生物碱类课件

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生物碱类药物的分析,这章很复杂,概述,一、特点,1含氮有机化合物,2没有共同母核,3多数具有含氮杂环结构，少数氮在侧链上如麻黄碱,4. 绝大局部存在于植物体内；少数存在于动物体内如蟾蜍碱,5.生理活性强,第一节 药物结构和性质,生物碱是广泛存在于生物有机体中的一类含氮的有机化合物，大局部显碱性，故称生物碱。自19世纪初从阿片中别离出第一个生物碱吗啡以来，迄今已从自然界分出10000多种生物碱，其中近百种具有特殊而显著的疗效，已广泛用于临床。由于生物碱大多具有毒性，因此必须严格控制其质量，谨慎应用。,分类,A.,苯烃胺类,B.,托烷类,(,莨菪烷类,),C.,喹啉类,D.,异喹啉类,E.,吲哚类,F.,黄嘌呤类,第一节 典型药物的根本结构与性质,一、根本结构和分类,一苯烃胺类,本类药物的结构特征为N在侧链上，为脂肪胺。,代表药物：盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱。,盐酸麻黄碱,盐酸伪麻黄碱,性质：,1.,碱性较强，与酸易成盐；,2.,手性特征；,3.,氨基醇结构；,4.,紫外吸收；,左旋,右旋,二、托烷类,莨菪醇和莨菪酸缩合而成的脂类化合物,代表药物：硫酸阿托品、氢溴酸东莨菪碱,公元前4世纪的泰奥弗拉斯记述了曼陀罗可以治疗伤口、痛风、失眠，当时人们还迷信地认为它是个有魔力“爱情药水，而其中就有阿托品的成分。埃及的一种植物天仙子提取物中也含有阿托品。让凯撒、安东尼拜倒的埃极艳后克里奥佩拉，就用它来滴眼，使她的眼睛更诱人。公元1世纪的迪斯科瑞德斯发现曼陀罗的葡萄酒有麻醉作用，可用于治疗疼痛或失眠，及手术前处理或烧灼。这些含有阿托品的提取物再结合使用鸦片用来治疗疾病的方法风行整个古代西方医学世界。德国化学家Runge (17951867)首先研究了阿托品散瞳的效应。1831年，药剂师Mein成功从植物中得到阿托品纯结晶。而首次合成阿托品是1901年由德国化学家理查德威斯塔特Richard Willst 因研究植物色素于1915年获得诺贝尔奖完成的。他首先合成托品酮，然后再合成阿托品硫酸盐。但他的合成工艺收率较低，只有0.75。1917年，英国化学家鲁宾逊因研究植物染料和生物碱于1947年获得诺贝尔奖创造了简单的托品酮合成法,产率到达17。,硫酸阿托品,氢溴酸东莨菪碱,性质：,1.,碱性较强，与酸易成盐；,2.,手性特征，阿托品为外消旋体,三、 喹啉类,苯并吡啶的衍生物N在位,代表药物如硫酸奎宁、硫酸奎尼丁,西班牙传教士发现美洲土著人使用一种树皮作为药材治疗热病，于是把它带回了欧洲。因这种新药治好了伯爵夫人Chinchn的病，于是就被命名为Cinchona，中文译名金鸡纳。金鸡纳中的有效物质就是奎宁。1850年后，这种预防疟疾的方法在西方开始流行。有了金鸡纳，欧洲探险家和劫掠者才能平安地深入非洲大陆。奎宁于1820年被法国研究者成功别离。但它的合成太难了，所以使用的绝大多数奎宁都是提取的。随着原料树木过度砍伐，金鸡纳树越来越少，而防疟又是如此重要，秘鲁等金鸡纳树的产地开始限制出口，并严禁树种、树苗外运。荷兰人通过偷运树种，在爪哇等殖民地种植了大量金鸡纳树，最终占到世界奎宁供给的97%份额。二战中，德国占领了荷兰，日本也占领了东南亚，结果盟军得不到奎宁供给，在非洲和南太平洋作战的士兵大量感染疟疾，上万人因此丧生。