（优质课件）无菌知识培训

1 一 、 无 菌 相 关 概 念 概 述 二 、 GMP与 药 品 生 产 三 、 传 播 污 染 的 媒 介 四 、 洁 净 区 的 人 员 要 求 五 、 人 员 进 出 洁 净 区 规 程 2 无 菌 ： 是 指 物 体 或 任 一 介 质 中 没 有 活 的 微 生 物 的 存在 ， 即 无 论 用 何 种 方 法 ， 检 不 出 活 的 微 生 物 。 无 菌 操 作 ： 指 在 操 作 中 ， 采 用 或 控 制 一 定 条 件 ， 尽量 避 免 产 品 污 染 微 生 物 的 一 种 操 作 方 法 程 序 。 为 此目 的 ， 所 用 的 一 切 物 品 、 环 境 ， 均 应 事 先 灭 菌 ， 操作 也 应 在 无 菌 操 作 室 中 进 行 。 无 菌 观 念 ： 指 在 无 菌 操 作 时 ， 避 免 污 染 任 何 微 生 物 。 3 “无 菌 ” 从 定 义 上 来 说 是 一 个 绝 对 的 概 念 ， 但 遗 憾 的 是 ， 在科 学 和 技 术 高 度 发 展 的 今 天 ， 药 品 的 绝 对 无 菌 即 做 不 到 ， 也无 法 加 以 证 实 。 然 而 ， 无 菌 制 剂 的 安 全 性 要 求 人 们 设 定 无 菌的 相 对 标 准 。 FDA、 欧 洲 制 药 工 业 界 曾 将 百 万 分 之 一 微 生 物污 染 率 作 为 灭 菌 产 品 “ 无 菌 ” 的 相 对 标 准 ， 它 和 蒸 汽 灭 菌 后产 品 中 微 生 物 存 活 的 概 率 为 10-6（ 即 产 品 的 无 菌 保 证 值 为6） ， 系 同 一 标 准 的 不 同 表 示 法 。 这 一 标 准 于 1980起 收 录 于USP 中 ， 如 今 已 为 世 界 各 国 普 遍 接 受 和 采 用 。 4 在 药 品 生 产 中 ， 由 于 受 到 各 种 要 素 （ 制 药 厂 房 环 境的 空 气 、 制 药 用 水 、 操 作 人 员 、 物 料 、 设 备 等 ） 的影 响 ， 都 可 能 导 致 药 品 的 微 生 物 污 染 。 因 此 ， GMP对 各 种 要 素 都 提 出 了 防 止 污 染 的 基 本 要 求 。 中 国 药典 微 生 物 限 度 检 查 法 规 定 的 检 查 项 目 包 括 细 菌 数 、霉 菌 数 、 酵 母 菌 数 和 控 制 菌 检 查 。 5 推 行 GMP目 的 ： 消 灭 污 染 、 混 药 、 差 错 污 染 的 定 义 ： 当 一 个 产 品 存 在 有 不 需 要 的 物 质 时 ， 它 即 受 到 污 染 。 污 染 的 形 式 ： 尘 粒 污 染 、 微 生 物 污 染 6 尘 粒 污 染 ： 是 指 产 品 因 混 入 不 属 于 它 的 那 些 尘 粒 而变 得 不 纯 净 。 尘 埃 、 污 物 、 棉 绒 、 纤 维 以 及 我 们 的头 发 都 是 尘 粒 污 染 的 潜 在 原 因 。 临 床 资 料 表 明 ： 如 药 品 被 7 2 m的 尘 粒 污 染 了 ，尤 其 是 静 脉 注 射 用 药 ， 可 以 导 致 热 原 反 应 、 肺 动 脉炎 、 微 血 栓 或 异 物 肉 芽 肿 等 ， 严 重 的 会 致 人 死 命 。 7 微 生 物 污 染 是 指 因 微 生 物 产 生 、 附 着 而 给 特 定的 环 境 带 来 的 不 良 影 响 。 如 果 细 菌 得 到 了 必 要 的 养 料 、 一 定 量 的 水 份 和合 适 的 温 度 ， 它 们 就 能 迅 速 繁 殖 ， 它 们 繁 殖 的速 度 快 得 惊 人 。 通 常 一 个 细 菌 在 仅 仅 24小 时 后可 产 生 出 281兆 (百 万 )个 的 细 菌 。 