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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2022/1/8,#,水稻茎线虫检疫鉴定,水稻茎线虫检疫鉴定,第1页,一、背景由来,水稻茎线虫,1912,年首次在,孟加拉,发觉,大家称之为,Ufra,、,DakPora,。,水稻茎线虫检疫鉴定,第2页,二、地理分布,水稻茎线虫当前主要分布于,亚洲,和,非洲,水稻生长区,包含,孟加拉、缅甸、泰国、乌兹别克、印度、菲律宾、印度尼西亚、巴基斯坦、越南、柬埔寨、埃及、苏丹、南非、阿联酋、马达加斯加、古巴,等国家。,我国当前未见分布报道,水稻茎线虫检疫鉴定,第3页,三、寄主,水稻,(,Oryzae sativa,),是该线虫最主要寄主,另外,该线虫还寄生,稻属,植物其它一些种。,外寄生于水稻,生殖只能在稻株内进行,主要借居于,花梗基部,、,茎杆末节以上,以及,颖片之内,,这些地方大多有包含,卵到成虫各个阶段,大量线虫。,水稻茎线虫检疫鉴定,第4页,四、危害症状,世界发病区平均减产水稻,30,,个别地域更严重。,如,印度尼西亚,水稻受害减收,50,,泰国水稻少收,20,90,,还有少数地域水稻受害后绝收,中国未见报道。,田间早期症状表现为病株幼叶基部捻卷,出现白色或浅绿色斑点,叶片和叶鞘产生褐色斑,叶缘卷缩,叶尖弯曲,叫鞘扭曲。病株抽穗后基部通常卷曲,不能坚固,或只有顶部小穗能产生正常稻粒,花轴和枝梗为暗褐色,穗和剑叶扭曲。有些病株在下部节位可能肿大,并产生不规则分支,,穗包,在叶鞘内不能抽出或仅个别抽出。,水稻茎线虫检疫鉴定,第5页,四、危害症状,在发病水稻植株发育各个阶段,都可发觉水稻茎线虫卵、幼虫和成虫。在水稻秧苗移栽后几天,在花芽顶端就可发觉该线虫,而且随植物生长到新形成组织器官上营外寄生生活。在水稻花期和,抽穗,期,线虫主要在茎柔嫩部位,叶鞘、茎秆、未,授粉,扭曲谷粒和畸形花梗中活动。被为害植株矮化,叶片常萎缩。最终一个节间上方叶鞘和枝芽扭曲,蜷曲。总花梗蜷曲,花梗产生未授粉小穗。在线虫所处部位以上一至几个茎节上产生特征性病变。,水稻茎线虫检疫鉴定,第6页,四、危害症状,Padwick(1 950),和,Webster(1972),观察描述,依据是否出现圆锥花序,水稻受害后可分两类经典症状,一类是肿大,Ufra,,其花序包在叶鞘里,不能抽穗,受侵染茎个别枝强烈增多;另一类是成热,Ufra,,花序能抽出,但只有顶部小穗能产生正常稻粒花轴和枝梗为暗褐色,下部花不坚固,这主要是因为后期花序受害。重病植株生长仃滞,严重矮化,叶片萎蔫。,Cox,和,Rahman(1980),又提出了另一类,Ufra,这一类花序完全能抽出,不过有很多瘪粒。,水稻茎线虫检疫鉴定,第7页,四、危害症状,本病症状最显著是在穗期,但在水稻生育早期也可见到。病株类似条纹花叶病毒,褪色条纹纵贯全叶,伴随时间增加而愈益清楚。全叶捻转或呈严重畸形,有时幼叶基部出现皱缩,然后褪变为白绿色。大田病状常在移栽后两个月出现,苗期叶片褪绿和变形,但病状常隐蔽不显著,易与健株混同,需俟一段时间过后,才有少数褐色污斑在叶和叶鞘上出现。很快,污斑变黑而上部节间秆也转为暗褐色。至抽穗期,因为被害时间和受侵程度不一样,病株各异。