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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,第,36,讲,微生物的培养与应用,1,考点一微生物的实验室培养,1,消毒和灭菌的辨析,2,3,4,5,6,清错破疑,接种方法操作的注意事项,(1),稀释涂布平板法的缺点：稀释涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目低。这是因为当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。,(2),平板划线法纯化大肠杆菌时不同阶段灼烧接种环的目的不同：,第一次操作：杀死接种环上原有的微生物。,7,每次划线之前：杀死上次划线后接种环上残留的菌种,使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端。,划线结束后：杀死接种环上残存的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。,8,角度微生物的实验室培养,1,(2015,课标全国,卷,),已知微生物,A,可以产生油脂,微生物,B,可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：,(1),显微观察时,微生物,A,菌体中的油脂通常可用,_,染色。微生物,A,产生的油脂不易挥发,可选用,_(,填,“,萃取法,”,或,“,水蒸气蒸馏法,”,),从菌体中提取。,9,(2),为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物,B,的单菌落,可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样,并应选用以,_,为碳源的固体培养基进行培养。,(3),若要测定培养液中微生物,B,的菌体数,可在显微镜下用,_,直接计数；若要测定其活菌数量,可选用,_,法进行计数。,10,(4),为了确定微生物,B,产生的脂肪酶的最适温度,某同学测得相同时间内,在,35,、,40,、,45,温度下降解,10 g,油脂所需酶量依次为,4 mg,、,1 mg,、,6 mg,则上述三个温度中,_,条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度,应围绕,_,设计后续实验。,11,解析,：,(1),油脂可被苏丹,染液或者苏丹,染液染成橘黄色或红色。由于不易挥发,故采用萃取法。,(,2),脂肪酶的微生物,B,可以分解脂肪,故可以以脂肪为碳源的固体培养基进行培养,不产生脂肪酶的微生物无法生存。,(3),微生物,B,的菌体数,可在显微镜下用血细胞计数板直接计数,活菌用稀释涂布平板法。,(4)45,降解,10g,油脂所需酶量最大,故酶活性最小；,40,温度下降解,10g,油脂所需酶量最小,故酶活性最大,围绕,40,温度进行后续实验设计。,12,参考答案：,(1),苏丹,(,或苏丹,),萃取法,(2),油脂,(,其他合理参考答案也可,),(3),血细胞计数板稀释涂布平板,(,其他合理参考答案也可,),(4)45,40,13,2,为了获得,胡萝卜素产品,某小组开展了产,胡萝卜素酵母的筛选与色素提取实验。请回答下列问题。,(1),实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是,_,；为了减少灭菌后器皿被污染,灭菌前应该,_,。,(2),为了筛选出酵母菌,培养基中添加了青霉素,其目的是,_,。,14,(3),如图是灭菌锅及其局部剖面示意图,图中甲、乙、丙指示的依次是,_,。,(,填序号,),15,安全阀、放气阀、压力表,放气阀、安全阀、压力表,安全阀、放气阀、温度表,放气阀、安全阀、温度表,(4),为了将分离到的菌株纯化,挑取了菌落在,3,块相同平板上划线,结果其中一块平板的各划线区均未见菌生长,最可能的原因是,_,。,16,(5),为增加,胡萝卜素提取量,在研磨酵母细胞时,添加石英砂的目的是,_,；研磨时,_(,填,“,需要,”,或,“,不需要,”,),添加,CaCO,3,理由是,_,。,17,解析：,(1),微生物培养时常用的灭菌方法有高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌等,培养皿常用高压蒸汽灭菌、干热灭菌。将培养皿放入灭菌锅之前通常用牛皮纸或报纸包扎避免灭菌后的再次污染。,(2),青霉素能毁坏细菌的细胞壁并能抑制细菌的繁殖,因此添加青霉素可抑制细菌的生长。,(3),乙连接软管为排,(,放,),气阀,甲为安全阀,丙是压力表。,(4),三块平板有两块平板长有菌落,说明含有菌株并可在培养基上生长；而其中一块未见菌落,说明菌株死亡,因此,应是在接种过程中接种环灼烧后未足够冷却,使菌株因温度过高被,18,被杀死。,(5),石英砂有助于研磨充分。,CaCO,3,用于中和酸性物质,胡萝卜素较耐酸,因此不需添加。,参考答案：,(1),干热灭菌和湿热灭菌,(,高压蒸汽灭菌,),用牛皮纸,(,报纸,),包扎器皿,(2),抑制细菌,(,放线菌,),生长,(3),(4),接种环温度过高,菌被杀死,(5),有助于研磨充分不需要,胡萝卜素较耐酸,19,考点二微生物的筛选,筛选分解尿素的细菌与分解纤维素的微生物的比较,20,21,角度微生物的分离,3,(2014,课标全国,卷,),植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题：,(1),分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由,3,种组分组成的复合酶,其中的葡萄糖苷酶可将,_,分解成,_,。,(2),在含纤维素的培养基中加入刚果红,(CR),时,CR,可与纤维素形成,_,色复合物。用含有,CR,的该种培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的,_,。,22,(3),为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基,(,成分见下表,),：,23,据表判断,培养基甲,_(,填,“,能,”,或,“,不能,”,),用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是,_,；培养基乙,_(,填,“,能,”,或,“,不能,”,),用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是,_,。,24,25,参考答案：,(1),纤维二糖葡萄糖,(2),红透明圈,(3),不能液体培养基不能用于分离单菌落不能培养基中没有纤维素粉,不会形成,CR,纤维素红色复合物,即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌,26,4,(2014,课标全国,卷,),为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：,(1),该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是,_,；,27,(2),该小组采用平板划线法分离水样中的细菌,操作时,接种环通过,_,灭菌,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是,_,。,(3),示意图,A,和,B,中,_,表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。,28,(4),该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中,_,的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高,_,的利用率。,29,解析：,(1),在涂布接种前,随机选取若干灭菌后的空白平板先行培养一段时间,目的是检测培养基平板灭菌是否合格,不能留有杂菌。,(2),用平板划线法分离水样中的细菌,操作时,接种环通过灼烧灭菌,在第二次及以后的划线时,从上一次划线末端开始划线,目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落。,(3),稀释涂布平板法接种培养后得到的结果应为图,B,。,(4),振荡可以使细菌分散,更有利于细菌利用培养液中的营养物质,并且可以使培养液中的溶解氧增多。,30,参考答案：,(1),检测培养基平板灭菌是否合格,(2),灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落,(3)B,(4),溶解氧营养物质,31,32,1,无菌操作技术包括消毒和灭菌,消毒包括煮沸消毒、巴氏消毒、化学药剂消毒和紫外线消毒等；灭菌包括灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。,2,培养基的制备包括计算、称量、溶化、灭菌、倒平板等步骤,倒置平板的目的是防止培养皿盖上的水滴滴入培养基造成污染。,3,大肠杆菌的纯化包括平板划线法和稀释涂布平板法。平板划线法要求多次划线,稀释涂布平板法要求菌液要充分地稀释。,33,4,微生物的计数要求制作多个平板,且每个平板上能长出,30,300,个菌落。,5,尿素分解菌和纤维素分解菌的分离都运用了选择培养基,前者所用的培养基中尿素是唯一的氮源,后者所用的培养基中纤维素是唯一的碳源。,34,
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