8 1、 空 气 空 气 并 不 是 产 生 污 染 的 介 质 ， 但 它 是 污 染 的 危 险 携带 者 。 充 满 微 生 物 的 尘 埃 和 水 滴 就 是 通 过 空 气 作 为侵 袭 我 们 产 品 的 媒 介 而 成 为 重 要 的 污 染 源 的 。 当 我 们 谈 话 、 咳 嗽 和 打 喷 嚏 时 ， 被 污 了 的 水 滴 正 是不 断 地 从 我 们 的 呼 吸 道 中 放 入 我 们 的 工 作 场 所 。 尘埃 微 粒 正 是 通 过 空 气 流 不 间 断 地 在 我 们 整 个 药 厂 范围 循 环 运 行 着 。 9 空 气 中 的 微 生 物 主 要 来 源 于 带 有 微 生 物 菌 体 及 孢 子的 灰 尘 ， 这 类 微 生 物 大 多 数 是 腐 生 性 的 ， 还 来 源 于人 和 动 物 ， 它 们 大 多 数 是 通 过 呼 吸 道 排 出 的 ， 其 中也 包 含 有 病 原 微 生 物 ， 悬 浮 在 大 气 中 。 空 气 中 微 生 物 的 分 布 随 环 境 条 件 及 微 生 物 的 抵 抗 力不 同 而 呈 现 不 同 的 分 布 规 律 。 空 气 中 存 在 较 多 的 、存 活 时 间 较 长 的 是 各 种 真 菌 、 放 线 菌 的 孢 子 及 细 菌芽 胞 。 空 气 中 微 生 物 的 数 目 决 定 于 尘 埃 的 总 量 。 10 空 气 中 的 微 生 物 的 数 量 随 人 的 密 度 、 活 动 程 度 (尘 土 被 搅 动 的 情 况 ) 以 及温 度 、 湿 度 、 风 力 等 因 素 而 异 。 空 气 中 因 缺 乏 营 养 物 ， 微 生 物 在 其 中 不能 繁 殖 与 久 留 ， 只 有 抵 抗 力 较 强 的 微 生 物 如 芽 胞 杆 菌 、 八 叠 球 菌 、 葡 萄球 菌 以 及 真 菌 (如 青 霉 菌 、 曲 霉 菌 、 毛 霉 菌 等 )存 活 时 间 较 长 。 空 气 携 带 细 菌 主 要 有 2种 方 式 ； 一 是 细 菌 可 附 着 在 尘 土 上 (细 微 颗 粒 )，长 时 间 浮 游 在 空 气 中 ； 其 二 ， 细 菌 在 人 咳 嗽 、 喷 嚏 、 唱 歌 、 讲 话 、 呼 吸时 通 过 口 腔 、 鼻 腔 部 喷 出 的 飞 沫 (大 多 数 飞 沫 为 48m)可 长 时 间 浮 游 在空 气 中 ， 飞 沫 的 水 分 蒸 发 后 便 成 飞 沫 核 ， 直 径 缩 至 l 2m， 附 着 的 微 生 物 随 气 流 悬 浮 不 定 。 空 气 中 微 生 物 是 药 品 生 产 中 引 起 污 染 的 重 要 来 源 之一 。 因 此 必 须 做 好 空 气 的 清 洁 卫 生 和 消 毒 管 理 工 作 。 11 空 气 中 存 在 的 尘 埃 微 粒 是 含 有 微 生 物 (细 菌 等 )的 。 因 此 ，空 气 是 侵 袭 我 们 产 品 的 污 染 物 的 主 要 媒 介 。 这 就 是 为 什么 要 尽 量 保 持 空 气 洁 净 是 极 为 重 要 的 。在 药 品 生 产 中 ， 减 少 空 气 中 微 生 物 数 量 的 方 法 有 多 种 ， 常用 的 有 以 下 3种 方 法 ： 空 气 洁 净 技 术 采 用 的 过 滤 方 法 过 滤 是 最 常 用 的 方 法 。 过 滤 介 质 种 类 很 多 ， 例 如 ： 纤 维 素、 玻 璃 棉 或 人 造 纤 维 等 。 空 气 净 化 装 置 可 用 于 整 个 房 间如 无 菌 操 作 室 ， 也 可 只 限 于 操 作 区 域 局 部 如 超 净 工 作 台。 化 学 消 毒 方 法 采 用 消 毒 剂 作 用 于 室 内 空 气 和 物 体 表 面。 