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专题五专题五 DNA和蛋白质技术和蛋白质技术ATGCAGCT5端端3端端5端端3端端-OH端为端为3磷酸基团的末端为磷酸基团的末端为5。体内DNA复制DNA的双螺旋结构形成的双螺旋结构形成 能否在体外模拟体内能否在体外模拟体内DNA复制条件，进行复制条件，进行DNA扩增？扩增？1、 PCRPCR技术含义技术含义2 2、原理、原理 ：DNADNA的半保留复制的半保留复制 DNADNA的热变性的热变性一、基础知识一、基础知识（一）（一）PCRPCR原理：阅读课本原理：阅读课本P58-59P58-59 原料：模板：能量：3 3、PCRPCR反应的条件反应的条件4PCR 4PCR 循环过程循环过程 ：第一步加热变性第一步加热变性: :双链双链DNADNA解聚成为单链解聚成为单链PCR PCR 循环第二步循环第二步 ：引物与模板引物与模板DNADNA单链单链的互补序列配对结合的互补序列配对结合模板序列模板序列模板序列模板序列引物引物引物引物553 3555533553333Taq DNATaq DNA聚合酶聚合酶PCR PCR 循环第三步循环第三步 ：引物延伸引物延伸: :合成新的合成新的DNADNA链链第第1 1个个 PCR PCR 循环完成后循环完成后 ：得到得到两个两个拷贝的靶序列拷贝的靶序列循环循环次数次数DNADNA数量数量1 12 22 24 43 38 820201,048,5761,048,57630301,073,741,8241,073,741,8243030次循环后扩增的数量次循环后扩增的数量5 5、PCR PCR 循环的结果循环的结果 DNADNA聚合酶只能特异性地复制处于聚合酶只能特异性地复制处于两个引物之间的两个引物之间的DNADNA序列序列，使这段固，使这段固定长度的序列定长度的序列呈指数扩增呈指数扩增。从第二轮循环开始，从第二轮循环开始，上一次循环的上一次循环的产物也作为模板参与反应产物也作为模板参与反应，并且由，并且由引引物物延伸而成的延伸而成的DNADNA单链会与引物单链会与引物（延伸而成的延伸而成的DNA单链）单链）结合结合，进行，进行DNADNA的延伸。的延伸。填空填空题题1.PCR仪加热使（仪加热使（ ）变性）变性, 复性使引物与模复性使引物与模板板DNA（ ）,延伸需将反应温度升至中温延伸需将反应温度升至中温( ),在（在（ ）的作用下）的作用下,以（以（ ）为原料合成新链。为原料合成新链。2.PCR经（经（ ）三个阶段为一个）三个阶段为一个循环。循环。DNA互补互补72Tap酶酶4种种dNTP变性、复性、延伸变性、复性、延伸PCR的基本原理是什么？用的基本原理是什么？用PCR扩增某一基因，扩增某一基因，必须预先得到什么样的信息？必须预先得到什么样的信息？。简答简答题题2006.广东广东 下列关于基因工程应用的叙述，正确的是（下列关于基因工程应用的叙述，正确的是（ ）A基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因B基因诊断的基本原理是基因诊断的基本原理是DNA分子杂交分子杂交C一种基因探针能检测水体中的各种病毒一种基因探针能检测水体中的各种病毒D原核基因不能用来进行真核生物的遗传改良原核基因不能用来进行真核生物的遗传改良B解析：解析： 基因治疗是把健康的外源基因导入到基因治疗是把健康的外源基因导入到有缺陷基因的细胞中；一种基因探针能检有缺陷基因的细胞中；一种基因探针能检测相应的某一种特定的病毒；原核基因可测相应的某一种特定的病毒；原核基因可以用来进行真核生物的遗传改良，例如用以用来进行真核生物的遗传改良，例如用苏云金芽孢杆菌的抗虫基因改良棉花。苏云金芽孢杆菌的抗虫基因改良棉花。
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