上部叶片是主要被害个别,抽穗后,症状非常显著,极易识别。,分型以下:,水稻茎线虫检疫鉴定,第8页,四、危害症状,膨肿型,线虫破坏始于穗形成早期,这种病穗紧裹叶鞘里面,不能抽出,呈纺锤形肿大,剥去叶鞘,可见病穗已变为褐色,并捩曲歪扭,不坚固。花各部也退化难辨。,成熟型,穗形成早期已过,线虫开始破坏。这种病穗,能够从叶鞘中抽出,并能结成一些正常谷粒,尤其是靠近穗顶部,但穗下部小花全不受精,或仅有个别小花坚固。花梗呈暗褐色到黑色。,中间型,穗仅个别抽出,显示细弱而不坚固。病株常在被坏处,形成份枝,即在同一叶鞘内伸出,2,4,根扭曲穗。其中有只有主穗形成穗,大小正常。,水稻茎线虫检疫鉴定,第9页,五、病原菌,水稻茎线虫,学名:,Ditylenchus angustus,(,Butler,,,1913,),Filipjev,。,英文名,:Rice stem nematode,。,分类地位,:,线虫门,侧尾腺纲,垫刃目,Tylenchida,,粒线虫科,Anguinidae,,茎线虫属,Ditylenchus Filipjev,,,1936,1,、分类地位,水稻茎线虫检疫鉴定,第10页,五、病原菌,稻茎线虫一生中一样经过卵、一龄幼虫,(,卵中渡过,),、二龄幼虫、三龄和四龄幼虫及成虫几个阶段,是经典线虫生活史型。线虫在病稻草、稻茬、种子及混在种子里病残碎片中越冬,并成为初侵染源。水稻播种出苗后,潮湿条件下,稻茎叶表面有水时,带到田里病原线虫就从土壤往上爬,入侵茎杆相关部位,为害生长点附近叶和穗,据报道,在水稻移栽后几天内,生长点顶芽上就发觉了该病原线虫,并逐步蔓延到叶鞘、茎种子周围幼嫩茎里,产生各种病害症状即使稻株各部都能发觉线虫,但它们只外寄生在各部幼嫩组织内寄生。,2,、生物学,水稻茎线虫检疫鉴定,第11页,五、病原菌,在干旱和稻靠近成熟时,病原线虫卷曲停顿取食并变得不活跃,形成间生态,聚集成棉花团状,进行休眠,以渡过不良坏境。休眠该种线虫在干燥条件下能活,15,个月以上,待潮湿条件出现或水稻生长季中,它们马上恢复活动,在水中能存活,4,个月。病原线虫入侵寄主最适温度是,20,一,30,。,水稻茎线虫检疫鉴定,第12页,五、病原菌,普通在耕种后,5-7,月份、,11,月份,线虫就在寄主植物内繁殖。,Buttler(1936b),报道线虫一季可繁殖,3,代,每条雌虫能产卵,50-100,个。,Miah,和,Bahr(1977),观察到在温度为,28-30,、相对湿度超出,80%,条件下有利于线虫感染、病害发生及其繁殖。一龄幼虫在卵内完成,整个发育阶段从二龄幼虫开始只须,15,天;在人为条件下,整个生活史则需,24,天完成。在普通条件下,假如卵直接产生在湿茎中,二龄幼虫就不用再花时间去寻找宿主,这么整个发育阶段就有可能缩短。四种幼虫可依据其体长不一来进行区分。,8,月份,植株处于未成熟阶段而在水分充分条件下,成虫数量到达顶峰,经过繁殖,成虫可由,1,增加到,3000,。,Catling,等(,1979,)报道在一水稻茎杆中有,30000,条线虫,而且在寄主植物上可看到其生活史各个阶段。,水稻茎线虫检疫鉴定,第13页,五、病原菌,水稻茎线虫运动和发育都需要高湿度,从水稻播种开始,假如一生中雨水都多,湿度大,有利于病原线虫繁殖、运动和入侵寄主,病害发生就会加重,干旱季节,发病就轻。