紫 外 线 照 射 方 法 采 用 紫 外 线 对 室 内 空 气 进 行 照 射 。 12 2、 厂 房 与 设 备 制 药 企 业 生 产 车 间 的 厂 房 ， 库 房 及 实 验 室 都 必 须 清洁 整 齐 。 建 筑 物 表 面 不 透 水 ， 光 滑 平 整 、 无 裂 缝 、接 口 严 密 、 无 颗 粒 物 脱 落 ， 并 能 耐 受 清 洗 和 消 毒 。设 备 、 管 道 应 易 于 拆 卸 、 结 构 简 单 ， 便 于 清 洁 消 毒 。 特 别 是 药 品 生 产 过 程 中 使 用 的 容 器 ， 包 括 内 包 装 容器 ， 都 应 进 行 清 洗 和 消 毒 。 13 3、 人 员 人 是 最 常 见 的 传 染 源 。 事 实 上 ， 人 们 常 说 ， 人 是 药厂 中 最 不 清 洁 的 成 份 ， 最 大 的 污 染 源 。 为 什 么 呢 ?一 个 原 因 ， 人 体 是 一 个 永 不 休 止 的 污 染 媒 介 。 当 您每 天 来 药 厂 上 班 时 ， 您 也 许 随 身 将 几 百 万 细 菌 带 入工 厂 。 14 人 员 的 发 菌 量 洁 净 室 内 当 工 作 人 员 穿 无 菌 服 时 ， 静 止 时 的 发 菌 量 为 10 300个/(min人 )， 躯 体 一 般 活 动 时 的 发 菌 量 为 150 1000个 (min人 )，快 步 行 走 时 的 发 菌 量 为 900 2500个 (min人 )； 穿 平 常 衣 服 时 发 菌 量 为 3300 62000个 (min人 )； 有 口 罩 发 菌 量 ： 无 口 罩 发 菌 量 为 (1:7) (1:14)； 咳 嗽 一 次 的 发 菌 量 为 70 700个 ， 喷 嚏 一 次 的 发 菌 量 为 400060000个 。 15 正 常 人 体 常 见 的 微 生 物 在 人 的 皮 肤 和 与 外 界 相 通 的 粘 膜 腔 道 中 ， 都 有 微 生 物 的 生长 繁 殖 。 这 些 存 在 于 人 体 各 部 位 的 微 生 物 ， 它 们 与 宿 主 长期 保 持 着 共 生 与 互 生 的 关 系 ， 通 常 称 它 们 为 正 常 菌 群 或 正常 人 体 常 居 菌 。 在 正 常 情 况 下 ， 正 常 菌 群 的 存 在 对 人 体 是有 益 的 。 如 大 肠 中 大 肠 杆 菌 ， 可 以 合 成 核 黄 素 、 B12， 、维 生 素 K及 多 种 氨 基 酸 等 人 体 不 可 缺 少 的 营 养 物 质 ， 还 能干 扰 和 抵 抗 其 它 病 原 微 生 物 对 宿 主 的 侵 入 。 但 某 些 正 常 菌群 ， 在 人 体 抗 力 下 降 ， 或 当 一 些 微 生 物 异 位 侵 入 某 些 组织 时 ， 都 可 以 引 起 人 体 疾 病 ， 这 些 细 菌 通 常 称 条 件 致 病 菌 。现 将 人 体 各 部 位 存 在 的 主 要 菌 群 分 述 如 下 。 16 皮 肤 菌 丛 皮 肤 上 微 生 物 寄 生 示 意 图 17 因 此 对 于 从 事 药 品 生 产 的 人 员 来 讲 ， 特 别 是 直 接接 触 药 品 的 部 分 ， 必 须 经 常 定 时 清 除 皮 肤 表 面 的 微生 物 。 一 般 皮 肤 常 见 菌 丛 有 金 黄 色 和 白 色 葡 萄 球 菌 、大 肠 杆 菌 、 类 白 喉 杆 菌 、 八 叠 球 菌 、 变 形 杆 菌 及 真菌 等 。 脸 、 颈 部 的 皮 肤 ， 由 于 手 的 媒 介 常 污 染 口 鼻部 的 微 生 物 。 皮 肤 的 脂 肪 和 蜡 质 分 泌 物 内 ， 常 有 亲脂 性 酵 母 。 