,硫酸奎宁,硫酸奎尼丁,性质：,1.,两份子药物与一份子二元酸成盐,2.,手性特征；,左旋,右旋,四、异喹啉类,苯并吡啶的衍生物N在位,代表性药物如盐酸吗啡、磷酸可待因、盐酸小檗碱,盐酸吗啡,磷酸可待因,性质：,1.,盐酸吗啡具有两性，碱性较强,五、 吲哚类,本类药物的结构特征为苯并吡咯,代表药物如硝酸士的宁、利血平等,硝酸士的宁,利血平,性质：,1.N1,碱性较强；,2.,利血平以游离状态存在；,1,1,2,2,六、黄嘌呤类,咪唑和嘧啶并合的双杂环化合物。,代表药物如咖啡因、茶碱,咖啡因,茶碱,性质：,1.,以游离碱存在；,显酸性,四个氮原子受邻位羰基影响，几乎不显碱性,1.,碱性,*,季铵碱脂肪胺、脂环胺芳胺、,N,芳杂环酰胺,麻黄碱、阿托品罂粟碱咖啡因,吗啡具酸碱两性,生物碱多以有机酸盐或无机酸盐的形式存在；极少数碱性弱者以游离状态存在；某些生物碱可与糖结合以苷的形式存在。,二、生物碱的通性：,2.,旋光性,一般多为左旋体有效。,3.,溶解性,游离生物碱不溶或难溶于水，能溶或易溶于有机溶剂，在稀酸中成盐而溶解。生物碱盐类易溶于水，不溶于有机溶剂 。,多数生物碱呈结晶型固体或非晶型粉末，无色或白色。多具有确定的熔点，少数具有升华性，,4.,紫外吸收：多含不饱和双键。,5.与生物碱沉淀试剂和显色试剂反响,典型药物,N,原子状态,碱性,苯胺类,盐酸麻黄碱,盐酸伪麻黄碱,脂肪仲胺,N,较强（秋水仙碱除外）,托烷类,硫酸阿托品,氢溴酸东莨菪碱,脂环叔胺,N,较强,喹啉类,硫酸奎宁,硫酸奎尼丁,喹啉,N,喹核脂环,N,弱,较强,异喹啉类,盐酸吗啡,磷酸可待因,脂环叔胺,N,较强，酸碱两性,（磷酸可待因没有）,吲哚类,硝酸士的宁,利血平,吲哚,N,脂环叔胺,N,弱,较强,黄嘌呤类,咖啡因,茶碱,嘌呤,N,（邻位有羰基）,极弱,生物碱碱性比较,第二节 鉴别试验,一、性状检查,一外观：形态、色泽、臭味,二溶解度,二物理常数,1.熔点,?中国药典?2021对磷酸可待因的鉴别：取本品约0.2g，加水4ml溶解后，在不断搅拌下滴加20氢氧化钠溶液至出现白色沉淀，用玻璃棒摩擦器壁使沉淀完全，滤过；沉淀用水洗净，在105枯燥1小时，依法测定，熔点为154158。有时常制备药物衍生物作为鉴别对象。,2.比旋度,例：硫酸奎宁，硫酸奎尼丁,3.吸收系数,二、鉴别,一显色反响,大多数生物碱可与生物碱显色试剂反响产生不同的颜色，可作鉴别。,常用的显色试剂有浓硫酸、浓硝酸、钼硫酸、硒硫酸、甲醛硫酸和溴水等。,如?中国药典?2021对硫酸奎宁的鉴别：取本品约20mg，加水20mL溶解后，分取溶液5mL，加溴试液3滴与氨试液1mL，即显翠绿色。,二沉淀反响,生物碱类药物在酸性水溶液中常可与生物碱沉淀试剂反响生成难溶性盐、复盐或配合物而沉淀，可作鉴别。,常用的生物碱沉淀试剂为：,1. 重金属盐类，如K2HgI4、KBiI4、I2KI、二氯化汞等；,2. 大分子酸类，如磷钼酸、硅钨酸等。,4紫外吸收光谱法,生物碱类药物分子结构中大多含有能产生紫外吸收的芳环或双键结构，因此在其紫外吸收光谱中常有一个或几个特征吸收峰，可对这些化合物进行鉴别。,如?中国药典?2021对秋水仙碱的鉴别：取本品，用乙醇稀释制成每1ml中含10g的溶液，照紫外-可见分光光度法 (附录 A)，在243nm与350nm的波长处测定吸光度，243nm波长处的吸光度与350nm波长处的吸光度的比值应为1.71.9。,5红外吸收光谱法 红外吸收光谱较紫外吸收光谱丰富，能反映分子结构的细微特征，准确度高，专属性强。?中国药典?2021中收载的利用该法进行鉴别的生物碱有茶碱、氨茶碱、吗啡、阿托品、秋水仙碱等。