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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,临床检验标本采集规范,“,正确的临床医学检验始自正确的标本采取。临床医师、护师及检验技师都必须通晓其要领。”,著名的临床微生物检验专著,Manual of Clinical Microbiology,的主编,Patrick Murray,失误的不同分布,第一部分检验标本正确采集和运送的重要性,采集标本要选择最佳时间,采集标本要选择最具代表性,采集标本要最大满足要求,重视标本惟一性标志,临床检验血液标本原则上晨起空腹时采集,其结果准确可靠,因它避免了摄入成分和生理活动对检测指标的影响。比如需做血脂检查,在化验前,24h,要禁高脂饮食,,12h,禁流质。若要做大便隐血试验,则要在收集标本前,3,天禁动物血饮食。,特定时间采血因人体生物节律昼夜的周期变化,所以,24h,内不同时间所采集的标本其检测结果是不同的,如糖、激素及药物疗效监测等。尿常规采集晨尿,由于肾脏浓缩功能,易发现病理成分,.,采集标本要选择最佳时间,急诊检验采血不受时间的限制,但在检验单上应注明采血时间和急诊字样,以便临床医生根据其特殊性综合分析检验报告。受饮食影响较少的检验项目,如某些抗原、抗体的检测,某些酶类、尿素、肌酐、胆固醇测定等,也不受时间限制。,细菌培养应尽量争取在抗生素使用前采集标本;,临床上疑为败血症、脓毒血症或其他血液感染的患者,需做血液细菌培养,采血宜在患者发冷、发热期间,越早越好,最好在抗菌治疗前,以正在发冷、发热时或发冷、发热,前半小时,为宜。,。,采集标本要选择最具代表性,由于患者标本采集不当,常导致阳性率降低,因此标本的采集应具有代表性,比如大便标本应采取新鲜标本,且选取异常成分的粪便,如含有黏液、脓、血等病变成分的标本取,3,5g,送检,;,应避免混有尿液、消毒剂及污水等杂物。如痰液也要求新鲜,一般检查以清晨第,1,口痰作标本最适宜,做细胞学检查则以上午,9,:,00,10,:,00,留痰为好。骨髓穿刺、脑脊液穿刺应防止外伤性血液的渗入,还应避免凝固。血标本采集时患者应采取坐位或仰卧位,还应防止压脉带时间过长等。,采集标本要最大满足要求,抗凝剂、防腐剂的正确应用:临床上很多检验项目涉及到抗凝剂、防腐剂的应用,如血沉检查,但由于抗凝剂比例不当造成血沉减慢的现象也常发生。,容器清洁度或无菌程度:如,24,小时或,12,小时尿中某成分分析需加防腐剂,而细菌培养的容器绝对不能有防腐剂;微量元素测定对容器洁净度的要求远远高于其他检测。因此标本容器必须干燥、清洁、无污染物、无渗漏。,防溶血、防血脂、防污染:溶血标本引起的血细胞计数、血细胞比容、电解质离子及一些酶类、尿素、肌酐、尿酸、血糖等项目的变化临床上经常碰到。脂血标本、被污染标本引起对实验吸光度的干扰,这些都应引起重视。,采集标本运送应注意一些问题:首先标本要专人输送,除门诊患者自行采集的某些标本允许患者自行送外,其他情况原则上一律专人运送。其次送检标本保证安全,防止过度震荡,防止容器破损,防止污染,水分蒸发等。最后保证运送及时性,标本采集后立即送检,标本在室温放置时间直接影响检测结果的真实性。,防止过失采集:不可利用输液、输血通道采集血液标本。除急诊抢救外应尽量避免在输液、输血的同时采集标本;如确需抽血要在另一侧肢体抽取。一般要求在输液、输血前或后,1,小时采集血液标本。,重视标本惟一性标志,标本采集容器标签上应注明送检科别,床号,患者姓名,与检验单上应相对应,防止张冠李戴。化验单上住院号,项目也应明确,.,总之,规范实验室标本采集和运送至关重要,除以上涉及到的诸多因素外,还有许多能影响体液成分或干扰测定,如患者年龄、性别、情绪、饮食、运动和药物等的影响,因此在标本采集前应尽可能排除这些因素的干扰,获取准确的检验结果,为临床提供科学可靠的诊断依据。