药敏试验资料

Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,药敏试验,(shyn),MIC,：在与微生物生长速率有关的特定时间间隔内，通常是1824小时，能够抑制被测菌生长的最低药物浓度。,对倍稀释的优点,：,操作容易,敏感,(mngn),株的MIC,呈正态分布,区分异常(,R),与敏感(,S),的菌群,第一页，共五十三页。,药敏试验,(shyn),折点的建立,1. MIC的分布,2. 药代动力学和药效学 定 MIC的折点,3. 临床疗效和细菌去除率,4. 抑菌圈直径的分布 定抑菌圈折点,统计学的线性回归(hugu),计算错误率：尽可能减少极重要误差 (假敏感率),第二页，共五十三页。,MIC的分布,(fnb),第三页，共五十三页。,药代动力学和药效学,药代动力学：药物吸收，分布(fnb)，代谢，排泄,药效学：药物对机体的作用,时间依赖型TMIC：内酰胺类，大环内酯类,浓度依赖型AUC/MIC比率：AGS, FQ,这些参数可用于计算具有最正确药效的给药方案,第四页，共五十三页。,MIC与抑菌圈直径,(zhjng),的线性关系,耐药 中介,(zhngji),敏感,R,I,S,Log,2,. MIC,D 1 d2 抑菌圈直径(zhjng)mm),第五页，共五十三页。,抑菌圈直径,(zhjng),与MIC,的关系,第六页，共五十三页。,不同,(b tn),国家的,判定折点可能不同,原因：,用药剂量不同，服药的间隔不同,评价敏感时较保守,更强调检测(jin c)出耐药株即特定的耐药群,技术因素：接种、培养基,第七页，共五十三页。,敏感性分类,(fn li),(NCCLS的定义),敏感Susceptible,用常规用量治疗有效,常规用药时到达的平均血药浓度超过(chogu)细菌的MIC 5倍以上。,耐药Resistance,用常规用量治疗不能抑制细菌的生长,MIC高于药物在血、体液中可能到达的浓度,第八页，共五十三页。,敏感性分类(fn li)2,中介 (Intermediate),MIC接近血、体液中药物的浓度，治疗反响率低于敏感(mngn)株,药物生理浓集部位有效 (尿FQ),加大用药剂量可能有效,缓冲区：防止操作的系统误差造成重大结果的判定错误,第九页，共五十三页。,药敏试验,(shyn),的方法学,半定量,纸片扩散,法,法 (,抑,抑菌圈直,径,径,(zhjng),),MIC,法：,稀释法(,肉,肉汤、琼,脂,脂),自动化仪,法,法,抗生素连,续,续梯度法(,Etest ),流式细胞,仪,仪,第十页，,共,共五十三,页,页。,药敏试验,方,方法,(fngf),的选择,纸片法有,独,独特(d,t),之,之处,选药灵活,、,、廉价、,易,易懂,MIC法,：,：商品肉,汤,汤法 (,自,自动化法),可用于厌,氧,氧菌、苛,氧,氧菌,计算机管,理,理,快速，但,可,可能有错,误,误如诱,导,导型菌,新药的评,价,价,第十一页,，,，共五十,三,三页。,药敏试验(shyn),方,方法1,纸,纸片扩散,法,法,材料：浸,有,有一定Abs的枯,燥,燥的园滤,纸,纸片,步骤：制,备,备菌悬液,涂平板,贴纸片,孵育,卡,卡尺测量,抑,抑菌圈直,径,径判定R、I、S,优点：选,药,药灵活、,廉,廉价(biny,)、一,个,个平皿可,测,测多个药,缺点：影,响,响因素多,适用于快,生,生长菌、,局,局部苛养,菌,菌,第十二页,，,，共五十,三,三页。,纸片扩散,(kusn),法影响,因,因素,MIC,接种菌量,细菌生长,率,率,抗生素含,量,量、扩散,性,性,平皿厚度,温度，预,孵,孵育,(fy),时间,第十三页,，,，共五十,三,三页。,纸片扩散,(kusn),法标准,化,化,NCCLS：美国,实,实验室标,准,准化委员,会,会(National CommitteeforClinical LaboratoryStandards),每年修订,(xidng),更改,包括质控,新药的判,定,定标准,特殊耐药,性,性的检测,第十四页,，,，共五十,三,三页。