,6薄层色谱法 薄层色谱法是药物鉴别常用的分析方法，各国药典采用薄层色谱法鉴别生物碱类药物的品种正逐步增加。,注意：硅胶是弱酸性吸附剂，对碱性化合物以及极性较大的化台物吸附力强，易造成严重的脱尾现象。应用本法进行鉴别时，生物碱应保持游离状态，同时加碱中和硅胶外表的弱酸性，以克服色斑拖尾现象。如USP31对硫酸阿托品注射液的鉴别即采用硅胶薄层板色谱法。,1. 双缩脲反响 芳环侧链氨基醇结构的特征反响,盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱,蓝紫色,三特征鉴别试验,根本原理为盐酸麻黄碱所含仲胺基与Cu2+形成含不同结晶水的紫堇色配位化合物，无水配位化合物及含有2分子结晶水的配合物均易溶于乙醚显紫红色，具有4分子结晶水的配合物那么易溶于水显蓝色。,2维他立(Vitaili)反响,莨菪酸结构的托烷类生物碱的特征反响,硫酸阿托品，氢溴酸东莨菪碱,硫酸阿托品,加发烟硝酸,5,滴,水浴蒸干,放冷,加乙醇,2,3,滴润湿,加固体,KOH,一粒,显深紫色,供试品与发烟硝酸共热，生成黄色三硝基或二硝基衍生物，冷却至室温后，遇醇制氢氧化钾即生成深紫色的醌型化合物。,3绿奎宁反响,C,6,位含氧喹啉类生物碱,在此生物碱的微酸水溶液中，加微过量溴水或者氯水，再加氨溶液，应呈翠绿色。,硫酸奎宁,溴水或者氯水,氨试液,翠绿色,4甲醛硫酸Marquis反响,该反响为含酚羟基异喹啉类生物碱的特征反响，如吗啡、乙基吗啡、可待因等。此类生物碱遇甲醛硫酸能形成含醌式结构的有色化合物。,如?中国药典?2021对盐酸吗啡的鉴别：取本品约1mg，加甲醛硫酸试液1滴，即显紫色。,5紫脲酸铵反响,黄嘌呤类生物碱,二、特殊鉴别试验,6官能团反响,该反响为吲哚类生物碱的特征反响。,与香草醛反响 利血平与新制香草醛试液反响，显玫瑰红色。,与对二甲氨基苯甲醛反响 取利血平约0.5mg，加对二甲氨基苯甲醛5mg，冰醋酸0.2mL与硫酸0.2mL，混匀即显绿色，再加冰醋酸1mL，变为红色。,7复原反响,吗啡分子中含有酚羟基，具弱复原性。向吗啡水,溶液中参加稀铁氰化钾试液，吗啡将与铁氰化钾,发生氧化复原反响，铁氰化钾被复原为亚铁氰化,钾，与试液中的三氯化铁反响生成普鲁士兰。,三、仪器分析鉴别法,一UV,二IR,三色谱,第九章 生物碱类药物的分析,第一节 典型药物的结构和性质,一、苯烃胺类 ：1.碱性* 2.手性* 3.氨基醇结构 * 4.UV*,二、托烷类：1.碱性* 2.阿托品为消旋体*,三、喹啉类：1.碱性 *,四、异喹啉类：1.盐酸吗啡酸碱两性*,五、吲哚类：1.碱性*,六、黄嘌呤类：1.游离*,第二节 鉴别试验,一、性状检查：外观、溶解度、物理常数,二、化学鉴别法,1.显色反响；2.沉淀反响,3.特征鉴别反响*,1双缩脲反响；2vitaili反响3绿奎宁反响,4紫脲酸铵反响；5Marquis反响,三、仪器分析法：UV，IR，色谱,1、碱性最强的生物碱类型为 ,A、酰胺生物碱 B、叔胺生物碱,C、仲胺生物碱 D、季铵生物碱,E、两性生物碱,2、生物碱沉淀反响的条件是 ,A、酸性水溶液 B、碱性水溶液,C、中性水溶液 D、盐水溶液,E、酸溶液,3、生物碱不具有的特点是 ,A. 分子中含N原子B. 具有碱性,C. 分子中多有苯环D. 显著而特殊的生物,活性,E. N原子多在环内,4、既可溶于酸又可溶于碱的药物是,A.阿托品 B.奎尼丁,C.吗啡 D.可待因,E.山莨菪碱,5、结构中含有莨菪酸的药物是,A.利血平 B.奎尼丁,C.吗啡 D.可待因,E.山莨菪碱,6、属于喹啉类生物碱的药物是,A.阿托品 B.