药物对离体豚鼠回肠收缩的作用

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,药物对离体豚鼠回肠收缩的作用,浙江大学医学院生理教研室,张 雄,目 的,学习离体小肠平滑肌的制备和灌流。,观察小肠平滑肌的自律性收缩，理解其原理。,观察药物acetylcholine(Ach、,乙酰胆碱,），histamine(His、,组胺,），,BaCl,2,分别对离体豚鼠回肠平滑肌的作用，并以atropine(,阿托品,)、chlorpheniramine(氯苯那敏、,扑尔敏,）为工具药，初步分析以上药物的作用原理。,原 理（1）,胃肠平滑肌收缩的,自动节律性,（慢波理论：Cajal细胞的生电性钠泵活动的结果）。,原 理（2）,乙酰胆碱：,M胆碱能受体激动药,。Ach与M受体结合，使平滑肌Ca,2+,通道开放，Ca,2+,内流,，肌浆Ca,2+,，平滑肌收缩幅度,增高,。,阿托品：,M胆碱能受体阻断药,。阿托品与平滑肌细胞膜M受体结合，阻断乙酰胆碱与M受体结合，,阻断,乙酰胆碱与M受体的激动作用。,原 理（2）,组胺：,激动平滑肌细胞膜,H1,受体，通过激活G蛋白-磷脂酶C系统，使细胞内Ca,2+,增高,，导致,平滑肌收缩,。,扑尔敏,：,H1受体阻断药,。扑尔敏与平滑肌细胞膜H1受体结合，阻断组胺与H1受体结合，从而阻断组胺对H1受体的激动作用。,原 理（3）,氯化钡：,肌肉兴奋剂。Ba,2+,经钙通道进入胞浆，使肌浆Ba,2+,，平滑肌收缩幅度增高，但泵出障碍；另一方面BaCl,2,能兴奋胆碱能受体，使平滑肌收缩幅度增高,。,材 料,豚鼠1只：WT为300 g左右,麦氏浴槽，生物信号采集系统，张力换能器。,台氏液，10,-2,g/L乙酰胆碱、1 g/L硫酸阿托品、10,-2,g/L组胺，10,-3,g/L扑尔敏、10 g/L BaCl,2,溶液。,方 法,1.实验装置准备：,打开恒温水浴,37,-,加,台氏液,于麦氏浴槽中,-,95%O,2,+5%CO,2,持续通气（气泡一个个逸出为宜）。,2.标本准备：,击昏豚鼠,-,开腹,-,减取回肠,-,冲洗内腔,-,截取肠段,-,肠段两端,对角穿线,-,固定于麦氏浴槽和换能器上。,3.实验记录：,打开配置（药物对离体豚鼠回肠的作用）-,零点,设置-调节换能器,张力2 g,-,稳定,10-30分钟（基线和收缩幅度稳定）,找到盲肠，在离回盲部,1cm,处剪断，取出回肠约,10cm,左右一段，置于盛有冰冷台氏液的培养皿中，,冲洗干净，,将回肠剪成,1-1.5cm,的几小段。,标本准备（1）,标本准备（2）,取一段肠管置于盛有台氏液的培养皿中，在其,两端对角处,分别用缝针穿线，并打结。一端系于,浴槽固定钩,上，另一端系在,张力换能器,的悬臂梁上。,换能器,肠管,观察项目,记录肠段,基础张力，收缩张力，收缩频率,。,加入,10,-2,g/L,Ach,0.2ml,，观察并记录曲线，作用明显时,换液,。,重复以上,Ach,剂量，待收缩到最高点时加入,1 g/L,阿托品,0.2ml,，观察曲线，此时不换液，待曲线基本稳定后，再加入相同量的,Ach,，观察并记录收缩曲线，,换液。,加入,10,-2,g/L,组胺,0.3ml,，作用明显时迅速,换液。,预先加入,10,-2,g/L,扑尔敏,0.2 ml,，,5 min,后（不换液）加入同量,组胺,，观察并记录收缩曲线，,换液。,加入,10 g/L,BaCl,2,溶液,1ml,，当作用达到最高点，加入,1 g/L,阿托品,0.2 ml,，观察并记录收缩曲线。,实验结果,Ach,换液,Ach,阿,Ach,换液,His,换液,扑,His,Bacl,2,阿,(每次,换液后稳定15min),稳定20min,注意事项,注意保持肠管通畅，勿使其封闭。,不要把药物直接滴加到回肠上。,每次加的台氏液量保持相等。,加的台氏液量必须预先加热到37,。,药物作用明显后，尽早冲洗。,每次,换液后稳定1020min。,实验结果（1）,曲线描记：标上加药时间点，药物名，洗脱时间点。,对曲线进行测量：基础张力，收缩张力。填入表格。,实验结果（2）,表3.药物对离体豚鼠回肠平滑肌张力的影响,组别 标本数 基础张力（g）收缩幅度（g）,乙酰胆碱,阿托品+乙酰胆碱,组胺,扑尔敏+组胺,BaCl,2,BaCl,2,+阿托品,实验报告,针对实验数据，进行结果描述,总结,Ach,、阿托品、,His,、扑尔敏、,BaCl,2,分别对离体豚鼠回肠有什么作用。,2.,讨论和结论,分析,Ach,、,阿托品、,His,、,扑尔敏、,BaCl,2,对离体豚鼠回肠平滑肌的作用机理。,3.,参考文献,如：,1,陆源，夏强,.,生理科学实验,.,浙江大学出版社，,2004,，,245-247,Thank you!,