验组中的炭疽杆菌由于噬菌体侵染而大量裂解死亡,浑浊度会明显低于对照组。抗体是在体液免疫过程中产生的,该过程中,吞噬细胞与抗原识别、呈递有关,效应B细胞合成、分泌抗体。答案:(2)高压蒸汽有机碳显微镜细菌大量繁殖等量生理盐水低吞噬细胞、效应B细胞本题通过实验流程图考查炭疽杆菌的培养和鉴定,正确解答本题必须明确:(1)炭疽杆菌的代谢类型;(2)对照实验的设计原则;(3)人体体液免疫的过程。传统发酵技术的应用命题剖析考向扫描1以选择题的形式考查果酒、腐乳、果醋制作所需微生物的代谢特点,考查学生的理解能力2通过传统发酵技术的操作过程,考查技术的操作和分析,考查学生综合分析和知识应用的能力,多以非选择题形式出现命题动向命题多注重对实验基本操作方法的考查,集中在从实验的角度剖析每项技术,试题多从实验细节入手进行考查,多以非选择题形式出现1.(2012年北京理综卷,5,6分)高中生物学实验中,在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是()A.将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中B.将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上C.将转基因植物叶片接种到无菌培养基上D.将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上解析:本题考查传统发酵技术、植物组织培养以及无菌技术。植物组织培养过程中,污染培养基的某些微生物,其分裂快,生长迅速,不仅会和外植体争夺培养基中的营养物质,还会产生代谢废物毒害培养材料,导致实验操作失败,因此植物组织培养过程需要严格无菌操作。而葡萄酒的酿制,腐乳的制作,在选择培养基上筛选菌种对无菌操作的要求相对较小。答案:C。2.(多选题)(2012年江苏生物,21,3分)下列关于制作果酒、果醋和腐乳的叙述,合理的是()A.在果酒发酵后期拧开瓶盖的间隔时间可延长B.条件适宜时醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸C.果酒发酵过程中发酵液密度会逐渐减小D.将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时,底层和近瓶口处需加大用盐量解析:本题考查传统发酵技术的应用。在豆腐装瓶腌制时,要逐层加盐,随着豆腐块层数的加高而增加盐量,接近瓶口表面的盐要铺厚一些,而底层用盐最少,故D说法错误。答案:ABC。3.(2010年北京理综卷)在家庭中用鲜葡萄制作果酒时,正确的操作是()A.让发酵装置接受光照B.给发酵装置适时排气C.向发酵装置通入空气D.将发酵装置放在45 处解析:用鲜葡萄酿造果酒的原理是酵母菌在无氧条件下,分解葡萄糖为酒精和CO2,其最适温度应为18 25 ,该过程与光照无关,由于发酵过程中产生CO2,为了防止发酵装置爆裂,应适时排气。答案:B。4.(2011年浙江自选模块)杨梅是浙江省的特色水果之一,为对其进行深加工,某厂进行了杨梅酒和杨梅醋的研制,基本工艺流程如下:请回答:(1)在制备杨梅酒过程中,为了提高杨梅的出汁率,在压榨前可加入一定浓度的纤维素酶和酶。甲罐顶上弯管中加水的主要目的是。发酵一定时间后,观察到发酵罐内液面不再有,说明发酵基本完毕。(2)在制备杨梅醋过程中,乙罐内先填充经处理的木材刨花,然后加入含菌的培养液,使该菌在刨花上,再让甲罐中发酵完毕的杨梅酒流入乙罐进行杨梅醋发酵,杨梅醋的pH可通过控制杨梅酒的来调节。(3)若甲罐中的杨梅酒全部流经乙罐制成杨梅醋,则乙罐中CO2的产生量是。A.甲罐的两倍B.与甲罐的相等C.甲罐的一半D.几乎为零(4)在杨梅酒和杨梅醋发酵的整个过程中,某物质浓度随时间变化的示意图如下,该物质是。解析:本题考查果酒和果醋的制作。(1)用纤维素酶和果胶酶水解细胞壁可提高出汁率。甲罐顶上弯管中加水可使甲罐内物质与外界隔绝,防止空气及空气中的杂菌进入罐内,不利于酒精发酵。发酵罐内不再有气泡(CO2)冒出,说明原料耗尽,发酵完毕。(2)木材刨花先经灭菌防止杂菌污染,然后加入醋酸菌,使该菌附着在木材刨花上。杨梅醋的pH可通过控制杨梅酒(原料)的供应速率加以调控。(3)乙罐中醋酸菌利用酒精产生乙酸的反应式为:C2H5OH+O2CH3COOH+H2O,该反应无CO2生成。(4)甲罐中先经酒精发酵产生酒精,酒精的含量不断上升。随后酒精进入乙罐作为原料生成醋酸,因而酒精含量又下降。答案:(1)果胶防止空气进入气泡冒出(2)灭菌醋酸附着流速(3)D(4)酒精从生物材料中提取某些特定的成分命题剖析考向扫描1以选择题的形式考查实验的操作方法,如蒸馏、压榨和萃取,考查学生理解和应用知识的能力2通过实验流程图考查实验操作、设计过程和分析,考查学生获取及处理信息的能力和综合分析的能力,多以非选择题形式出现命题动向命题将会结合新的背景材料考查实验操作方法和注意事项等,形式多以文字描述、图示等出现,题型主要以非选择题为主1.