,NCCLS的法规,(fgu),规定纸片,含,含量、接,种,种浓度、,培,培养基、,平,平皿厚度,、,、判定标,准,准,(biozhn),、质控,规定常规,测,测试报告,的,的抗生素,不同的药,判,判定标准,不,不同,不同的菌,判,判定标准,也,也不同,第十五页,，,，共五十,三,三页。,常规测试,并,并报告,(bogo),的药物分,组,组,(1),肠杆菌,(gnjn),科,绿脓和非,肠,肠杆菌科,一 级,氨,氨苄,头,头孢他,啶,啶,唑林，庆,大,大庆大,，,，替卡，,哌,哌拉,二级,阿,阿,米,米卡星,阿,阿米卡星,氨苄/舒,，,，阿莫/,克,克吡肟,，,，哌酮，,氨,氨曲南,头孢肤肟,，,，头霉,环,环丙，亚,胺,胺培南，,替,替卡/克,噻肟，曲,松,松，环丙,妥,妥布，,磺,磺胺,亚胺培南,，,，替卡，,哌,哌拉,三级,氨,氨曲南,，,，头孢他,啶,啶头孢,曲,曲松,卡那，奈,替,替，妥布,氯,氯霉素,，,，奈替,四环素，,氯,氯霉素,第十六页,，,，共五十,三,三页。,常规测试,并,并报告,(bogo),的药物分,组,组,(2),葡萄球菌,(ptoqijn),肠球菌,一级,苯,苯唑，,青,青霉素,青,青霉素，,氨,氨苄,二级,红,红霉素,类,类万古,霉,霉素,克林,，,，万,古,古,三级,氯,氯霉,素,素,庆,庆大,第十,七,七页,，,，共,五,五十,三,三页,。,。,常规,测,测试,并,并报,告,告,(b,ogo),的药,物,物分,组,组,(3),流感,(li,n),嗜血,杆,杆菌肺炎,链,链球,菌,菌,一级,氨,氨,苄,苄，,青,青霉,素,素,青,青霉,素,素，,红,红霉,素,素,TMP/SMZTMP/SMZ,二级,头,头,孢,孢肤,肟,肟，,噻,噻肟,氧,氧,氟,氟，,四,四环,素,素,他啶,，,，氯,霉,霉素,万,万,古,古霉,素,素,三级,阿,阿奇,，,，头,孢,孢克,罗,罗,氯,氯霉,素,素，,利,利福,平,平,环丙,，,，亚,胺,胺培,南,南,利,利福,平,平，,四,四环,素,素,第十,八,八页,，,，共,五,五十,三,三页,。,。,预报,(y,b,o),用药(一),测试,药,药,菌,菌名,推,推,测,测其,它,它药,物,物的,敏,敏感,性,性,苯唑,西,西林,葡,葡,萄,萄球,菌,菌,所,所有,内,内酰,胺,胺类,四环,素,素,所,所有,除,葡,葡,多,多西,环,环素,，,，米,诺,诺环,素,素,萄球,菌,菌(qi,j,n)和,不,不,动杆,菌,菌,红霉,素,素G,球,球菌,罗,罗,红,红，,克,克拉,，,，阿,奇,奇,克林,霉,霉素,所,所,有,有,林,林可,霉,霉素,第十,九,九页,，,，共,五,五十,三,三页,。,。,预报,(y,b,o),用药(二),测试,药,药,菌,菌名,推,推,测,测其,它,它药,物,物的,敏,敏感,性,性,氨苄,西,西林,肠,肠,球,球菌,青,青,霉,霉素,青霉,素,素G,葡萄,球,球菌,(p,toqi,jn),氨苄,，,，美,洛,洛，,替,替卡,头孢,噻,噻吩,肠,肠,杆,杆菌,科,科,拉,拉定,，,，头,孢,孢氨,苄,苄，,克,克罗,奈啶,酸,酸,s,肠杆,菌,菌科,所,所,有,有,FQ,s,万古,霉,霉素,s,所有,替,替,考,考拉,宁,宁,s,第二,十,十页,，,，共,五,五十,三,三页,。,。,纸片,扩,扩散,(kusn),法操,作,作规,程,程(,一,一),培养,基,基：MH(,重复,性,性好,，,，低,抑,抑制,剂,剂，,营,营养,(y,ngy,ng),好,),厚度,：,：4mm,PH,：,：7.27.4,pH,低时,，,，氨,基,基糖,甙,甙,大,大环,内,内酯,pH,高时,，,，青,霉,霉素,类,类的,活,活性,离子,浓,浓度(,Ca,2+,Mg,2+,),影响,氨,氨,基,基糖,甙,甙类,、,、四,环,环素,对,对,Pae,活性,高时,，,，抑,菌,菌圈,；,第二,十,十一,页,页，,共,共五,十,十三,页,页。