国外资料表明,在孟加拉国,一年种几季水稻,在雨季中长水稻受害重,秋稻受害轻,固为线虫群体密度还没有到达高峰时,水稻就成热收获了。而,1,月到,4,月生长第三季稻,因生长久是当地干旱季节,几乎不受感染。另外,线虫在冬天和春天能活下来群体数量越多,下一个生长季节就很活跃,加重病害发生。,水稻茎线虫检疫鉴定,第14页,六、传输路径,本病原可从秧苗移植传到大田,再靠田间排水、灌水及雨水,由一块田传到另一块田。在潮湿条件下,病健株间彼此接触摩擦也可传输,收获后病田内根茎、病株残体为下一年初侵染源。病种子也能传输该线虫。,水稻茎线虫检疫鉴定,第15页,1,、适用范围,稻种,中水稻茎线虫,稻草,中水稻茎线虫,稻草编织物,(袋、绳、席等)中水稻茎线虫,七、检疫判定方法,水稻茎线虫检疫鉴定,第16页,2,、原理,水稻茎线虫,Rice stem nematode,, 学名:,Ditylenchus angustus,(,Butler,,,1913,),Filipjev,,线虫门,侧尾腺纲,垫刃目,粒线虫科,茎线虫属。外寄生于水稻,生殖只能在稻株内进行,主要借居于花梗基部、茎杆末节以上以及颖片之内,这些地方大多有包含卵到成虫各个阶段大量线虫。水稻受害后叶面出现浅绿色斑点,叶缘卷缩,叶尖弯曲,整张叶片扭曲或呈畸形,严重时花穗捻转或包在叶鞘内不能抽出,小穗不孕,形成空粒。,七、检疫判定方法,水稻茎线虫检疫鉴定,第17页,2,、原理,本病主要由稻种内潜伏线虫作远距离传输,经过引种传带到新稻区,还可经过患病稻草作远距离传输。土壤中残留线虫以及带线虫病稻草、稻茬、种子或混在种子里病残碎片为当地第二年发病主要起源。它侵染循环、传输路径、寄主范围、生物学和形态学特征是该检疫判定方法依据。,水稻茎线虫检疫鉴定,第18页,3,、仪器、用具,生物显微镜,体视显微镜,凹玻片,试管,载玻片,盖玻片,加热板(,80,o,C,以下),烧杯(,500ml,、,1000ml,),漏斗,漏斗架,研钵,培养皿,剪刀,跳针,干燥器,冰箱,水稻茎线虫检疫鉴定,第19页,3,、仪器、用具,打孔器,酒精灯,乳胶管,纱布,止水夹,指形管,玻璃纤维(,3mm,5mm,),水稻茎线虫检疫鉴定,第20页,、药品,指甲油,TAF,固定液(,40%,甲醛,7ml,、三乙醇胺,2ml,和蒸馏水,91ml,混合而成),乳酚油(苯酚,20ml,、乳酸,20ml,、甘油,40ml,和蒸馏水混合而成),石蜡,水稻茎线虫检疫鉴定,第21页,5,、现场检疫,5.1.1,抽样方法:,5.1,抽样,棋盘式、五点式、随机抽样,5.1.2,抽样数量,5.1.2.1,稻种,按总件数,5%,20%,抽样,最低抽检,10,件。取样数量为:,10 kg,以下取,2 kg,;,11 kg,100 kg,取,4kg,;,101 kg,500 kg,取,6 kg,;,501 kg,000 kg,取,8 kg,;,1001 kg,kg,取,10 kg,;,kg,5000kg,取,12kg,;,5001kg,10000kg,取,14kg,;,10001,100000kg,每增加,5000kg,增取,2kg,;不足,5000kg,余量记取,2kg,。,水稻茎线虫检疫鉴定,第22页,按总件数,5%20%,抽样,每次检验不得少于,10,件且不少于,500,根。