(2011年海南卷)许多植物含有天然香料,如薄荷叶中含有薄荷油。现用薄荷叶提取薄荷油。回答问题:(1)薄荷油是挥发性物质,提取薄荷油时应选用(鲜、干)薄荷叶作原料。其原因是。(2)用萃取法提取薄荷油时,采用的溶剂是,原理是。(3)用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时,在油水混合物中加入氯化钠的作用是。常用于分离油层和水层的器皿是。分离出的油层中加入无水硫酸钠的作用是,除去固体硫酸钠的常用方法是。解析:本题考查有关薄荷油提取知识。(1)因为薄荷油是挥发性物质,所以应选择鲜薄荷叶作为提取用材料。(2)因薄荷油易溶于有机溶剂,用萃取法提取薄荷油时,应选用有机溶剂。(3)用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时,在油水混合物中加入氯化钠的作用是增加盐浓度,促进油水分层,常用于分离油层和水层的器皿是分液漏斗。分离出的油层中加入无水硫酸钠吸掉水分,后再用过滤方法除去固体硫酸钠。答案:(1)鲜薄荷油易挥发,鲜薄荷叶中薄荷油含量高(2)有机溶剂薄荷油易溶于有机溶剂(3)增加盐浓度,促进油水分层分液漏斗吸水过滤2.(2010年新课标全国理综卷)下列是与芳香油提取相关的问题,请回答:(1)玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取,其理由是玫瑰精油具有的性质。蒸馏时收集的蒸馏液(是、不是)纯的玫瑰精油,原因是。(2)当蒸馏瓶中的水和原料量一定时,蒸馏过程中,影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和。当原料量等其他条件一定时,提取量随蒸馏时间的变化趋势是。(3)如果蒸馏过程中不进行冷却,则精油提取量会,原因是。(4)密封不严的瓶装玫瑰精油保存时最好存放在温度的地方,目的是。(5)某植物花中精油的相对含量随花的不同生长发育时期的变化趋势如图所示。提取精油时采摘花的最合适时间为天左右。(6)从薄荷叶中提取薄荷油时(能、不能)采用从玫瑰花中提取玫瑰精油的方法,理由是。解析:本题主要考查芳香油的提取。(1)根据玫瑰精油的化学性质确定提取的方法;蒸馏时,玫瑰精油会随水分一起蒸馏出来,因此蒸馏得到的是油水混合物。(2)影响玫瑰精油提取的因素很多,如蒸馏的时间、温度等。(3)蒸馏过程中如果不进行冷却,部分玫瑰精油会随水蒸气挥发而流失,导致精油提取量下降。(4)由于玫瑰精油具有易挥发的特点,因此,如果瓶装的玫瑰精油密封不严,最好放在温度较低的环境中,以减少挥发。(5)分析题图可以看出,a天时花中精油的相对含量最高,是提取精油的最佳时期。(6)由于薄荷油与玫瑰精油的物理化学性质相似,因此,可以采用提取玫瑰精油的方法提取薄荷油。答案:(1)易挥发、难溶于水、化学性质稳定不是玫瑰精油随水蒸气一起蒸馏出来,所得到的是油水混合物(2)蒸馏温度在一定时间内提取量随蒸馏时间的延长而增加,一定时间后提取量不再增加(3)下降部分精油会随水蒸气挥发而流失(4)较低减少挥发(5)a(6)能薄荷油与玫瑰精油的物理化学性质相似植物的组织培养命题剖析考向扫描多以非选择题形式考查植物组织培养、花药离体培养的过程及二者的区别,考查知识的理解和应用能力命题动向命题将结合生产实际考查植物组织培养的操作过程和注意事项等,形式多以图示出现,题型主要以非选择题为主1.(2012年广东理综卷,2,4分)培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是()A.组织培养B.细胞杂交C.显微注射D.核移植解析:培育脱毒幼苗的原理是利用植物细胞的全能性,将不含病毒的植物细胞或者组织(如茎尖等)通过植物组织培养技术获得幼苗,故选A。答案:A。2.(2011年江苏卷)下列有关植物组织培养的叙述,正确的是()A.愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞B.二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株C.用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子D.植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得解析:愈伤组织是一团无定形状态的薄壁细胞。二倍体植株的花粉经脱分化与再分化处理后会得到单倍体植株,然后再经秋水仙素处理,得到稳定遗传的二倍体植株。胚状体外包上人工薄膜,可制成人工种子。答案:D。3.(2012年山东理综卷,34,8分)辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。(1)图中和分别表示辣椒组织培养中细胞的和过程。