奎尼丁,C.吗啡 D.可待因,E.山莨菪碱,7、属于异喹啉类生物碱的药物是,A.利血平 B.奎尼丁,C.吗啡 D.硝酸士的宁,E.山莨菪碱,8、能用紫脲酸铵反响鉴别的药物是,A.咖啡因 B.奎尼丁,C.吗啡 D.可待因,E.山莨菪碱,9、能用维他立反响鉴别的药物是,A.麻黄碱 B.奎尼丁,C.奎宁 D.可待因,E.阿托品,10、加盐酸和氯酸钾在水浴中共热蒸干，,残渣加氨水呈紫色，再加氢氧化钠试液，,紫色即消失的药物是,A.伪麻黄碱 B.利血平,C.咖啡因 D.山莨菪碱,E.奎尼丁,一般鉴别,1.,测熔点法,2. 显色反响 (加H2SO4和HNO3),3. 沉淀反响,(,加碘化铋钾、碘化汞钾等 生成沉淀,),4. UV,法,(,特征吸收,),5. IR,6. TLC,7.HPLC,特殊鉴别,5.Marquis反响,加甲醛硫酸试液显色,(酚羟基-异喹啉生物碱的特征反响),1.双缩脲反响,(芳环侧链具有,氨基醇特征反响),CuSO4+NaOH显蓝紫色,2.Vitaili反响,发烟HNO3+C2H5OH+NaOH,显深紫色,4.紫脲酸铵反响,咖啡因+HCl+KClO3,残渣遇氨气显紫色,加NaOH紫色消失,3.绿奎宁反响,二盐酸奎宁+Br2+NH3,产生翠绿色,6.与芳醛缩合显色,吲哚类,+香草醛,玫瑰红色,+对二甲氨基苯甲醛,绿色,+冰醋酸变为,红色,第三节 特殊杂质检查,生物碱类药物大多是从植物中提取，局部也有合成的。由于其结构复杂，生产工艺长，在生产或贮藏过程中常共存其他生物碱，而生物碱一般均有毒性和活性，为保证用药的平安、有效，对各种生物碱中存在的特殊杂质应严格控制,第三节 特殊杂质检查,一、生物碱类药物中存在的主要特殊杂质,第三节 特殊杂质检查,一、利用药物和杂质在物理性质上的差异,硫酸奎宁中“氯仿-,乙醇中不溶物的检查,硫酸阿托品中“莨菪,碱的检查*,利血平中“氧化产物,的检查,利用旋光度的差异,利用溶解行为的差异,利用对光选择性吸收的差异,二、利用药物和杂质在化学性质上的差异,1,、盐酸吗啡中阿扑吗啡的检查,本品,吗啡在酸性溶液中加热，可以经脱水、分子重排生成具复原性的阿扑吗啡，其水溶液在碳酸氢钠碱性条件下经碘试液氧化生成水溶性绿色化合物，此产物能溶于乙醚，乙醚层显深宝石红色，水层仍显绿色。?中国药典?2021规定50mg药物经理后检查，乙醚层不得显红色，水层不得显绿色。,加水溶解,加,NaHCO3+,碘试液,加乙醚振摇,乙醚层不得显红色,水层不得显绿色,三、色谱法,硫酸奎宁中其它金鸡纳碱的检查,检查方法：供试品溶液自身稀释对照法,有关物质的检查,?中国药典?2021对包括秋水仙碱、盐酸吗啡、硫酸阿托品以及利血平等多个品种在内的生物碱类药物新增了“有关物质检查。,方法：HPLC,第四节 含量测定,一、非水滴定法非水碱量法,(一)原理和方法,游离生物碱：生成生物碱的高氯酸盐,生物碱盐：置换滴定，即强酸滴定液置换出与游离碱结合的较弱的酸。,BH,+,A,-,+ HClO,4,BH,+,ClO,4,-,+ HA,二测定条件的选择,适用范围及溶剂的选择,Kb10-10时，宜选冰醋酸作为溶剂；,Kb为10-10-10-12时，宜选冰醋酸与醋酐的混合液作为溶剂；,Kb 10 -12时，选用醋酐作为溶剂。,2.,酸根的影响,酸根在冰醋酸中的酸性：,高氯酸氢溴酸盐酸硫酸硝酸其它弱酸 磷酸、有机酸,假设滴定过程中置换出的HA酸性较强，反响将不能进行到底，需进行一定处理，以排除HA的干扰。,3. 指示终点的方法,电位法：玻璃甘汞电极系统,指示剂法：结晶紫,结晶紫的碱式色为紫色，酸式色为黄色。