,第二部分,各种临床检验标本的正确采集方法,检验标本的采集是保证检验结果准确的前提。因此,要求各临床科室医护人员、送检者及相关人员认真、严格的按照检验标本的采集方法操作取材。,血液常规检查标本,1.,静脉血采集,静脉血标本采集前病人应注意的问题,:,1,)避免剧烈运动,一般主张抽血前,24h,内不做剧烈运动,清晨取血,住院病人可在起床前采血,匆忙赶到门诊的人应至少休息,15,分钟后采血。,)注意合理饮食。除了急诊或其它特殊原因外,一般主张在禁食,12h,后空腹取血,延长空腹时间,(,饥饿,),或餐后血液的化学成分都会引起变化,饮酒实验亦有影响。,)药物的影响:很多的药物进入人体后可影响某些化验项目的结果,病人在化验前应尽可能停服对实验有干扰的药物。,静脉采血时护士应注意的问题 :,)采用一次性真空采血管,多项化验采血顺序应是:,血培养,无添加剂管,有,添加剂管,管,。血常规、血凝、血沉抽血量务必准确抽取规定的量,并轻轻颠倒混匀。,)采血时的体位建议以坐位,5,分钟后取血为宜,止血带使用应少于,1,分钟,以免引起血液淤滞,造成血管内溶血或血液某些成分改变。,)当一侧手臂输液时应从对侧手臂取血,以免影响血糖、血钾等的浓度。,)血标本应防止溶血,影响溶血的因素有:用止血带时间过长;抗凝管使用不当或抗凝混合时过度振荡;容器污染;血液中泡沫注入试管;标本放置时间长或突然冷却和受热;离心力过大等。,)正确使用抗凝剂。,(一)血常规检验标本,一般用,EDTA-2K(EDTA-K22H2O) 1.5,2.2mg/ml,抗凝,(,EDTA,抗凝管,紫色帽 ),采血。,采血注意事项:,.,应按抗凝管刻度准确采静脉血,1.5-,ml,,不能超过,2ml,。,.,采血后立即轻轻颠倒混匀(,5-8,次,不可用强力震荡,以免造成溶血。); ,.,采血后应尽快送检(为保证结果准确需显微镜观察形态的标本采血后应及时推片固定,因为超过,2h WBC,形态会发生改变)。,(,二)凝血检测(,PT,、,APTT,、,TT,、,FBG,)标本,静脉采集抗凝血(最好真空负压系统采血),抗凝剂用,枸橼酸钠(,109mmol/L,,即,32.06g/L,抗凝剂,:,全血,= 0.2,:,1.8,),抗凝血,(枸橼酸钠抗凝管、蓝绿色帽),。,采血注意事项:,1.,空腹采静脉血(餐后脂血影响检测结果,使因子,活化,导致,PT,延长);,2.,采血时患者应保持平静状态,30min,以上(剧烈活动可使因子,活化,,APTT,明显缩短);,3.,应单独,1,管血,必须准确采血至刻度线,2ml,;,4.,采血后应立即上下颠倒混匀,5-10,次,不可有凝块;,5.,采血后应尽快送检(必须,2h,内检测)。,(三)血型与血交叉标本,用,EDTA-2K(EDTA-K2,2H2O)1.5-2.2mg/ml,抗凝,(,EDTA,抗凝管、紫色帽),采血,.,采血注意事项:,1.,按抗凝管刻度准确采静脉血,采血量分别为,1.5ml-2ml,;,2.,采血后立即上下颠倒混匀(,5,10,次),不可有凝块,且不可用强力振荡,以免造成溶血。,3.,最好血型与血交叉各采,1,管血,便于标本保存。,(四)红细胞沉降率(血沉,,ESR,)检验标本,静脉采集,枸橼酸钠(,109mmol/L,,即,32.06g/L,)抗凝血,(枸橼酸钠抗凝管采血,黑色帽 )。,注意事项:,1.,单独采,1,管血,按抗凝管刻度,准确采血至,2ml,(抗凝剂:全血,= 0.4,:,1.6,);,2.,采血后立即上下颠倒混合,5-10,次,不可用强力振荡,;,3.,采血后应尽快送检(为保证结果准确,必须,2h,内检测)。,(五)临床生化检验标本,临床生化检验多用非抗凝血标本,应使用,真空负压采血管,。