取样数量为:,50,根以下取,5,根,,51,根,200,根取,10,根;,201,根,1000,根取,15,根;,1001,根,5000,根取,20,根;,5001,根以上,每增加,5000,根增取,5,根样品,不足,5000,根余量计取,5,根样品。,5,、现场检疫,5.1.2.2,稻草及其编织品,5.2,外观症状检验,5.2.1,水稻种子检验,首先要注意检验褐色畸形种子,其次要看稻种内是否混有稻草或其它水稻残体,同时注意是否夹带泥土等,搜集后与采样样品一并送试验室进行检验。,水稻茎线虫检疫鉴定,第23页,5,、现场检疫,5.2.2,稻草及其编织品检验,注意检验叶鞘颜色异常、叶缘卷缩、叶尖弯曲、整张叶片扭曲或呈畸形、草秆短小稻草及其编织品。搜集上述可疑植物材料及所夹带土壤等与采集样品一并带回试验室检验。,水稻茎线虫检疫鉴定,第24页,6,、试验室检验,抽样所得种子,可将稻种去壳,利用,漏斗法分离,颖壳中可能带有线虫。分离所得线虫制成暂时玻片,在显微镜下观察,并依据形态判定特征深入判定。,6.1,稻种检验方法,对于畸形、不饱满种子,可直接在体视显微镜下解剖,检验有没有线虫。如有线虫,制成暂时玻片,在显微镜下观察,并依据形态判定特征深入判定。,贝,曼,漏,斗,法,水稻茎线虫检疫鉴定,第25页,*,浅盘贝曼漏斗法分离线虫过程介绍,水稻茎线虫检疫鉴定,第26页,*,浅盘贝曼漏斗法分离线虫过程介绍,网盘,漏斗,乳胶管,止水夹,试管,面巾纸,水稻茎线虫检疫鉴定,第27页,* 浅盘贝曼漏斗法分离线虫过程介绍,水稻茎线虫检疫鉴定,第28页,* 浅盘贝曼漏斗法分离线虫过程介绍,水稻茎线虫检疫鉴定,第29页,* 浅盘贝曼漏斗法分离线虫过程介绍,水稻茎线虫检疫鉴定,第30页,* 浅盘贝曼漏斗法分离线虫过程介绍,水稻茎线虫检疫鉴定,第31页,6,、试验室检验,6.2,稻草及其编织品检验方法,将采得样品适当处理成小段,用漏斗法分离。,搜集所分离线虫,在体视显微镜下观察,并挑取若干条线虫至载玻片上,制成暂时玻片,在显微镜下观察,并依据形态判定特征深入判定。,水稻茎线虫检疫鉴定,第32页,7,、形态判定特征,雌虫,:,普通不肥大,,不弯成螺旋形,长,0.6mm,1.5mm,,有可达,2mm,;表皮有很细环纹,侧区有四至六条刻线;口针细小,多数长度为,7m,11m,;中食道球有或无瓣,偶然无显著中食道球,峡部与后食道腺之间无缢缩,后食道腺短或长,不覆盖、短覆盖或长覆盖肠;单生殖腺、前伸,卵巢短或长,有时伸达食道区或转折,卵母细胞一行至二行排列,子宫柱状部有四排细胞(每排四个细胞),后阴子宫囊有或无。,7.1,茎线虫属判别特征,水稻茎线虫检疫鉴定,第33页,7,、形态判定特征,雄虫,:精巢不转折,精细胞大(通常直径,3m,5m,),交合伞不伸到尾端,延伸至尾长四分之一至四分之三处。交合刺窄细,基部宽大,其上具特殊突起。两性尾形相同,呈长圆锥形到近柱形,偶然丝状,多数,(尾长,肛门或泄殖腔处体宽,)为。寄主不形成虫瘿。,幼虫,:在总形态方面与成虫相同。食道按百分比长于成虫食道。,水稻茎线虫检疫鉴定,第34页,7.2,水稻茎线虫形态判定特征,7.2.1,测记值,雌虫:,I,800,l200,微米;,a,50,62,;,b=69,;,c,1824,;,c,5,2,5,4,;,V,78,80,;,st=l0-1l,微米。