铁皮石斛组织培养

Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,11/7/2009,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,Company Logo,*,铁皮石斛,组织培养,B1小组准备素材,第一页，共十五页。,铁皮石斛的组织培养,铁皮石斛，为兰科多年生附生草本植物。生于海拔达1600米的山地半阴湿的岩石上，喜温暖湿润气候和半阴半阳的环境，不耐寒。一般均能耐5的低温。石斛可分为黄草、金钗、马鞭等数十种，铁皮石斛为石斛之极品，它因表皮呈铁绿色而得名。,Company Logo,第二页，共十五页。,铁皮石斛的组织培养技术路线,外植体,丛生芽,培养基,生根发育,完整植株,Company Logo,第三页，共十五页。,蔗糖：30g,琼脂：6.8g,初代培养基的设计,诱导培养基,MS+BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L,+,蔗糖3%,+琼脂6.8,%,【,pH值5.,25.6】,MS母液： I-V50ml,5ml,5ml,5ml 5ml。,激素母液：BA10ml,NAA5ml,Company Logo,第四页，共十五页。,蔗糖：30g,琼脂：6.8g,土豆汁150ml,继代培养基的设计,增殖培养基,MS+BA0.5,ml,+NAA0.2+土豆汁10%20%,【,pH值5.,25.6】,取MS母液： IV50ml,5ml,5ml,5ml,5ml;,激素母液：BA5ml,NAA2ml,Company Logo,第五页，共十五页。,NAA,BA,IAA,增殖培养将建立的无菌系中的小苗转入增殖培养基中进行增殖培养。增殖培养基以MS为基本培养基，添加不同浓度的生长调节剂BA、NAA、IAA、IBA及土豆汁和香蕉汁等附加物,。,土豆汁,香蕉汁,IBA,Company Logo,第六页，共十五页。,蔗糖：30g,琼脂：6.8g,香蕉汁：200ml,活性炭：20g,生根培养基的设计,生根培养基,1/2MS+NAA0.20.5mg/L+香蕉汁20%+活性,炭2.0%【,pH值5.,25.6】,取MS母液： IV25ml,5ml,5ml,5ml,5ml;,激素母液：NAA25ml,Company Logo,第七页，共十五页。,Your Text here,生根培养将,丛生芽无菌操作切下单株,放在生根培养基中,于适宜条件下,培养，,约12周后即生根，,以长成完整植株,。,Company Logo,第八页，共十五页。,优选1,年生铁皮石斛植株,上,生长健壮的茎段,外植体的选择,接种小芽苗多易于在苗基部形成丛生芽,。,苗的高度为12cm时,丛生芽增殖倍数最高数,。,生长发育健壮苗优先,1,2,3,Company Logo,第九页，共十五页。,外,植,体的处理,Text 1,Text 2,Text 3,摘去叶片和膜质叶鞘，剪成约2cm长带节的小段,。,用洗洁剂清洗后置流水下冲2030,min。,在超净工作台上用75%的酒精消30s0.1%HgCl2灭菌5min后，用无菌水冲洗56次，放入垫有干无菌滤纸的培养皿中，以吸去多余水分，茎段两端各切0.20.3cm,。,Company Logo,第十页，共十五页。,接种实验,一、接种准备工作,1、超净工作台开紫外灯照射10-20min送风,2、外植体消毒（继代培养采用已建立的无菌培养物作为材料）,3、工具消毒,二、接种操作,1、用消毒工具、器皿，切取铁皮石斛幼茎段2cm,2、接种环烧红，沾一下培养基,3、镊取茎段插于培养基中,4、封口、标记,Company Logo,第十一页，共十五页。,各时期的培养条件,茎段的诱导时间在511天之间,培养温度2325，光照强度2000lx，光照时间10h/d,Company Logo,第十二页，共十五页。,参考文献,1,郑宽瑜,邓君浪,赵培快繁技术体系研究J.云南农业科技,2009,(S2):57-59,。,2,周根余,谢薇,程磊.影响铁皮石斛原球茎生长的若干因素J.江西科学,1999,17(4):231-235.,3,叶纪沟.铁皮石斛试管苗的人工栽培研究J.中国药业,2001,10(1):53,。,4,李铭宗.铁皮石斛的生物学特性和人工栽培J.福建热作科技,1999,24(1):29-31,。,5,张明,夏鸿西,朱利泉,等.石斛组织培养研究进展J.中国中药杂志,2000,25(6):323-326,。,Company Logo,第十三页，共十五页。,B1小组成员展示结束,Thank You !,第十四页，共十五页。,内容总结,铁皮石斛 组织培养。MS+BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖3%+琼脂6.8%【pH值5.25.6】。MS+BA0.5ml+NAA0.2+土豆汁10%20% 【pH值5.25.6】。1/2MS+NAA0.20.5mg/L+香蕉汁20%+活性炭2.0%【pH值5.25.6】。2、外植体消毒（继代培养采用已建立的无菌培养物作为材料）。1、用消毒工具、器皿，切取铁皮石斛幼茎段2cm,第十五页，共十五页。,