,纸片,扩,扩散,(kusn),法操,作,作规,程,程(,二,二),接种,：,：,纯的,新,新鲜,(x,nxin),菌落,，,，,0.5号,麦,麦氏,比,比浊,管,管,菌悬,液,液在15,分,分钟,内,内种,入,入平,皿,皿内,纸片,中,中心,的,的间,距,距=24,mm,孵育：,CO,2,影响,Ags,Tet,Macrolides,质控,:,ATCC25922,35218,ATCC27853,ATCC25923,第二,十,十二,页,页，,共,共五,十,十三,页,页。,纸片,扩,扩散,法,法结,果,果,(jigu),的判,定,定,1.,先,先,看,看菌,名,名,鉴,鉴定,到,到种,2.,不,不,同,同的,药,药物(y,ow)使,用,用不,同,同的,折,折点,药名,菌,菌,名,名RS,菌,菌株1,菌,菌株2,Pip/Taz,绿,绿脓,17,1816R30S,CAZ,绿,绿脓,14,1816I19S,3.,同,同,是,是S,时,时，,偏,偏离,敏,敏感,折,折点,越,越高,的,的药,MIC越,低,低，,活,活性,也,也越,高,高,第二,十,十三,页,页，,共,共五,十,十三,页,页。,抑菌,圈,圈的,分,分布,(f,nb),第二,十,十四,页,页，,共,共五,十,十三,页,页。,抑菌,圈,圈的,分,分布,(f,nb),第二,十,十五,页,页，,共,共五,十,十三,页,页。,非NCCLS,系,系统,的,的扩,散,散,(kusn),试验,方法,国,国,家,家,学,学会,培,培,养,养基,评,评,论,论,比较,法,法UKBSACIso-Sensitest,不,不校,正,正MICs,StokesUKBSACIso-Sensitest,不,不,校,校正MICs,SFM,法,法国SFMMH,与,与NCCLS,相,相近,DIN,德,德国DINMH,与,与NCCLS,相,相近,SIR,瑞,瑞典SMSPDM,ASMMIC,相,相关,值,值低,Neo-sensitabs丹,麦,麦、,比,比利,时,时MH,药,药,片,片，,易,易保,存,存(boc,n),双歧,澳,澳,大,大利,亚,亚Sensitest,无,无中,介,介,第二,十,十六,页,页，,共,共五,十,十三,页,页。,药敏,试,试验,的,的错,误,误,(cuw),来源(一),每个,系,系统,特,特有,的,的局,限,限性,快,快生,长,长菌,培养,基,基,成,成分,、,、厚,度,度、pH,、,、离,子,子浓,度,度,各种,材,材料,的,的正,确,确(zh,ngqu)保,存,存(纸,片,片20,),操作,步,步骤,纯菌,、,、35,、,、1628h,葡萄,球,球菌,、,、肠,球,球菌24h,第二,十,十七,页,页，,共,共五,十,十三,页,页。,药敏,试,试验,的,的错,误,误,(cuw),来源(二),体内,、,、体,外,外试,验,验的,不,不一,致,致性,某些,菌,菌测,某,某些,药,药，,结,结果,有,有误,头孢,菌,菌素,(t,ub,oj,ns,),、氨,基,基糖,甙,甙类,：,：沙,门,门菌,、,、志,贺,贺菌,头孢,菌,菌素,：,：李,斯,斯特,菌,菌属,头孢,菌,菌素,、,、氨,基,基糖,、,、克,林,林、TMP/SMZ：,肠球,菌,菌,Beta,内酰,胺,胺类,：,：,MRS,即使,敏,敏感,，,，也,应,应报,告,告耐,药,药,第二,十,十八,页,页，,共,共五,十,十三,页,页。,问题,(w,nt),菌和,耐,耐药,机,机制,有些,菌,菌无,标,标准,化,化的,药,药敏,试,试验,棒杆,菌,菌,(g,njn),、芽,胞,胞杆,菌,菌,(g,njn),、气,单,单胞,菌,菌、,巴,巴斯,德,德菌,某些,耐,耐药,机,机制,需,需要,多,多种,检,检测,方,方法,诱导,型,型：VanB,BushI,型酶,MRS,的异,质,质型,表,表达,ESBL,药敏,可,可能,无,无法,检,检出,新,新出,现,现的,耐,耐药,，,，,VISA,第二,十,十九,页,页，,共,共五,十,十三,页,页。