维生素A质量分析

单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,PHARMACEUTICAL COLLEGE,药物分析实,验,药物分析教研室,维生素A的质量分析,具有一个共轭多烯醇侧链的环已烯，具有多个异构体,维生素,A,醇（,Retinol),具有一个共轭多烯醇侧链的环已烯，具有多个异构体,维生素,A,醋酸酯（,Vitamin A Acetate),具有一个共轭多烯醇侧链的环已烯，具有多个异构体,维生素,A,棕榈酸酯（,Vitamin A Palmitate),具有一个共轭多烯醇侧链的环已烯，具有多个异构体,去氢维生素,A,（,A,2,dehydroretinol),具有一个共轭多烯醇侧链的环已烯，具有多个异构体,去水维生素,A,（,A,3,anhydroretinol),Vit A,SbCl,3,CHCl,3,(,无水无醇,),蓝色,紫红色,1.,三氯化锑反应,(Carr-Price,反应,),维生素,A,的鉴别,注意：反应应在无水无醇条件下进行,因水可使三氯化锑水解成,SbOCl,，而乙醇可与碳正离子作用使正电荷消失，反应不能进行。,2.,UV,Vit A,Vit A,3,维生素,A,在无水乙醇,盐酸,溶液中溶解,立即进行,UV,扫描,在,360nm,处有一最大吸收峰,.,如,1.,水浴加热,5,分钟，,迅速冷却,此过程发生脱水反应,扫描时出现三个吸收峰,Vit A,Vit A,3,维生素,A,去水维生素,A,最大吸收峰向长波方向移动：,红移,一、实验目的,1、掌握Uvmini-1240型紫外-可见分光光度仪的使用方法。,2、掌握维生素,A胶囊,的鉴别,、检查及含量测定。,3、掌握,紫外分光光度法光谱法鉴别,。,4,、,掌握,紫外分光光度,三点校正,法进行含量测定。,二、,主要仪器与试药,维生,素,A,软胶囊，无水乙醇，三氯化锑，盐酸等。,Mini-1240,型紫外,-,可见分光光度仪、石英比色皿,、,50ml,容量瓶，,1ml,刻度注射器。,精密仪器，小心！,三,、维生素A胶囊鉴别试验,（一）紫外扫描鉴别,1.取维生素A胶囊一粒，用1ml注射器吸取内容物，,加入一,滴,到,50ml容量瓶中，加无水乙醇定容到50ml，再向瓶中滴入一滴盐酸，混匀，获得供试液,（15,g/ml,）,。,2.在紫外分光光度计中设定扫描波长,4,00,3,00nm，以无水乙醇为参比溶液，对供试液进行扫描，应在326nm处出现吸收峰，摄图。,3.取供试液78ml于小试管中，于70浴中加热5min，迅速冷却至室温，照上法进行扫描，则应在348、367和389nm处有三个尖锐的吸收峰，且在332nm处有较低的吸收峰或拐点，摄图。,（二）三氯化锑鉴别,取维生素,A,胶囊一粒，用,1ml,注射器吸取内容物，加入一滴到,50ml,干燥容量瓶中，加入三氯甲烷定容到,50ml,，混匀。取此溶液,2ml,于干燥小试管中，加入三氯化锑,1.5ml,，即显蓝色，水浴温热，渐变为紫红色。,干燥！,四,、装量差异检查,取10粒维生素A胶囊，,分别,精密称定其重量，用1ml注射器将内容物抽出，用剪刀剪开胶囊壳，于25ml小烧杯中，,用乙醚逐个浸洗3次,，将洗涤液弃至指定容器，用电吹风吹干胶壳残留的乙醚，置于分析天平，准确称量壳的重量。计算每粒胶囊的内容物重量及平均重量，按下表判断其装量是否合格。（,不能多于1粒超标,）,平均装量,装量差异限度,0.3g以下,10%,0.3g或0.3g以上,7.5%,仪器的使用程序,1,、光度值（,吸光度的测定：,A,）,按“,1”,，,goto WL,，选定需要的波长，,enter,用蒸馏水调零（,Auto zero,）后,放样品比色皿，直接读数。,2,、光谱（吸收曲线的绘制）,按“,2”,，,enter,设定波长,：,400300nm,，快或非常快（可忽略微小的吸收峰），先,用溶剂“,校基线,F1”,（,一次性调零，耐心等待！,），然后放,入,A,配制液,（,15,mg/L,），按,Star,开始测定。按,F2,查看峰波长和吸收值。,1,、,ABS/T-ABS,2,、波长选择,-400300,3,、,A,的范围,:01,4,、速度：非常快,四、实验讨论,1.单色光不纯对吸收曲线有何影响？,2.为何要在,max,处进行定量分析？,3.同一溶液在不同仪器上测得的吸收曲线有无不同？,仪器的使用方法,开机：打开电源，仪器初始化，约,3min,完成，然后预热大约,0.5h,。,方法菜单：,1,，光度值,2,，光谱,3,，定量,4,，选购程序包,5,，系统设计,-,输入项目号,参数,IC,包 文件发送,PC,控制,按“,Return”,返回此页面,工作状态,六、实验结果,1、鉴别：维生素,A,吸收光谱上有三个吸收峰：,？,nm、,？,nm、,？,n,m,；,且在,?,nm处有较低的吸收峰或拐点，摄图。,记录药名、厂家、批号！,三、含量测定,1,、取,10,粒维生素,A,胶囊，精密称定其重量，用,1ml,注射器将其内容物抽出，置于小试管中。,2,、用剪刀剪开胶囊壳，于小烧杯中，用乙醚清洗,3,次，将洗涤液弃至指定容器，用电吹风吹干胶囊壳残留乙醚，置于分析天平，准确称量壳的重量。,3,、将上述小试管中维生素,A,在涡旋震荡器混匀,30s,，取一滴置于,100ml,容量瓶，分析天平准确称量其重量，用环己烷定容至刻度。,4,、以环己烷为空白溶液，分别在,300,、,316,、,328,、,340,、,360nm,处测定维生素,A,环己烷溶液的吸光度值。,5,、计算各吸光度与波长,328nm,处吸光度的比值，若吸收峰波长在,328nm,处，且所测各波长吸光度比值不超过规定的,0.02,，则将,A328,带入公式计算含量。若所测各波长吸光度比值超过规定的,0.02,，计算,A328,（校正）,=3.52,（,2A328-A316-A340,），则将,A328,（校正）带入公式计算含量。,