不同酸度下，变色比较复杂、由碱式到酸式，变为紫、蓝、绿、黄。还和生物碱碱性有关系。,三、测定实例,1、游离弱碱性生物碱药物的含量测定 咖啡因,咖啡因的碱性很弱pKb为14.1，所以选用酸酐冰醋酸作为溶剂，可使突跃显著增大。,4个N，但只有一个N碱性稍强，故滴定时，1mol的高氯酸相当于1mol的咖啡因。,1一般均预先在溶液中参加Hg(Ac)2 的冰醋酸溶液，以消除氢卤酸对滴定的干扰。,理论量,1,3,倍,2.,氢卤酸盐的测定,汞污染,2筛选溶剂，到达终点易观察的目的，同时采用电位法指示终点。,3局部采用HPLC进行含量测定,取本品约 0.15g，精密称定，加冰醋酸 10ml，加热溶解后，加醋酸汞试液 4ml 与结晶紫指示液 1滴，用高氯酸滴定液0.1mo1/L滴定至溶液显翠绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。每 1ml 高氯酸滴定液0.1mol/L相当于 20.17mg 的C10H15NO HCl。,盐酸麻黄碱,ChP(2005),生物碱的硫酸盐，在冰醋酸介质中只能被滴定至生物碱的硫酸氢盐。,3.,硫酸盐的测定,1硫酸阿托品,HClO4直接滴定时，反响摩尔比为11,2硫酸奎宁,HClO4直接滴定时，反响摩尔比为13,C20H24N2O2H+2SO42-+3HCLO4,C20H24N2O22H+2CLO4-+C20H24N2O22H+HSO4- CLO4-,因,HNO,3,具有氧化性，可使指示剂变色，一般电位法指示终点。如硝酸毛果芸香碱。,4.,硝酸盐的测定,无影响，直接测定。如磷酸可待因。,5.,磷酸盐及其有机酸盐的测定,一原理与方法,二、提取酸碱滴定法,适用于碱性比较强的的药物分析。(Pkb=6-9),碱化、别离提取*,2.,滴定,*,1直接滴定法,用于碱性较强的生物碱,2剩余滴定法,用于碱性较弱的生物碱,3提取剩余滴定法,用于对热不稳定的生物碱,碱化试剂 最常用氨水*,优点：使大局部生物碱游离，不会和生物碱发生反响，不易乳化，易挥发，易除去，无干扰。,二测定条件的选择,2. 提取溶剂,1提取溶剂选择的原那么,对生物碱溶解度大，而对其他共存物溶解度尽可能小；与生物碱及碱化试剂不起任何反响。,2常用的提取溶剂 最常用氯仿*,通常应提取,4,次，第一次用量至少应为水液体积的一半，以后几次应各为第一次的一半,3.选择适宜的指示剂,要求,：变色范围在酸性区域的指示剂；被滴定生物碱的化学计量点，应在选用的指示剂变色范围内。,药品,化学计量点的,PH,值（,PT,值）,滴定突越的,PH,值,指示剂,阿托品,5.4,3.8-7.2,甲基红,罂粟碱,3.60,3.8-4.6,溴酚蓝,注：甲基红：，溴酚蓝：,4.防止乳化,措施：采用碱性弱的碱化试剂；选用不易产生乳化的其他有机溶剂；防止猛烈振摇。,如果乳化已经出现，那么采用以下方法：改变两相体积比；参加少量乙醇；参加无机盐；离心；热敷；加少量酸。,三测定实例,磷酸可待因糖浆的含量测定,用内容量移液管，精密量取本品,10ml,，以水洗出移液管内的附着液，置分液漏斗中，加,氨试液,使成碱性，用,氯仿,振摇提取至少,4,次，第一次,25ml,，以后每次各,15ml,，至可待因提尽为止，每次得到的氯仿液均用同一份水,10ml,洗涤，洗液用氯仿,5ml,振摇提取，合并氯仿液，置水浴上蒸干，精密加,硫酸滴定液,(0.01mol/L) 25ml,，加热溶解，放冷，加甲基红指示液,2,滴，用,氢氧化钠滴定液,(0.02mol/L),滴定。