皮肤变态反应试验

皮肤变态反应试验皮肤变态反应试验2.3.6.1 目的 检测消毒剂重复接触后，实验动物产生皮肤变态反应的可能性及其强度。2.3.6.2 实验动物 选用皮肤完好的健康白色豚鼠，雌雄各半，体重 200g300g。2.3.6.3 试验分组 将豚鼠随机分为试验组、阴性对照组和阳性对照组，每组动物至少 16 只。2.3.6.4 操作程序 (1)对试验组豚鼠，给予受试物诱导和激发处理。阳性对照组给予阳性致敏物(如：2，4-二硝基氯苯)诱导和激发处理。阴性对照组仅给以受试物激发处理。(2)诱导处理浓度允许引起皮肤轻度刺激反应。激发浓度低于诱导浓度，不得引起原发性刺激反应。如果原液不引起皮肤刺激反应，诱导和激发均使用原液。(3)于试验前 24h 将豚鼠背部左侧 3cm3cm 范围内去毛。取诱导浓度的消毒剂溶液(或原液)0.5ml（g），直接涂在 2cm2cm 左侧去毛皮肤上或滴于同样大小的 2 层4 层纱布上，再将其敷贴在左侧去毛区。用一层无刺激塑料膜或油纸复盖，再以无刺激胶布固定，持续 6h。第 7d 和第 14d 以同样方法重复一次。(4)在末次诱导后 14d，将激发浓度的消毒剂溶液 0.5ml（g）直接涂在 2cm2cm 右侧脱毛皮肤上或滴于同样大小的 2 层4 层纱布上，敷贴于豚鼠背部右侧 3cm3cm 去毛区。然后，用一层塑料膜或油纸和无刺激胶布固定，6h 后将敷贴的受试物洗去。24h 和 48h 后观察皮肤反应，按表 2-17 对皮肤反应评分。(5)实验室开展皮肤变态反应试验初期，或使用新的动物种属或品系时，需同时设阳性对照组，阳性对照物可使用 2，4-二硝基氯代苯。为保证试验方法的可靠性，在进行该类试验时，每隔半年应使用阳性对照物检查一次。若检测报告中需用非本次阳性对照组的实验数据时，应注明其实验日期。阳性对照组的操作程序同试验组，以阳性致敏物替代受试物。(6)阴性对照组，仅对动物给予受试物的激发接触，每次试验必须设置。2.3.6.5 评价规定 化学物质引起的过敏性接触性皮炎，属迟发型变态反应。对于动物，仅见皮肤红斑和水肿。根据表 2-18 标准，将出现皮肤反应(评分1)的动物数除以该组实验动物数，求得致敏率(%)，按表 2-19 评定致敏强度。表2-18 皮肤反应的评分标准 皮肤反应 评分 A 红斑形成:无红斑 0 轻微红斑 1 中度红斑 2 严重红斑 3 水肿性红斑 4 B 水肿形成:无水肿 0 轻度水肿 1 中度水肿 2 严重水肿 3 表 2-19 致敏强度分级标准 致敏率(%)致敏强度 08 极轻度 928 轻度 2964 中度 6580 强度 81100 极强度 注：致敏率为 0%时，可判为未见皮肤变态反应。