衣原体的基因检测PPT资料

Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,11/7/2009,#,Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,衣原体的基因(jyn)检测,第一页，共25页。,衣原体的基因(jyn)检测,第二页，共25页。,第十章,感染性疾病(jbng)的分子诊断,陈沙,第三页，共25页。,第三节,衣原体的基因(jyn)检测,第四页，共25页。,题名：超高倍显微镜与安图生物检验试剂检测衣原体和支原体的分析,黄位强,出处：检验医学与临床 年第17期,摘要：目的探讨超高倍镜在检测衣原体和支原体方面应用的准确度。了解(lioji)健康人群的支原体和衣原体健康携带情况。方法对 年411月到贺州市中医医院作妇科健康体检的512例妇女进行阴道分泌物超.,第五页，共25页。,题名：支原体衣原体感染在不孕症中的影响,张艳萍,出处：中国医药科学 年第14期,摘要：目的探讨支原体和衣原体感染在不孕症中的影响。方法选取 年1月 年1月来笔者所在医院就诊的不孕症妇女36例作为观察组;另外选取同期的正常生育(shngy)妇女36例作为对照组。支原体检验培,第六页，共25页。,题名：浅谈沙眼衣原体感染与母婴传播的关系,韦新文,出处：求医问药：下半月刊,摘要：目的探讨本地区泌尿生殖道感染患者(hunzh)支原体、衣原体感染状况。方法衣原体抗原检测采用单克隆抗体金标法;支原体检测采用液体培养法。结果 1226例标本中检出支原体453例,总阳性率为36.9%,其.,第七页，共25页。,目录(ml),衣原体（chlamydia）的定义(dngy),衣原体特点,衣原体结构,衣原体的分类,衣原体的发展,第八页，共25页。,没有肽聚糖，小基因组；,能通过细胞滤器，有独特(dt)发育周期、严格细胞内寄生的原核细胞型微生物,在自然界中传播广泛；,专性细胞内寄生，一般(ybn)寄生在动物细胞内；,一、衣原体（chlamydia）的定义(dngy),什么是衣原体,第九页，共25页。,二、衣原体特点(tdin),具有DNA和RNA两种核酸，二分裂增殖，有核糖体和黏肽组成的细胞壁；,衣原体基因组的Mr为66010,比除支原体外的任何(rnh)原核生物都小；,其生活(shnghu)周期分为细胞外期（即有感染性的原体）和细胞内期（即增殖性的始体）两个时期；,第十页，共25页。,原体（elementary body，EB）：有感染性，体积小，卵圆形，电子密度大，直径为0.20.4微米，细胞壁厚，一种不能运动的球状细胞，对外界不良环境抵抗力强。,始体（initial body）亦称网状体(reticulate body，RB)无感染性：球状细胞，形体较大(jio d),呈圆形或不规则形，电子密度较小，直径 约为0.3 0.5微米，细胞壁薄，壁中结构松散以二分裂进行繁殖，产生小细胞。,三、衣原体结构(jigu),中间体(Intermediate body)：存在(cnzi)的一种过渡形态。,第十一页，共25页。,衣原体与细菌的主要区别：,缺乏合成(hchng)生物能量来源的ATP酶，其能量完全依赖被感染的宿主细胞提供。,衣原体和其他(qt)微生物的区别,衣原体与病毒的主要区别：,具有DNA、RNA两种核酸、核糖体和一个近似(jn s)细胞壁的膜，并以二分裂方式进行增殖，能被抗生素抑制。,第十二页，共25页。,四、衣原体分类(fn li),沙眼衣原体(C.trachomatis),肺炎(fiyn)衣原体(C.pneumoniae),鹦鹉热衣原体(C.psitta),反刍动物衣原体(C.pecorum),第十三页，共25页。,一、沙眼(shyn)衣原体,不仅能引起眼科(yn k)的感染性疾病，还可以引起泌尿生殖道、呼吸道感染等。其中以沙眼最常见。,而且是致盲的首位因素。人类是其主要的自然(zrn)宿主。,第十四页，共25页。,：CT血清型D基因组长1042519bp，含有894个蛋白(dnbi)编码基因，G+C含量为41.3%，另一个是7493bp的隐蔽性质粒基因。,（一）.沙眼(shyn)衣原体（CT）基因组结构,：根据CT的核酸组织具有真核样特性和为适应专性细胞内寄生所进行(jnxng)的复杂进化。,第十五页，共25页。,（二）诊断(zhndun)方法：,一：传统的实验室检测CT：,：细胞培养法检测衣原体包涵体,（缺点：费时费事，成本高，技术难度高，难以(nny)普及）,：血清学实验:如荧光抗体法或酶标抗体法,（缺点：越来越不能满足(mnz)临床要求）,第十六页，共25页。,二：分子(fnz)诊断方法,1：PCR PCR的特异性主要取决于引物的特异性。PCR扩增所选靶序列主要有主要外膜蛋白（MOMP）、隐蔽性质粒和16SrRNA基因序列,2：LCR（ligase chain reaction）连接酶链反应。