机能学设计性实验急性肾衰竭动物模型的建立专家讲座

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,急性肾衰竭动物模型建立,机能学设计性实验急性肾衰竭动物模型的建立专家讲座,第1页,【试验目标】,1.,学习复制急性肾衰竭动物模型方法,。,2.,观察急性肾衰竭时机体经典表现及血,酐水平改变。,3.,掌握急性肾衰竭概念及发病机制,。,机能学设计性实验急性肾衰竭动物模型的建立专家讲座,第2页,【,试验原理,】,急性肾功效衰竭,指各种原因在短期内引发肾脏泌尿功效急剧障碍，以致机体内环境出现严重紊乱病理过程，临床表现有水中毒、氮质血症、高钾血症和代谢性酸中毒等,急性肾功效不全分类,依据病因学，临床上将急性肾功效不全分为肾前性、肾性、肾后性三种。,机能学设计性实验急性肾衰竭动物模型的建立专家讲座,第3页,急性肾功效发病机制,肾缺血,肾中毒,血流动力学异常,肾小管损伤,滤过膜受损,皮质缺氧,髓质充血,肾小管阻塞,原尿反漏,滤过系数,外髓部供氧,GRF,少尿,机能学设计性实验急性肾衰竭动物模型的建立专家讲座,第4页,【,试验动物,】,健康家兔，雄性，体重1.51.8Kg,机能学设计性实验急性肾衰竭动物模型的建立专家讲座,第5页,【,试验器材和药品,】,20%,乌拉坦溶液、庆大霉素注射液（,1ml:4,万单位）、,150U/ml,肝素、,0.9%,生理盐溶液、苦味酸,BL-420F,试验系统、哺乳动物手术器械一套、动脉导管、动脉夹、膀胱导尿管、注射器（,2ml,、,5ml,）、皮头针一套、水浴箱、离心机、丝线,机能学设计性实验急性肾衰竭动物模型的建立专家讲座,第6页,【,试验步骤,】,家兔称重、分组,-,体重相同为一组，而且试验组和对照组体重相同或相同,生理盐水作静脉点滴输液,-,耳缘静脉滴注,家兔固定,-,仰卧位固定,剪去颈部和上腹部毛、麻醉,-,20%氨基甲酸乙酯注射液4ml/kg，耳缘静脉注射麻醉,在麻醉状态下，做颈总动脉插管，并连接到试验系统,-,取血,1mL,测血肌酐和在试验系统上读取血压以及统计此时在尿量,机能学设计性实验急性肾衰竭动物模型的建立专家讲座,第7页,在麻醉状态下，自耻骨联合上方腹部正中线切开皮肤，切口长,46cm,夹闭肾动脉,-,沿腹白线打开腹腔，将内脏推向左侧，打开后腹膜，暴露肾蒂，分离肾动脉，试验兔和夹闭肾动脉,30,分钟，对照组肾脏不夹闭。,二组家兔耳缘静脉注入庆大霉素,4,万,U/Kg,每隔,10,分钟，取一次尿液，测定尿量，并做尿肌酐试验。共取三次。,机能学设计性实验急性肾衰竭动物模型的建立专家讲座,第8页,颈总动脉取血，做血肌酐试验,最终将家兔一并处死，取出肾脏，观察并比较家兔肾脏。,机能学设计性实验急性肾衰竭动物模型的建立专家讲座,第9页,血、尿肌酐测定方法（见表,1,）和内生肌酐去除率计算从颈总动脉取血置盛有肝素离心管内，离心后取血浆，按下表进行,试验,。,表1 血浆和尿液肌酐含量测定,试剂（ml）,标准管S,标准空白管S0,测定管R,测定空白管R0,肌酐标准液,025,025,-,-,血浆或尿液,-,-,0250,0250,血浆或尿液,0.5,-,0.5,-,空白苦味酸,-,0.5,-,-,-,机能学设计性实验急性肾衰竭动物模型的建立专家讲座,第10页,计算：,机能学设计性实验急性肾衰竭动物模型的建立专家讲座,第11页,【,观察项目,】,表2,处理前和处理后对照组家兔各指标改变,组 血压 呼吸 尿量 心率 血肌酐 尿肌酐 内生肌酐去除率,别 （mmHg)（滴/分）（次/分）（%）（%）（%）,处理前处理后 处理前处理后 处理前处理后 处理前处理后 处理前处理后,1兔,2兔,3兔,4兔,5兔,6兔,机能学设计性实验急性肾衰竭动物模型的建立专家讲座,第12页,表3,处理前和处理后试验组家兔各指标改变,组 血压 呼吸 尿量 心率 血肌酐 尿肌酐 内生肌酐去除率,别 （mmHg)（滴/分）（次/分）（%）（%）（%）,处理前处理后 处理前处理后 处理前处理后 处理前处理后 处理前处理后,7兔,8兔,9兔,10兔,11兔,12兔,机能学设计性实验急性肾衰竭动物模型的建立专家讲座,第13页,【,预期试验结果,】,二组家兔,兔子血压升高，呼吸加深加紧，心率加紧，尿,量减,少，,血/尿,肌酐浓度,增高,，,内生肌酐去除率升高，,各项症状显著易于测定。,机能学设计性实验急性肾衰竭动物模型的建立专家讲座,第14页,正常肾脏切面图,机能学设计性实验急性肾衰竭动物模型的建立专家讲座,第15页,急性肾衰竭肾脏切面图,机能学设计性实验急性肾衰竭动物模型的建立专家讲座,第16页,急性肾衰竭镜下列图,毒素引发肾小管坏死通常弥散性累及肾小管，而由缺血（如心衰引发严重低血压）引发肾小管坏死则成片状受累。,机能学设计性实验急性肾衰竭动物模型的建立专家讲座,第17页,【,注意事项,】,1.选择体重相差不超出250g家兔进行对照,2.,注意麻醉药剂量与注入剂量、观察麻醉情况。,3,.专员测定血/尿肌酐,4.,颈总动脉插管,5,.肾脏结扎线置于肾动脉处，防止勒破肾脏,6,.每项生化检验所加入试剂用量要准确,左颈总动脉,迷走神经,颈内静脉,胸骨舌骨肌,胸锁乳突肌,机能学设计性实验急性肾衰竭动物模型的建立专家讲座,第18页,