,药敏,试,试验,方,方法,(f,ngf,),2,肉,肉汤,稀,稀释,法,法,48163264128256ug/ml,混,混,清,抗生,素,素倍,比,比稀,释,释，,种,种菌10,5,CFU/ml,，,，,孵,孵,育,育,(f,y),35,，,16-20h,，,，判,读,读,第三,十,十页,，,，共,五,五十,三,三页,。,。,药敏,试,试验,方,方法,(f,ngf,),2,肉,肉汤,稀,稀释,法,法,调节,离,离子,浓,浓度,的,的MH肉,汤,汤,宏量(h,n,li,n,),肉,肉汤,法,法2ml,13x100mm,微量,肉,肉汤,法,法,0.1ml,微,微量,板,板,自,自动,化,化仪,优点,：,：准,确,确，,可,可靠,，,，可,用,用于,研,研究,缺点,：,：,劳动,强,强度,大,大,细菌,生,生长,情,情况,不,不可,查,查,第三,十,十一,页,页，,共,共五,十,十三,页,页。,药敏,试,试验,(shyn),方法3,琼,琼脂,稀,稀释,法,法,浓度,(n,ngd,),163264128256ug/ml,制备,含,含对,倍,倍抗,生,生素,浓,浓度,梯,梯度,的,的平,板,板，,制,制备,菌,菌悬,液,液，,点种,(dinzh,ng),菌，10,4,/每,个,个点,，,，孵,育,育，,判,判读,结,结果,第三,十,十二,页,页，,共,共五,十,十三,页,页。,药敏,试,试验,方,方法,(f,ngf,),3,琼,琼脂,稀,稀释,法,法,优点,：,：金,标,标准,精,精确,可,可靠,可同,时,时测,定,定多,株,株菌,40株,细菌,生,生长(shngzh,ng),情,情况,可,可查,缺点,：,：,测多,个,个药,时,时劳,动,动强,度,度大,制备,平,平皿,费,费时,费,费力,第三,十,十三,页,页，,共,共五,十,十三,页,页。,药敏,试,试验,(shyn),方法4Etest,法,法,细菌,(x,j,n),生长,区,区,Etest,塑料,(s,lio),条,椭圆,形,形,细菌,生,生长,抑制,区,区,256,128,8,016,判读,抑,抑菌,浓,浓度,MICug/ml),第三,十,十四,页,页，,共,共五,十,十三,页,页。,药敏,试,试验,(shyn),方法4Etest,法,法,优点,连续浓,度,度梯度,，,，与琼,脂,脂稀释,法,法相关,性,性好,影响因,素,素少，,稳,稳定性,高,高,操作简,单,单，省,时,时,缺点：,昂,昂贵,(nggu,),用途：快生长,菌,菌，苛,养,养菌，,厌,厌氧菌,，,，酵母,菌,菌，,分,分,枝,枝杆菌,第三十,五,五页，,共,共五十,三,三页。,评价,(pngji),药物体,外,外抗菌,活,活性的,指,指标,MIC50,MIC90, MIC,均,均值，MIC 范,围,围，R,，,，I，S,MIC50/MIC90,：,：MIC从小,到,到排列,，,，位于,第,第50/90百,分,分位菌,株,株的MIC值,单纯比,较,较MIC50,，,，MIC90,是,是片面(pi,nmin)的,，,，还要,同,同时看,平,平均MIC及MIC,范,范围,同时结,合,合R，I，S,，,，不,同,同药物,血,血浓度,不,不同，,平,平安范,围,围不同,第三十,六,六页，,共,共五十,三,三页。,抗生素,细,菌,菌,人,体,体,RESISTANCE,PHARMACODYNAMICS,INFECTION,IMMUNITY,SIDE EFFECTS,PHARMACOKINETICS,抗生素,、,、细菌,(xjn),、人体,第三十,七,七页，,共,共五十,三,三页。,第三十,八,八页，,共,共五十,三,三页。