临床生化检验血标本采集主要注意事项是:,1.,多项化学检测一般可采,1,管血;,2.,采血量视检查项目多少不同而异,单管通常为,4.0,5.0ml,;,3.,如果生化和免疫单独有申请单,应该分开采血;,4.,多项检测同时采血时应按下列顺序采血:血培养;无添加剂管;凝血管;有添加剂管的顺序为:,a,橼酸盐管;,b,肝素管;,c,EDTA,管。,试管分类,抗凝剂类型,采血至管子刻度,检查项目,蓝绿色,3.8,枸橼酸钠,2ml,凝血检查,紫色,EDTAK2,1.5-2ml,血常规、血型,绿色,肝素锂,4ml,血液流变学,附,:,真空采血管采集血液标本一览表,黑色,3.8,枸橼酸钠,2ml,血沉,红色,无抗凝剂,3-5ml,生化免疫类、,PCR,定量等,尿液常规检查标本,.,尿液常规检查标本应按以下原则进行采集:,(,1,)新鲜晨尿最佳,门诊病人亦可留随机尿;,(,2,)尿液采集于干净带盖容器中,不可使用未经洗涤的装药物或试剂的器皿;,(,3,)避免混有经血、白带、精液和粪便;,(,4,)尿液成分定量检查应留取,24h,防腐混合尿,100,200ml,(须记取,24h,尿液总量);,.,尿液常规检查标本采集方法:,()晨尿最好(安静状态下留取清晨第一次尿,浓缩,无其他影响);()随机尿较常用(随时留尿,适用于门诊和急诊病人,结果易受多种因素影响);()清洁尿(中段尿、导管尿、膀胱穿刺尿,用于病原微生物学培养、鉴定和药敏);(),24h,尿(用于尿液成分,24h,定量检查分析,一定要教会病人留取,24h,尿正确方法)。()、等计时尿和餐后尿等特殊实验尿,则应按医嘱要求进行留尿。,粪便常规检查标本,1.,一般应为新鲜的自然排出的粪便,必要时可肛拭子采取;,2.,送检粪便应盛于洁净带盖的塑料盒中送检,要做好标记;,3.,要选取粪便的脓、血、黏液等异常成分进行检查;,4.,检查蛲虫卵需用透明塑料薄膜于半夜,12pm,或早晨排便前,于肛门周围皱襞处拭取标本,并立即送检;,5.,做便隐血试验时,应嘱病人检查前,3d,内禁食肉类、含动物血的食物及某些蔬菜,禁服铁剂和维生素,C,等对实验有干扰作用的药物。,5.,检查血吸虫卵时应取黏液、脓、血部分,如须孵化毛蚴应留取不少于,30g,的粪便,并尽快送检,必要时留取整份粪便送检。,6.,检查痢疾阿米巴滋养体时,应床边留取新排出的粪便,从脓血和稀软部分取材,并立即保温送实验室,并且实验室接受标本后应立即进行检查。,其它体液常规检查标本,浆膜腔积液检查标本,(,1,)浆膜腔积液标本一般由医生无菌穿刺采取;,(,2,)送检标本量:理学检查、化学检查、细胞学检查各留取,ml,;细菌学检查用无菌管采集标本,厌氧菌培养留取,ml,,结核菌检查留取,ml,。,(,3,)标本采集后必须立即送检(否则可出现细胞变性,标本凝集,细菌溶解);,(,4,)用于细胞学检查时,可在标本中加适量,EDTA,盐抗凝,但还须留取管不加抗凝剂的标本用于观察积液的凝固性;化学检查标本宜用肝素抗凝。,微生物学检验标本,微生物学检验标本的正确采集,运送及处理,与细菌的培养,鉴定结果有十分密切的关系;医生,护士,检验人员均应重视微生物学检验标本正确采集的有关问题,,并有责任向患者及其家属进行正确采集标本的宣传和指导,。,标本收集部位,非无菌部位 无菌部位,眼 血液,耳 脊髓液,呼吸道 胸膜液,消化道 腹膜液,泌尿道 关节液,皮肤,毛发,无临床意义的标本,在有正常菌群出现的感染部位(皮肤、粘膜、消化道和上呼吸道),可能会出现正常菌群过杂、过度生长,掩盖真正的病原菌,这类标本建议临床重取替代标本或说明不处理的原因。