基因工程药物——促红细胞生成素课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,基因工程药物,促红细胞生成素,(EPO),基因工程药物,1,EPO,的概念,EPO的用途EPo的纯化历EPO的销售情,及其疗效史及工艺流程情况及其前景,EPO,2,什么是EPO?,EPO:是促红细胞生成素(Erythropoietin)的英,文简称,e促红细胞生成素:最初是从肾脏中分离出来能刺激,前体红细胞增生、分化的一种细胞因子。,e人体血液中的促红细胞生成素:是由肾脏和肝脏分,泌的一种激素样物质,能够促进红细胞生成。它与,其受体(EPOR结合后共同介导缺氧的生理反应,什么是EPO?,3,EPo的用途,e医疗用途:增加红血球的数目,用于贫血、,组织断离、早产儿,用在癌学和血液学方面,ca体育用途(兴奋剂):增加训练耐力和训练负,荷,属于国际奥委会规定的违禁药物。在,2019年北京奥运会中第一例的兴奋剂。,EPo的用途,4,EPO的疗效,31、肾性贫血患者EPO水平较低,在进行治疗过程,中,往往通过注射EPO来提高体内EPO水平进行治,疗,从而帮助病人增加红细胞数量,此时EPO水平,有所上升。,32、其他贫血如缺铁性贫血、巨细胞性贫血患者,EPO水平不降低,但也可以使用EPO治疗,此时浓,度也会有所升高,33、再生障碍性贫血和骨髓造血功能不全患者EPo,水平升高。,EPO的疗效,5,EPo的纯化历史,1、Miyake的七步法:纯化步骤太多,对设备及操,作要求也较高,不适合工业生产的特点。,2、Spivak利用凝集素亲和层析纯化EPO:由于凝,集素亲和层析凝胶易被杂蛋白不可逆吸附,使得分,离效果降低,成本增高,也不利于大规模生产。,3、近年来则利用三步层析法三步纯化基本流程,等,EPo的纯化历史,6,EPO的工艺流程,三步层析法,1、染料配基亲和层析反相疏水层析离,子交换层析;,2、染料配基亲和层析反相疏水层析分,子筛层析,3、反相疏水层析离子交换层析分子筛,层析。,EPO的工艺流程,7,EPO的工艺流程,三步纯化基本流程,第一步:反相柱色谱样品浓缩约967%,透析,第二步:DEAE离子交换色谱,第三步:分子筛色谱,总回收率30%,比活1510U/g蛋白,EPO的工艺流程,8,第一步:反相色谱,C6反相柱(2cm*2cm)(创新生物技术,公司),令流程:,上样50mmin(柱结合量约5mg蛋白/m介质),去离子水平衡至检测基线,10%80%乙醇胍线性梯度洗脱,检测并收集含EPO主峰,ELSA测定,令结果:60%乙醇-1moL盐酸胍洗出EPo,第一步:反相色谱,9,透析,令透析液:10倍体积的10 mmol/L TrisHCl,(pH75-2%蔗糖缓冲液,透析次数:2,令时间:56h,透析,10,基因工程药物促红细胞生成素课件,11,基因工程药物促红细胞生成素课件,12,基因工程药物促红细胞生成素课件,13,基因工程药物促红细胞生成素课件,14,基因工程药物促红细胞生成素课件,15,基因工程药物促红细胞生成素课件,16,基因工程药物促红细胞生成素课件,17,