其扩增效率与PCR相当，最大特点为可区分基因(jyn)序列中的单个基因(jyn)突变。由Landegree于1988年首次应用于镰刀形红细胞贫血的分子诊断。,第十七页，共25页。,主题词 衣原体肺炎(Chlamydophila pneumoniae)散射测浊法和比浊法(Nephelometry and Turbidimetry)动脉粥样硬化(Atherosclerosis)吸附(Adsorption)危险(Risk),方法对 年411月到贺州市中医医院作妇科健康体检的512例妇女进行阴道分泌物超.,第二十四页，共25页。,二、衣原体特点(tdin),一、衣原体（chlamydia）的定义(dngy),（二）诊断(zhndun)方法：,缺乏合成(hchng)生物能量来源的ATP酶，其能量完全依赖被感染的宿主细胞提供。,作 者 贾新巧(南阳医学高等专科学校第一附属医院心血管内科,河南南阳,473000)；,衣原体与病毒的主要区别：,PCR扩增所选靶序列主要有主要外膜蛋白（MOMP）、隐蔽性质粒和16SrRNA基因序列,：CT血清型D基因组长1042519bp，含有894个蛋白(dnbi)编码基因，G+C含量为41.,第十章,发展(fzhn)应用,慢性肺炎衣原体感染可能是冠心病的一个重要因素。,：CT血清型D基因组长1042519bp，含有894个蛋白(dnbi)编码基因，G+C含量为41.,第二十三页，共25页。,什么(shn me)是LCR？,连接酶链反应（ligase chain reaction）：是继PCR后，新出现的一种更加完善的DNA体外扩增和检测技术，在检测点突变等方面具有独特的优点。该技术是利用DNA连接酶构建(u jin)共价磷酸键，特异地连接双链DNA，经加热变性、退火和连接等步骤后，再多次反复循环，从而使目的DNA得以大量扩增。,第十八页，共25页。,LCR主要用途：,1：单碱基突变遗传病的检测,2：病原(bngyun)微生物种和亚种的检测,3：进行多位点同时定向诱变,第十九页，共25页。,二、肺炎(fiyn)衣原体,肺炎(fiyn)衣原体（CP）是衣原体属中的一个新种，只有一个血清型，其代表株为TW-183和 AR-39。,因两株衣原体的血清型完全相同，合并称TWAR组衣原体，98kD蛋白(dnbi)为其特异性抗原。,第二十页，共25页。,（一）.肺炎(fiyn)衣原体（CP）基因组结构,CWL-029株基因组含1230230bp，含有1073个蛋白编码基因，G+C含量为40.6%，其中636个基因的功能(gngnng)已确定，251个基因和CT等同源，为蛋白编码基因。,有21个多形膜蛋白基因，比沙眼衣原体多12个。多集中于2个染色体区域，有三个则单独存在。,第二十一页，共25页。,（二）诊断(zhndun)方法：,一：传统(chuntng)的实验室检测CP：,细胞培养法检测,免疫学方法,（缺点：阳性率低，特异性差，临床应用存在局限性）,第二十二页，共25页。,二：分子诊断(zhndun)方法,1：PCR PCR的特异性主要取决于引物的特异性。,2：FQ-PCR：又称荧光(ynggung)定量PCR,3：免疫(miny)杂交PCR,4：竞争性PCR,第二十三页，共25页。,发展(fzhn)应用,第二十四页，共25页。,（三）临床意义,寄生人类，也寄生于马和考拉树熊体内；,主要引起青少年急性呼吸道感染，可引起肺炎、支气管炎、咽炎和鼻窦炎等；,临床表现：咽痛、声音嘶哑(sy)等；,慢性感染与急性心肌梗死和慢性冠心病有关；,慢性肺炎衣原体感染可能是冠心病的一个重要因素。,肺炎衣原体感染与急性心肌梗死的关系,目的 探讨肺炎衣原体感染与急性心肌梗死之间的关系.,方法 应用固相酶联免疫吸附试验(ELISA)方法定量检测70例急性心肌梗死患者及60例正常对照组血清中肺炎衣原体IgG抗体水平,同时采用乳胶增强免疫比浊法进行C-反应蛋白(CRP)的测定.,结果 急性心肌梗死组肺炎衣原体IgG和CRP阳性率均显著高于正常对照组,IgG平均浓度也明显高于正常对照组,两组比较差异有统计学意义(P0.05).,结论 肺炎衣原体感染可能通过影响动脉粥样硬化斑块的稳定性,激发和加重冠状动脉内炎症反应,可能是构成急性心肌梗死发生发展的一个危险因子(ynz).,作 者 贾新巧(南阳医学高等专科学校第一附属医院心血管内科,河南南阳,473000)；,刊 名 中国实用医刊 年39卷06期 81-82页,英文期刊名 Chinese Journal of Practical Medicine,关键词 肺炎衣原体 急性心肌梗死 动脉粥样硬化 MeSH,主题词 衣原体肺炎(Chlamydophila pneumoniae)散射测浊法和比浊法(Nephelometry and Turbidimetry)动脉粥样硬化(Atherosclerosis)吸附(Adsorption)危险(Risk),第二十五页，共25页。,