,标本类型,替代标本及建议,烧伤或伤口拭子,可重取组织或抽取物,牙周损伤拭子或直肠周围拭子,可重取组织或抽取物,溃疡拭子或坏疽损伤拭子,可重取组织或抽取物,压疮拭子,可重取组织或抽取物,新生儿的胃抽取物,不处理,呕吐物或恶露,不处理,结肠造口术排出物,不处理,1,微生物学检验标本采集、运送、验收和处理注意事项 (,1,)标本采集,1,)申请单标记必须清楚(,姓名、性别、年龄、病例号、临床诊断、标本来源、采集时间、检查项目、抗生素应用情况等,),以便实验室能够合理选择培养环境和培养基;,2,)尽量在抗生素应用前采集标本,以避免漏检和提高阳性检出率;,3,)标本采集应严格执行无菌操作;,4,)咽拭、肛拭、伤口拭子等拭子标本,应加入适量生理盐水保湿送检;,5,)痰、尿液、伤口拭子等混有正常菌群的标本,采集后应立即送检;,6,)采集标本的容器必须是,无菌培养杯,。,(,2,)标本运送,1,)标本采集后应尽快送到微生物实验室;,2,)标本采集后在室温下超过,2h,未送达实验室,可视为不合格标本。(,3,)标本验收,1,)实验室只能接受和处理合格标本;,2,)实验室对不合格标本退回必须说明原因,并应及时与临床联系。,2,微生物学检验标本采集和处理(,1,)尿液标本采集和处理,通常留取晨起第一次尿液(此时尿液在膀胱内储存,4h,以上);尿液采集后要及时送检,并保证,2h,内接种;尿液微生物学检验标本采集方法如下。,;,1,)中段尿采集法:成年男性和女性分别用肥皂水清洗尿道口和外阴部,再用灭菌水冲洗尿道口,然后排尿弃去前段尿液,于带盖的无菌容器中留取中段尿液,5,10ml,2,)导尿法:用导尿管导取,10,15ml,尿液,置灭菌容器中送检;长期留置导尿管者应更换新导尿管留尿;留置导尿时,用无菌消毒法消毒导尿管外部及导尿管口,用无菌注射器通过导尿管抽取尿液送检(不可采集尿液收集袋中的尿液送检);,3,)集尿法:怀疑结核分枝杆菌感染时,于清洁盛器中留取,24h,尿液,取其沉渣,10,15ml,送检;,4,)耻骨上膀胱穿刺法:培养结果与临床病情矛盾时可采用此法,一般较少应用;,5,)肾盂尿采集法:必须由临床医生采集。,(,2,)粪便标本采集和处理,1,)采集时间:,腹泻患者于急性期,尽量在用药前采集粪便;,伤寒患者于发病,2,天以后采集粪便;,怀疑霍乱时立即采集粪便送检。,2),采集方法:,自然排便:取新鲜粪便的黏液、脓血、或絮状物等有意义成分,,2-3g,或,1-2ml,,盛无菌容器内或置于保存液或增菌液内送检;,直肠拭子:用于难以获得粪便或排便困难的患者和婴幼儿,标本采集后插入灭菌试管内送检。,(,3,)痰及下呼吸道标本采集和处理,1,),自然咳痰法:,晨痰为佳;,先冷开水漱口清洁口腔和牙齿;,再用力咳出呼吸道深部的痰;,痰量不得少于,1ml,;, 痰咳出困难时可先雾化吸入,NaCl,溶液(,100g/L,,加温到,45,)使痰容易咳出。,2,)小儿取痰法:用弯压舌板向后压舌,将拭子深入咽部,小儿因压舌板刺激引起咳嗽,喷出的肺或气管分泌物粘在拭子上可送检。,3,)支气管镜、支气管穿刺、支气管肺胞灌洗等采集法:此采集方法必须由医生操作。,(,4,)血液及骨髓培养标本,采血时机,:,在患者寒战时,发热高峰前采集,最好在抗菌治疗前。此时阳性率高。,1),抗生素治疗前,严格无菌静脉采血,5,10ml,(儿童,1,4ml,);,2,)无菌注入专用培养瓶(成人、儿童、需氧菌、厌氧菌)中送检;,3,)如已用抗生素不能停用时,可于,48h,内分别于下次用抗生素之前,采取,6,份血液标本送检;,4,)必要时可需氧菌、厌氧菌(占,10%,)和,L,型菌同时培养;,5,)疑为心内膜炎时,为提高阳性检出率,可酌情不同部位、不同时间,多次采血或动脉采血进行培养;,6,)必要时可取骨髓,1,2ml,,无菌注入专用培养瓶中送检,( 5,)脑脊液培养标本,1),采集时间:怀疑脑膜炎时应立即采集脑脊液,最是在应用抗生素之前采集脑脊液。,2),采集方法:无菌腰穿采集脑脊液,3,5ml,,分装到,3,个无菌小瓶中(各,1,2ml,)。用于细菌和病毒检测时脑脊液量不少于,1ml,;用于真菌和抗酸杆菌检测脑脊液量不少于,2ml,。,(,6,)穿刺液培养标本,1),采集时间:一般在用抗生素等抗菌药物治疗之前,或在停止使用抗菌药物之后,2-3d,采集标本。