常用仪器分析方法概论

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,Chapter 13 常用仪器分析方法概论,13.2,光度分析法,13.3,色谱分析法,一、仪器分析和化学分析,化学分析：,以物质化学反应为基础。,仪器分析：,以物质的物理或物理化学性质为基础。,仪器分析,化学分析,所用仪器,复杂、昂贵,简单、便宜,灵敏度,高,低,准确度,低,高,分析效率（速度）,高（快）,低（慢）,样品的需求量,少,多,应用面,宽,窄,各自的特点：,二、仪器分析方法的分类,以电磁辐射为测量信号的分析方法，包括光谱法和非光谱法,光学分析法：,依据物质在溶液中的电化学性质而建立的分析方法,电化学分析法：,以物质在两相间（流动相和固定相）中分配比的差异而进行分离和分析,。,色谱法：,质谱法、热分析法、放射分析等 。,其它仪器分析方法：,13.2,光度分析法photometric analysis,分子能级跃迁示意图,选择性吸收：,E,=,hc,/,max,四氮杂苯的吸收光谱,带状光谱与线状光谱,电磁辐射：,E = h, =,hc/,近紫外：200400nm,可见光：400760nm,一、,光度分析的基本原理,物质的颜色,青（480500nm）,白光,（560590nm）黄,蓝（430450nm）,紫,（400430nm）,青蓝（450480nm）,（500560nm）,绿,（590620nm）橙,（620760nm）红,光的互补色示意图,选择性,吸收,可见光,中某波长段的光而显示吸收光的互补色,I,o,I,b,朗伯比尔（,Lambert-Beer,）定律,A = kbc,-,lg,T = A,(吸光度）,透光率,T,吸光系数,k,：,与吸光物质的种类和入射光的波长有关。,k,越大，表示溶液对入射光越容易吸收。,c,以,g,100mL,-1,为单位时,比吸光系数,c,以,mol,L,-1,为单位时,摩尔吸光系数,A=,bc,例、,某待测液用1.0cm吸收池测量时，其透射光强度为入射光强度的1/2，在同样波长下，若用2.0cm吸收池测量该溶液，其透光率和吸光度各为多少？,解：,二、 紫外,-,可见分光光度计,光源,可见区：钨灯（,3601000nm,）,紫外区：氢灯（,200,400nm）,主要部件,单色器,（控制入射光波长）,棱镜或光栅、准直镜、狭缝等组成。,入射狭缝,出射狭缝,准直镜,棱镜,聚光镜,入射狭缝,出射狭缝,准直镜,聚光镜,光栅,色散元件,吸收池或比色皿,材质：光学玻璃（可见区）或石英玻璃（紫外区）,规格： 0.5、1.0、2.0、3.0cm等,注意事项：保护，配套。,紫外-可见分光光度计的类型,单光束、双光束、双波长,三、 测量方法,1、测量条件的选择,显色条件的选择,选择吸收系数较大的物质进行测定,。,波长选择,作吸收曲线，找,max,浓度范围选择,A,=0.151.00(,T,=70-10%),参比溶液的选择,溶剂空白、试剂空白、试样空白,2、测定方法,标准曲线法,维生素,B,12,的标准曲线,直接比较法,A,标,=,k,标,b,标,c,标,A,样,=,k,样,b,样,c,样,k,标,=,k,样,b,标,=,b,样,例、,有一标准Fe,3+,溶液，浓度为6gmL,-1,，其吸光度为0.304。试样溶液在同一条件下测得的吸光度为0.510，求试样溶液中Fe,3+,的浓度。,解：,概念：,A+B,溶剂,A,B,溶剂,A,B,溶剂,原理：,不同物质在固定相和流动相中具有不同的分配系数，两相相对移动时，各组分产生,差速迁移,而分离。,特点：,高灵敏度、高选择性、高效能、分析速度快及应用范围广等优点。,13.3,色谱分析法,chromatography,一、色谱原理和色谱分析中的基本概念,二、色谱法分类,气相色谱,液相色谱,超临界流体色谱,液液色谱,液固色谱,气液色谱,气固色谱,按两相物理状态分：,按固定相形式分：,纸色谱法,薄层色谱法,平面色谱法,柱色谱法,填充柱色谱法,毛细管柱色谱法,按分离机制分：,分配色谱法,吸附色谱法,离子交换色谱法,凝胶色谱（空间排阻）色谱法,亲和色谱法,三、色谱图及常用术语（1）,色谱峰,基线,色谱峰高,h,色谱峰区域宽度,a.,标准偏差,b.,半高峰宽,W,1/2,c.,峰底宽,W,b,保留值,保留时间,t,R,死时间,t,0,调整保留时间,t,R,四、色谱图能提供的信息,色谱峰数目：最少组分数,保留值：,定性,峰高或峰面积：,定量,峰间距及峰宽：柱的分离能力,五、色谱分析仪器,气相色谱仪：,气路系统、进样系统、分离系统,温控系统、检测记录系统,高效液相色谱仪器,高压输液系统,进样系统,分离系统,检测记录系统,