(2)图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值(填“高”或“低”)时,有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时,应采取的灭菌方法是。(3)图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是。用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时,常用的酶是和纤维素酶。(4)提取辣椒素过程中,萃取加热时需安装冷凝回流装置,其目的是。解析:本题考查选修一第3专题“植物的组织培养技术”的相关知识,同时考查学生的理解能力。难度较小。(1)考查课本上的基础知识,植物组织培养的两个基本过程是脱分化和再分化。(2)考查培养基的配方。凝固剂是琼脂,芽的分化需要细胞分裂素多生长素少,灭菌的方法是高压蒸汽灭菌。(3)考查外植体的消毒和细胞分离的方法,消毒用的酒精的体积分数为70%,分离植物细胞用纤维素酶和果胶酶。(4)考查提取物质需要的装置,与第6专题“植物有效成分的提取”相联系,冷凝回流装置安装的目的是防止有机溶剂的挥发。答案:(1)脱分化(或去分化) 再分化(2)琼脂低高压蒸汽灭菌(3)70%果胶酶(4)防止有机溶剂的挥发生长素和细胞分裂素的比值对于分化有影响,生长素多利于根的分化,细胞分裂素多利于芽的分化,两者比值适中时得到愈伤组织。4.(2012年课标全国卷,39,15分)为了探究6BA和IAA对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响,某研究小组在MS培养基中加入6BA和IAA,配制成四种培养基(见下表),灭菌后分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体,在适宜条件下培养一段时间后,统计再生丛芽外植体的比率(m),以及再生丛芽外植体上的丛芽平均数(n),结果如下表。培养基编号浓度/mgL-1m/%n/个6BAIAA10.5076.73.120.177.46.130.266.75.340.560.05.0回答下列问题:(1)按照植物的需求量,培养基中无机盐的元素可分为和两类。上述培养基中,6BA属于类生长调节剂。(2)在该实验中,自变量是。因变量是,自变量的取值范围是。(3)从实验结果可知,诱导丛芽总数最少的培养基是号培养基。(4)为了诱导该菊花试管苗生根,培养基中一般不加入(填“6BA”或“IAA”)。解析:(1)据植物的需求量,元素分为大量元素和微量元素,6BA属于细胞分裂素类的生长调节剂。(2)据实验目的和实验中的数据,分析得出IAA的浓度是自变量,菊花再生丛芽外植体的比率和外植体上的丛芽平均数均是因变量;由表中数据可以看出IAA的浓度范围是00.5 mgL-1。(3)再生丛芽的外植体数乘以外植体上丛芽平均数即为丛芽总数,故最少的是1号培养基。(4)因为诱导试管苗生根需要生长素用量和细胞分裂素用量的比值比较高,故培养基中不需要加6BA。答案:(1)大量元素微量元素细胞分裂素(2)IAA浓度再生丛芽外植体的比率(m)和再生丛芽外植体上的丛芽平均数(n)00.5 mgL-1(3)1(4)6BA5.(2010年安徽理综卷)草莓生产上传统的繁殖方式易将所感染的病毒传播给后代,导致产量降低、品质变差。运用微型繁殖技术可以培育出无病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本过程如下:外植体愈伤组织芽、根植株请回答(1)微型繁殖培育无病毒草莓苗时,一般选取作为外植体,其依据是。(2)在过程中,常用的MS培养基主要成分包括大量元素、微量元素和,在配制好的培养基中,常常需要添加,有利于外植体启动细胞分裂形成愈伤组织。接种后25 d,若发现外植体边缘局部污染,原因可能是。(3)在过程中,愈伤组织在诱导生根的培养基中未形成根,但分化出了芽,其原因可能是。解析:(1)微型繁殖技术一般选取植物的茎尖或根尖,因为此处的分生组织刚刚形成,被病毒感染的机会很少或无病毒。(2)MS培养基的主要成分除了大量元素,微量元素,还应含有有机物,如糖类;培养基中添加植物激素能促进细胞的分裂或分化,培养过程应对外植体彻底消毒。(3)由愈伤组织诱导生根的培养基中,生长素类物质的用量与细胞分裂素类物质的用量的比值高;反之诱导芽的生长则比值低。答案:(1)茎尖(或根尖)茎尖(或根尖)病毒极少,甚至无病毒(2)有机物植物激素外植体消毒不彻底(3)培养基中生长素类物质用量与细胞分裂素类物质用量的比值偏低DNA和蛋白质技术命题剖析考向扫描以选择题形式考查DNA和蛋白质的分离过程,考查学生理解和应用知识的能力命题动向命题将会结合新的背景材料考查DNA和蛋白质提取的原理、方法,多以信息材料给予、图示等形式出现,题型主要以选择题为主1.(2012年江苏生物,18,2分)下列关于“DNA粗提取与鉴定实验”的叙述,正确的是()A.洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度B.将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝C.常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的提取D.用玻棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少解析:本题考查DNA粗提取与鉴定实验。洗涤剂只起溶解细胞膜的作用,不影响DNA在NaCl溶液中的溶解度,故A错。DNA溶液与二苯胺试剂在沸水浴条件下显蓝色,这里的DNA不是丝状的DNA,故B错。用玻棒缓慢搅拌滤液,会减少对DNA分子的破坏,使DNA获得量增加,故D错。答案:C。2.(2011年广东理综卷)以下关于猪血红蛋白提纯的描述,不正确的是()A.洗涤红细胞时,使用生理盐水可防止红细胞破裂B.猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少C.血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测D.在凝胶色谱法分离过程中,血红蛋白比相对分子质量较小的杂蛋白移动慢解析:本题考查血红蛋白的提取和分离技术。生理盐水与细胞内液的浓度相等,可防止红细胞因过量吸水而破裂,A项正确。在凝胶色谱法分离血红蛋白的过程中,可根据其颜色监测血红蛋白的洗脱情况,故C项正确。蛋白质相对分子质量越大,在凝胶色谱法分离过程中的移动速度越快,故D项错。答案:D。3.(2010年江苏卷)某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动,具体步骤如下:材料处理:称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份,每份10 g。剪碎后分成两组,一组置于20 、另一组置于-20 条件下保存24 h。DNA粗提取:第一步:将上述材料分别放入研钵中,各加入15 mL研磨液,充分研磨。用两层纱布过滤,取滤液备用。第二步:先向6只小烧杯中分别注入10 mL滤液,再加入20 mL体积分数为95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌,使絮状物缠绕在玻璃棒上。第三步:取6支试管,分别加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮状物。DNA检测:在上述试管中各加入4 mL二苯胺试剂,混合均匀后,置于沸水中加热5 min,待试管冷却后比较溶液的颜色深浅,结果如下表。材料保存温度花菜辣椒蒜黄20 +-20 +(注:“+”越多表示蓝色越深)分析上述实验过程,回答下列问题:(1)该探究性实验课题名称是。(2)第二步中“缓缓地”搅拌,这是为了减少。(3)根据实验结果,得出结论并分析。结论1:与20 相比,相同实验材料在-20 条件下保存,DNA的提取量较多。结论2:。针对结论1,请提出合理的解释:。(4)氯仿密度大于水,能使蛋白质变性沉淀,与水和DNA均不相溶,且对DNA影响极小。为了进一步提高DNA纯度,依据氯仿的特性,在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是:,然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出。解析:(1)由材料处理中,将不同的材料分别置于20 和-20 条件下保存,可知该实验课题是:探究不同实验材料和不同保存温度对DNA提取量的影响。(2)在DNA粗提取过程中“缓缓地”搅拌是防止DNA断裂影响实验效果。(3)根据结果可知:相同的等量的材料在不同温度下,低温提取的DNA多,原因是低温影响相关酶活性,使DNA的降解速度降低。相同的温度条件、等量的不同材料,蒜黄提取的DNA量最多。(4)据氯仿的特性,可将第三步获得的溶液与等量的氯仿混合,一段时间后,蛋白质变性沉淀,吸取上清液后,再加体积分数为95%的冷酒精溶液会获得纯度更高的DNA。答案:(1)探究不同实验材料和不同保存温度对DNA提取量的影响(2)DNA断裂(3)等量的不同实验材料,在相同的保存温度下,从蒜黄提取的DNA量最多低温抑制了相关酶的活性,DNA降解速度慢(4)将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合,静置一段时间,吸取上清液本题通过DNA的提取实验考查了对照性实验的设计方法,一要注意设计对照实验的单变量原则,二要注意DNA提取过程中不同试剂的作用及各环节操作的目的。 希望对大家有所帮助,多谢您的浏览!
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