,2),采集方法:,无菌操作穿刺抽取标本或外科手术采集标本;,标本采集量应,1ml,(结核分支杆菌培养时应为,1,5ml,);,标本采集后注入无菌小瓶或无菌试管中送检;,可在容器中先加入灭菌肝素然后再加入穿刺液,以防止穿刺液凝固(,0.5ml,肝素可抗凝,5ml,标本),(,7,)胃液及胆汁培养标本,抽取空腹胃液,5ml,,置无菌管内送检;胆汁培养标本由十二指肠引流法或胆囊穿刺法或手术中留取胆汁,采集胆汁量为,5ml,,置无菌管内送检;胃液和胆汁采集后必须立即送检。,(,8,)脓汁和病灶分泌物培养标本采集前局部消毒,然后无菌采取脓汁或病灶分泌物或组织。标本采集后立即置无菌管内送检。,封闭性脓肿,:,在病灶局部外表消毒后,以,无菌注射器抽取脓液,5-10ml,置无菌试管中送检。若怀疑,厌氧菌感染时,抽取脓液后,立即排尽注射器内的空气,,刺入无菌橡皮塞中送检。,开放性脓肿,:,先消毒病灶周围,用无菌生,理盐水擦去表 面渗出物,然后用无菌棉签采取病灶深部脓液及分泌物,置无菌试管中送检。,(,9,)眼,.,耳,.,鼻,.,咽拭子培养标本用拭子常规采集各种标本。标本采集过程中应注意避免被黏膜上的正常菌群污染,标本采集后连同拭子一起置无菌管内送检。,(,10,)泌尿生殖道培养标本,1,)尿道分泌物:清洗尿道口采取尿道口溢出的脓性等分泌物,或用无菌拭子插入尿道,2,4cm,处轻轻转动后取出,置无菌试管中送检。,2,)阴道、宫颈分泌物:通过阴道扩张器,用灭菌拭子采取阴道口或宫颈管,1,2cm,处分泌物,置无菌试管中送检。,3,)前列腺液:清洗尿道口冲洗膀胱后用前列腺按摩法采取前列腺液送检。,4,)精液:受检者应,5d,未排精,清洗尿道口后手淫或体外排精法,射精于无菌容器内送检。,5,)溃疡分泌物:灭菌生理盐水溶液清洗患处,用无菌拭子取其边缘或基底部的分泌物,置无菌试管中送检。,( 11,)烧伤感染培养标本,烧伤,12h,后用无菌棉拭子无菌操做采集标本;要注意从多个创面取样;烧伤严重感染时易发生败血症,创面取样的同时应该采集血样送做血培养(最好同时做需氧菌培养和厌氧菌培养)。(,12,)厌氧菌感染培养标本,1,)标本采集,要注意避免标本污染和与空气接触,严格遵守无菌操作;,用注射器抽取胸水、腹水、心包液、关节液、胆汁、脑脊液或无菌手术抽出脓液;,抽出液体标本后,要尽快排除注射器内的空气。,2,)标本运送,标本采集后不得冰箱储存,必须尽快(半小时内)送实验室;,运送方法:,a,注射器运送 (标本抽取后尽快排除空气)或接种到专门的运送培养基中直接运送;,b,含运送培养基的无氧小瓶运送;,c,厌氧罐运送(组织块);,d,大量液体标本运送时要装满标本瓶并立即驱氧,加盖运送;,e,一般不采用棉拭子法。,( 13,)真菌感染培养标本,1,)浅部真菌感染标本采集,皮肤:常规消毒皮肤,从皮肤癣菌皮损边缘刮取鳞屑,置无菌平皿内送检;皮肤溃疡则采集病损边缘脓汁或组织;,指(趾)指甲:消毒指(趾)指甲并去掉其表面部分,取可疑病变部分,用刀片修成小薄片,5,6,片,置无菌容器内送检;,毛发:采集根部断折处,至少,5,6,根送检。,2,)深部真菌感染标本采集,血液:无菌采血,8,10ml,,注入未用过抗生素的或可中和抗生素的血培养瓶中,立刻送检;如不能立刻送检时血培养瓶应放室温,但不可超过,8,9h,;,脑脊液:采样量不少于,3,5ml,,分别注入两支无菌试管中送检(一管做真菌培养和墨汁染色;一管测隐球菌抗原和其他培养);呼吸道及泌尿生殖道深部真菌感染标本采集同一般菌培养标本。,标本采集常见的注意事项,棉花纤维,+,竹,/,木条,抑菌区是因为:,植物分泌出来的:, 脂肪酸;, 树脂;, 福尔马林,xjfeng3630,
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