,雄虫:,L,700-l180,微米;,a,40-55,;,b=6,8,;,c,1926,;,st=10,微米;,sp,1621,微米。,7,、形态判定特征,水稻茎线虫检疫鉴定,第35页,7,、形态判定特征,7.2.2,形态描述,雌虫:,体细长,较直,侧带区有刻线,4,条,外侧较显著。唇区低,前端平圆,不缢缩。口针强壮,,9-11m,长,针锥较细,稍短于针干,基部球小而清楚,前缘向后顷斜,其宽度约,2,微米,中食道卵圆形,肌肉发达,食道狭部向后渐渐膨大,连接食道后部。食道腺近末端分小叉,略盖肠前端。生殖系统为前生卵巢。单生殖腺,向前直伸,卵母细胞单列,受精囊长袋状;后子宫囊长度为肛阴距,50,67,;阴门斜裂,其长度为阴门处体宽,1,2,。尾呈均匀收细圆锥形,约为肛径,5,倍长。尾近末端急收成尖锐指状,似一个尾尖突。,水稻茎线虫检疫鉴定,第36页,7,、形态判定特征,雄虫,体形除生殖系统和尾部形态外与,雌虫,相同,交合伞端生,交合刺垫刃型,,1621m,长,伸至尾末端,引带,6-9m,长。,幼虫,与成虫相同,只是,食道,要比成虫长。,水稻茎线虫检疫鉴定,第37页,8,、结果判定,符合第,7,条形态特征判定可判定为水稻茎线虫,水稻茎线虫检疫鉴定,第38页,八、防治,1,、农业防治,毁掉病株是疫区最有效治理办法,病区也能够在干旱季节犁田,将稻根翻到表面曝晒,大量稻根用人工清理出田外烧掉,这么作能够降低下一季侵染基数。,轮作或休闲也是有效防除办法。利用稻茎线虫只寄生稻属作物特点,轮种其它非寄主植物,1,年或让病田休闲,1,年,就能够饿死田间土壤中病原线虫。如水稻与芥菜轮作可显著降低茎线虫量;黄麻栽种在受过线虫感染田块中也能减轻,Ufra,症状。播种或移栽深水稻要比日常延迟,2-3,个星期或等洪水退后进行,这么其侵染性就会减轻,25-28%,或者更多,当然采取这种防治办法受一定条件限制。,水稻茎线虫检疫鉴定,第39页,八、防治,在疫区建立无病留种田也是比较经济而必要办法,这种方法最少能够减轻为害。当然能有适宜抗病品种就更加好,实际上,病害防治中选育和选取抗病品种应该被列入综合防治办法中。,2,、化学药剂防治,尽管化学防治也是有效,但其较贵,危险性大,另外,因为化学药剂使用较困难,如若在洪水期间使用又较危险,所以深水稻中化学农药使用极有限,但不论怎样,许多化学药剂对,Ufra,引发病害都比较有效。假如在播种前或移苗前使用呋喃丹,3G1.0kg/ha,比不施用可减轻病害,42-63%,,可增产,38-59%,。依据,Rahman(1985),方法是,用药前把田水落到,35,厘米深,水稻移栽后第,7,天和稻分蘖期间各用,1,次药,直接把配好拌细土药撒入田间。,详细药剂是,:,水稻茎线虫检疫鉴定,第40页,八、防治,1.,每公顷用,3%,呋喃丹,1.5,千克;,2.,每公顷用,50%,线畏磷,10,千克;,3.,每公顷用,10%,涕灭威,3,千克;,4.,每公顷用,10%,乙拌磷,10,千克。,另一个方法是,将秧苗在杀线虫剂中进行蘸根处理,这种方法相对实惠而安全。秧苗可经过,3%Miral,和,7.5-10%,、,2.5-10%,Tecto 40FL,混合溶液蘸根而有效控制,Ufra,病害。,水稻茎线虫检疫鉴定,第41页,
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