而 头 皮 及 光 洁 无 毛 的 皮 肤 上 可 能 存 在 各种 癣 菌 和 霉 菌 。 18 呼 吸 道 菌 丛 正 常 人 的 气 管 、 支 气 管 和 肺 部 基 本 上 是 无 菌 的 ； 鼻 腔 常 见 的 细 菌为 金 黄 色 和 白 色 葡 萄 球 菌 ， 类 白 喉 杆 菌 ， 草 绿 色 链 球 菌 ， 鼻 咽 部含 菌 较 多 ， 常 见 者 为 草 绿 色 链 球 菌 和 革 兰 阴 性 球 菌 ， 并 有 少 数 类白 喉 杆 菌 和 葡 萄 球 菌 。 一 些 病 原 微 生 物 如 肺 炎 双 球 菌 、 脑 膜 受 双球 菌 、 溶 血 性 链 球 菌 、 流 感 杆 菌 也 常 存 在 于 恢 复 期 患 者 或 健 康 带菌 者 鼻 咽 部 。 所 以 ， 有 上 呼 吸 道 感 染 症 状 的 人 (咽 炎 、 支 气 管 炎 、卡 他 病 状 如 咳 嗽 、 喷 嚏 )均 不 宜 进 洁 净 工 作 室 。 19 口 腔 菌 丛 口 腔 中 有 适 宜 的 温 度 ， 并 含 有 食 物 残 渣 、 脱 落 上 皮 和 粘液 等 ， 是 微 生 物 生 长 繁 殖 的 良 好 场 所 。 口 腔 中 的 细 菌 种类 很 多 ， 且 数 量 变 化 也 大 。 常 见 的 为 革 兰 阳 性 球 菌 、 奈氏 球 菌 、 乳 酸 杆 菌 、 梭 状 芽 胞 杆 菌 、 螺 旋 体 、 白 色 念 珠菌 、 类 白 喉 杆 菌 。 正 常 谈 话 时 ， 常 见 喷 出 的 细 菌 是 腐 生的 绿 色 链 球 菌 类 。 20 胃 肠 道 菌 丛 健 康 人 无 食 物 的 胃 内 通 常 无 菌 。 唾 液 及 鼻 咽 分 泌 物 中 的 细 菌 随 食物 进 入 胃 中 ， 或 被 胃 酸 杀 灭 ， 或 很 快 进 入 肠 道 。 小 肠 中 菌 量 很 少 ，主 要 是 肠 球 菌 。 大 肠 因 含 有 已 被 消 化 的 食 物 残 渣 ， 具 有 适 宜 的 酸碱 度 和 温 度 ， 适 宜 于 细 菌 的 生 长 繁 殖 。 粪 便 中 细 菌 量 占 粪 重 量 的三 分 之 一 ， 且 微 生 物 种 类 很 多 。 少 数 健 康 人 肠 道 中 带 有 病 原 菌 ，如 痢 疾 杆 菌 ， 伤 寒 杆 菌 和 其 他 病 原 性 沙 门 氏 菌 。 这 些 带 菌 者 能 传染 他 人 。 故 带 菌 者 也 不 宜 进 洁 净 车 间 。 21 药 品 生 产 人 员 卫 生 注 意 事 项 新 进 人 员 的 健 康 检 查 ： 药 品 生 产 企 业 在 招 收 新 职 工 时 ， 一 定 要 对新 职 工 进 行 全 面 的 健 康 检 查 ， 要 确 保 新 进 厂 的 职 工 不 患 有 急 性 或慢 性 传 染 病 。 另 外 还 要 根 据 新 进 职 工 安 排 的 具 体 岗 位 性 质 再 确 定其 它 具 体 检 查 的 项 目 。 建 立 生 产 人 员 健 康 档 案 ： 药 品 生 产 企 业 应 对 职 工 建 立 个 人 健 康 档案 ， 以 便 于 检 查 、 了 解 、 追 踪 个 人 健 康 好 坏 的 状 况 22 1、 培 养 良 好 的 个 人 卫 生 习 惯 勤 洗 手 、 勤 剪 指 甲 定 期 洗 澡 、 勤 理 发 勤 换 衣 服 、 勤 洗 工 作 服 在 生 产 区 内 做 到 三 个 严 禁 ： 禁 止 吃 东 西 、 禁 止 吸 烟 、禁 止 大 声 喧 哗 23 2、 人 员 卫 生 净 化 要 求（ 1） . 鞋 的 净 化 ： 可 使 用 一 种 地 垫 ， 它 具 有 粘 性 表 面 ，能 杀 灭 细 菌 并 经 抗 静 电 剂 的 处 理 ， 可 除 去 人 员 脚 上 的尘 粒 。