每,1ml,的硫酸滴定液,(0.01mol/L),相当于,84.88mg,的,C,18,H,21,NO,3,H,3,PO,4,3/2H,2,O,。,第三节 特殊杂质检查,一、利用物理性质上的差异：旋光性*,二、利用化学性质上的差异,三、色谱法,第四节 含量测定,一、非水溶液滴定法,一原理和方法*：游离碱，生物碱盐,二测定条件的选择,1.适用范围及溶剂的选择,2.酸根的影响,3.指示剂方法的选择,三测定实例*,1.游离碱的测定；2.氢卤酸盐的测定；3.硫酸盐的测定；4.硝酸盐的测定；5.磷酸及有机酸盐的测定。,二、提取酸碱滴定法,1.原理和方法：步骤*,2.测定条件的选择：碱化试剂*、提取溶剂*、指示剂,三、酸性染料比色法,生物碱与某些酸性染料，在一定,PH,条件下可定量结合显色，然后用比色法测定含量。,特点,：灵敏度高、方便，并且具有一定专属性和准确性。适用于含量较低的样品测定。,*,一根本原理,在适当的介质中，,BH+ .In-,水相,B+H,+,BH,+,HIn H,+,+In,-,BH+ .In-,有机相,+,二测定条件的选择,关键：酸性染料与有机碱能否认量的形成离子对，并完全被有机溶剂提取。*,1.水相最正确PH值的选择：,使生物碱均形成阳离子，且酸性染料电离足够阴离子。,2.,酸性染料,种类的要求,：与生物碱定量结合；生成的离子对在有机相中溶解度较大，而染料自身在有机相中不溶或很少溶解；生成的离子对有较高吸光度。,常用：,溴麝香草酚蓝、甲基橙、溴甲酚绿等,3.,有机溶剂的选择,要求：对离子对的提取率高；不能或极少与水互溶。,常用,三氯甲烷,、二氯甲烷等。,4.,水分的存在,完全无水,5.,有色杂质的存在,为了防止有色杂质的干扰。可对酸性染料进行处理：用有机溶剂提取，除去有色杂质。,供试品溶液的制备：取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量约相当于硫酸阿托品2.5mg ，置50ml量瓶中，加水振摇使硫酸阿托品溶解并稀释至刻度，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。,对照品溶液的制备：另取硫酸阿托品对照品约25mg，精密称定，置25ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。,例：硫酸阿托品片10版药典,测试方法：,精密量取供试品溶液与对照品溶液各2ml，分别置预先精密参加三氯甲烷10ml的分液漏斗中，各加溴甲酚绿溶液2.0ml，振摇提取2 分钟后，静置使分层，分取澄清的三氯甲烷液，照紫外-可见分光光度法附录A，在420nm的波长处分别测定吸光度，计算，并将结果与1.027 相乘，即得供试量中含有(C17H23NO3)2H2SO4H2O的重量。,(C,17,H,23,NO,3,),2,H,2,SO,4,H,2,O,标示量,%=,Ax/A,R, C,R, 50 1.027 ,平均片重,W,标示量,100%,1.027,：质量换算因数，指,1g,无水硫酸阿托品相当于硫酸阿托品的量。由下式求得：,(C,17,H,23,NO,3,),2,H,2,SO,4,H,2,O,的分子量,(C,17,H,23,NO,3,),2,H,2,SO,4,的分子量,=1.027,第四节 含量测定,四、紫外分光光度法,生物碱分子结构中含有不饱和双键或芳香环等生色团，可在紫外光区产生吸收，故可用紫外分光光度法测定这些药物的含量。常用的方法有吸收系数法和对照品比较法。,1吸收系数法 最根本的紫外分光光度法。如?