,Time above MIC,Correlationofserumpharmacokinetics withMIC (susceptibility)ofanorganism,Time above MIC,Time,Antibiotic concentration(ug/ml),2,Drug A,Drug B,A,B,Drug Apresentatconcentration of 2ug/mlfor 50%ofdosinginterval,Drug Bpresentatconcentration of 2ug/mlfor 30%ofdosinginterval,4,6,8,0,第三十,九,九页，,共,共五十,三,三页。,39,*,RelationshipbetweenTime above MICandefficacy in animalinfectionmodels,0,20,40,60,80,100,0,20,40,60,80,100,Time above MIC(%),Penicillins,Cephalosporins,Mortalityafter4days of therapy(%),Craig.,DiagnMicrobiolInfect Dis,1996;,25,:213217,第四十,页,页，共,五,五十三,页,页。,Antibioticconcentration,MIC,Time,Area under thecurveover MIC,24-hrAUC/MIC is correlatedwithoutcome of infection,the magnituderequiredforsuccessandMIC at which thisoccurs becomesthe PD breakpoint,24-hrAUC/MIC,Correlationofserumpharmacokinetics withMIC (susceptibility)ofanorganism,第四十,一,一页，,共,共五十,三,三页。,41,*,Therelationship between,timeaboveMIC,90,and bacteriologicalcure in,S.pneumoniae,(red)and,H.influenzae,(blue)inotitis media andsinusitis,Otitismedia,Sinusitis,TimeAboveMIC, (% of dosinginterval),Bacteriologicalcure(%),0,20,40,60,80,100,0,20,40,60,80,100,Craig,ECCMID 2000, Stockholm,Sweden,第四十,二,二页，,共,共五十,三,三页。,42,*,抗生素,选,选择时,需,需考虑,(kol),的因素,药物,(yow),感染部,位,位(b,wi)浓,度,度,对细菌MIC,结果,微生物,学,学,抗菌机,制,制,抗菌谱,药代动,力,力学,吸收、,分,分布、,代,代谢、,排,排泄,给药方,案,案,药效学,时间/,浓,浓度依,赖,赖型,杀菌剂/抑菌,剂,剂,组织渗,透,透,抗菌时,效,效,临床效,果,果,细菌去,除,除,患者依,从,从性,耐受性,耐药产,生,生,第四十,三,三页，,共,共五十,三,三页。,抗生素,治,治疗,(zh,li,o),失败的,主,主要原,因,因,病人相关原因,依从性差,不适当给药途径,免疫抑制,病灶,药物原因,给药剂量与方式不当,药效学考虑欠妥,药物失活,微生物相关的原因,病原确立错误,治疗中出现耐药,抗菌活性不足,接种效应,其他原因,非感染（误诊）,基础疾病,第四十,四,四页，,共,共五十,三,三页。,抗生素,药,药效学,与,与药代,动,动力学,关,关系,(gu,nx),研究,PK/PD,药代条,件,件,(ti,ojin),下的药,效,效,PARAMETERS,：,PK,：,Cmax,、,AUC,、,T1/2,PD,：,MIC,PK/PD,：,AUC/MIC,Cmax/MIC,TMIC,第四十,五,五页，,共,共五十,三,三页。