（ 2） . 工 作 服 的 净 化 ： 工 作 服 的 使 用 ， 可 沉 积 吸 附 大量 微 生 物 和 不 清 洁 物 ， 衣 服 本 身 也 会 散 发 纤 维 屑 ， 故应 经 常 清 洁 、 灭 菌 。（ 3） . 手 的 净 化 ： 手 是 交 叉 污 染 的 媒 介 ， 要 教 育 生 产人 员 警 惕 对 产 品 的 污 染 。 用 消 毒 皂 和 流 水 洗 。 24 （ 4） . 头 罩 ： 头 罩 必 须 把 全 部 毛 发 遮 住 。（ 5） . 口 罩 ： 常 用 的 口 罩 由 4 6层 纱 布 制 成 。 带 口 罩 一 定 要 遮 住 口 、鼻 ； 不 能 带 潮 湿 的 口 罩 ； 使 用 不 能 超 过 4h； 不 可 正 反 两 面 使 用 。 表 17 纱 布 阻 留 细 菌 的 效 率 （ 洗 涤 15次 ） 口 罩 结 构 阻 菌 率 （ ） 2层 74 3层 79 4层 88 5层 97 25 洁 净 区 工 作 人 员 要 尽 可 能 少 而 精 ， 只 有 工 作 需 要 时 才 能进 入 ； 操 作 人 员 在 洁 净 区 动 作 尽 量 要 缓 慢 ， 避 免 剧 烈 运 动 ， 以减 少 人 的 发 尘 量 ； 洁 净 区 的 门 应 关 紧 ， 避 免 不 必 要 的 移 动 ， 以 保 持 洁 净 区的 风 速 、 风 量 、 风 型 和 风 压 ； 如 果 是 无 菌 区 的 话 ， 操 作 人 员 的 自 我 约 束 就 更 多 ， 要 严格 按 无 菌 操 作 规 程 执 行 。 26 生 产 前 开 启 紫 外 灯 灭 菌 ； 生 产 结 束 后 岗 位 人 员 的 工 作 ： 彻 底 清 洁 生 产 现 场 和设 备 表 面 ； 生 产 结 束 后 灭 菌 人 员 的 工 作 ： 用 消 毒 剂 擦 拭 顶 （ 包括 高 效 送 风 口 ） 、 墙 壁 、 地 面 等 ， 并 开 启 紫 外 灯 ； 定 期 进 行 消 毒 ； 27 1、 所 有 进 入 洁 净 区 人 员 进 入 生 产 车 间 大 厅 ， 更 鞋 柜 前 更 换 洁 净 鞋 ， 后 坐 在 隔 离 鞋 柜 上 ， 脱下 一 般 鞋 放 入 鞋 柜 中 。 2、 进 入 一 更 后 脱 下 一 般 工 作 服 放 入 更 衣 柜 内 。 3、 用 流 动 纯 化 水 润 湿 双 手 ， 取 适 量 皂 液 双 手 揉 搓 直 至 产 生 很 多 泡 沫 ， 清 洁 每 一 手 指 和 手 指之 间 ， 除 去 手 掌 心 中 的 油 脂 ， 剔 除 指 甲 污 秽 ， 用 大 量 流 动 水 冲 尽 泡 沫 上 所 附 着 的 污 垢 ， 皮 屑和 细 菌 ， 仔 细 检 查 手 的 各 部 位 ， 并 烘 干 。 3、 进 入 二 更 各 人 按 编 号 取 出 自 己 的 洁 净 工 作 服 ， 按 从 上 到 下 的 顺 序 更 换 洁 净 服 ， 带 洁 净 帽 、口 罩 、 扣 好 领 口 ， 头 发 全 部 包 在 帽 子 里 面 不 得 外 露 ， 在 衣 镜 前 检 查 工 作 服 是 穿 戴 是 否 规 范 。 4、 消 毒 4.1在 双 手 表 面 ， 指 甲 缝 ， 手 指 尖 ， 手 臂 皮 肤 上 自 动 喷 淋 5-10ml消 毒 液 。 4.2掌 心 擦 掌 心 。 4.3手 指 交 换 掌 心 擦 掌 心 。 4.4手 指 交 错 掌 心 擦 手 背 。 4.5两 手 互 握 搓 指 脊 。 4.6指 尖 摩 擦 掌 心 。 4.7拇 指 在 掌 中 转 动 ， 直 至 药 液 均 匀 涂 抹 。 4.8手 干 燥 后 ， 通 过 缓 冲 间 进 入 洁 净 区 。 28