中国药典?2021对硝酸士的宁注射液的含量测定：精密量取本品适量，加水制成每1mL中约含16mg的溶液，照分光光度法，在275nm波长处测定吸收度，按C21H22N2O2HNO3的吸收系数为316计算，即得。,第四节 含量测定,四、紫外分光光度法,2对照品比较法,?中国药典?2021对盐酸吗啡片的含量测定：取供试品20片，精密称定，研细，精密称取适量约相当于盐酸吗啡10mg，置100mL量瓶中，加水50mL，振摇，使盐酸吗啡溶解，再加水至刻度，摇匀，滤过，精密最取续滤液15mL，置50mL量瓶中，加0.2mol/L氢氧化钠25mL，用水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；另精密称取在105枯燥1h的吗啡对照品适量，用0.1mol/L 氢氧化钠溶液配制成每1mL约含20mg的溶液，作为对照品溶液。取上述两种溶液，在250nm波长处测定吸收度，计算出供试品中无水吗啡的含量，乘以1.317，即得供试品中含有C17H19NO33H2O的重量。,第四节 含量测定,五、高效液相色谱法,高效液相色谱法在生物碱类药物的含量测定中，应用越来越广泛。利用本法可以十分有效地别离和测定本类药物及其分解物。中国药典2021中，本类药物多个制剂品种新增用本法。如?中国药典?2021对磷酸可待因片的含量测定采用本法。,色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇0.03mol/L醋酸钠用冰醋酸调解pH值至3.512.5为流动相；检测波长为280nm；理论板数按磷酸可待因峰计算不低于2000，磷酸可待因峰与相邻杂质峰的别离度应符合要求。,第四节 含量测定,五、高效液相色谱法,测定法,取本品,20,片，精密称定，研细，精密称取适量,(,约相当于磷酸可待因,30mg),置,100ml,量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过；精密量取,10l,注入液相色谱仪，记录色谱图,;,另取磷酸可待因对照品适量，精密称定，加水溶解并定量稀释成每,1ml,中含,0.3mg,的溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。计算磷酸可待因时乘以换算系数,1.068,。,例,1.,盐酸吗啡中应检查的特殊杂质为,A.,吗啡,B.,阿朴吗啡,C.,罂粟碱,D.,莨菪碱,E.,其它生物碱,例,2,用非水溶液滴定法测定盐酸吗啡含量时，应使用的试剂是,A. 5,醋酸汞冰醋酸液,B.,盐酸,C.,冰醋酸,D.,二甲基甲酰胺,E.,高氯酸,例3非水溶液滴定法测定硫酸奎宁含量的反响条件为,A冰醋酸-醋酐为溶剂,B. 高氯酸滴定液0.1mol/L滴定,C1mol的高氯酸与mol的硫酸奎宁反响,D. 仅用电位法指示终点,E溴酚蓝为指示剂,例4. 酸件染料比色法中，水相的pH值过小，那么,A. 能形成离子对,B. 有机溶剂提取能完全,C. 酸性染料以阴离子状态存在,D. 生物碱几乎全部以分子状态存在,E. 酸性染料以分子状态存在,例5. 生物碱类药物的一般鉴别试验包括,A. 熔点测定,B. 显色反响,C. 沉淀反响,D. 光谱法紫外、红外,E. 薄层色谱法,例6. 能够发生Vitali反响的药物是,A. 盐酸吗啡,B. 硫酸奎宁,C. 磷酸可待因,D. 盐酸麻黄碱,E. 硫酸阿托品,例,7.,酸性染料比色法测定生物碱类药物，有机溶剂萃取测定的有色物是,A.,离子对和指示剂的混合物,B.,生物碱盐,C.,指示剂,D.,离子对,E.,游离生物碱,