,抗生素,药,药效学,与,与药代,动,动力学,关,关系,(gu,nx),研究,抗生素,PK/PD,分类,(fn l,i),抗生素分类,PK/PD 参数,药物,时间依赖型,（短PAE）,TMIC,青霉素类、头孢菌素类、氨曲南、碳青霉烯类、大环内酯类、克林霉素、恶唑烷酮类、氟胞嘧啶,时间依赖型,（长PAE）,AUC24/MIC,链阳霉素、四环素、万古霉素、替考拉林、氟康唑、阿齐霉素,浓度依赖型,AUC24/MIC or Cmax/MIC,氨基糖苷类、氟喹诺酮类、daptomycin、酮内酯、甲硝唑、两性霉素B,第四十,六,六页，,共,共五十,三,三页。,抗生素,药,药效学,与,与药代,动,动力学,关,关系,(gu,nx),研究,PK/PD,研究,(ynji,),的应用,给药方,案,案的制,定,定与优,化,化,第四十,七,七页，,共,共五十,三,三页。,抗菌药,物,物合理,(hl),应用的,药,药理学,考,考虑,药动学/药效,学,学参数(cnsh,)与,抗,抗菌效,力,力动,物,物模型,参数,(cnsh,),药物,高于MIC时,间,间青,、,、头孢,、,、碳青,烯,烯、氨,曲,曲、大,环、克,林,林,24hAUC/MIC,氨,氨基糖,苷,苷、氟,喹,喹酮、,阿,阿奇,峰值/MIC,四,四环、,万,万古、,链,链阳,氨基糖,苷,苷、氟,喹,喹酮,第四十,八,八页，,共,共五十,三,三页。,第一大,类,类：,时间依,赖,赖杀菌,作,作用,持续(ch,x)后效,应,应-无或,轻,轻、中,度,度,-LAbxP,、,、Cef、氨,曲,曲、碳,烯,烯类,，,，克林,和,和大环,红,、,、克,、,、四环,在MIC4-5倍时,杀,杀菌率,即,即处于,饱,饱合,杀菌范,围,围主要,依,依赖于,接,接触时,间,间,超过MIC时,间,间是与,临,临床疗,效,效相关,的,的主要,参,参数,第四十,九,九页，,共,共五十,三,三页。,氨基糖,苷,苷类属,于,于(shy,)浓,度,度依赖,性,性抗生,素,素,体内外,研,研究证,明,明Cmax/MIC,为,为10,左,左右为,最,最正确,治,治疗参,数,数,对革兰,阳,阳性、,阴,阴性菌,均,均具有PAE,0.757.5hr,。,。,第二大,类,类,:,氨基糖,苷,苷,(tngg,n),类一日,一,一次给,药,药,第五十,页,页，共,五,五十三,页,页。,低浓度,易,易诱导,适,适应性,耐,耐药,高浓度,不,不易选,择,择(xunz),耐,耐药,高剂量,少,少次数,给,给药可,防,防止耐,药,药,氨基,(nj),糖苷类,一,一日一,次,次给药,第五十,一,一页，,共,共五十,三,三页。,氨基糖,苷,苷类药,物,物每日,一,一次给,药,药,理论依,据,据充分,临床(lnchun,)疗,效,效不变,或,或更好,毒副反,响,响少,更具经,济,济学价,值,值,氨基,(nj),糖苷类,一,一日一,次,次给药,第五十,二,二页，,共,共五十,三,三页。,内容,(nirng),总结,药敏试,验,验。计,算,算错误,率,率：尽,可,可能减,少,少极重,要,要误差(假,敏,敏感率)。时,间,间依赖,型,型TMIC,：,：,内,内酰胺,类,类，大,环,环内酯,类,类。用,药,药剂量,不,不同，,服,服药的,间,间隔不,同,同。不,同,同的药,判,判定标,准,准不同,。,。不同,的,的菌判,定,定标准,也,也不同,。,。肠杆,菌,菌科,绿,绿脓和,非,非肠杆,菌,菌科。,培,培养基,：,：MH(重,复,复性好,，,，低抑,制,制剂，,营,营养(yngyng),好,好)。,某,某些菌,测,测某些,药,药，结,果,果有误,。,。PK/PD,：,：AUC/MIC。,第,第二大,类,类:氨,基,基糖苷,类,类一日,一,一次给,药,药。氨,基,基糖苷,类,类一日,一,一次给,药,药,第五十,三,三页，,共,共五十,三,三页。,