直接抗人球蛋白试验阳性的意义课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,直接抗人球蛋白试验阳性的意义,?,红细胞抗原的自身抗体,?,近期输血的受血者血浆中的同种抗体与输入的供,血者红细胞抗原反应,?,输入的供血者血液或血液成分中的抗体与受血者,红细胞抗原反应,?,孕妇体内的同种抗体通过胎盘致敏胎儿红细胞上,?,抗菌药物（如青霉素）的抗体与药物致敏的红细,胞相结合,直接抗人球蛋白试验阳性的意义?红细胞抗原的自身抗体?近期输血,?,红细胞膜受某些药物（以头孢菌素类最多见）,疗法而改变，导致蛋白质（包括免疫球蛋白）,非特异性地被红细胞膜所吸收,?,对给予药物（如奎尼丁及非那西丁）的反应形,成药物,-,抗药物复合体，使补体成分、,IgG,抗体,（占少数）与红细胞相结合,?,为减少器官及骨髓移植患者的,T,细胞群体，应,用有嗜异性抗体存在的马抗人淋巴细胞球蛋白,时,?,非抗体介导的丙球蛋白过高患者,?红细胞膜受某些药物（以头孢菌素类最多见）疗法而改变，导致蛋,直接抗人球蛋白试验阳性的评价,?,血液标本的收集,?,初步的血清学研究,?,进一步的研究,直接抗人球蛋白试验阳性的评价?血液标本的收集?初步的血清学研,自身免疫性溶血性贫血,自身免疫性溶血性贫血,一、概念,?,免疫性溶血,免疫性溶血是指由于免疫反应而使红细,胞破坏加速，寿命缩短的过程。,?,溶血性贫血,溶血性贫血是由于红细胞破坏增多、增,速，,超过造血补偿能力范围，所发生,的一种贫血。,?,自身免疫性溶血性贫血,是由于机体免疫功能异常，产生了抗自,身红细胞的抗体，使红细胞破坏加速造,成的溶血性贫血，在后天性溶血性贫血,中多见。,一、概念?免疫性溶血免疫性溶血是指由于免疫反应而使红细胞破坏,二、分类,免疫性溶血性贫血可分为,三,类,?,同种免疫性溶血性贫血,?,自身免疫性溶血性贫血,?,药物引起的免疫性溶血性贫血,二、分类免疫性溶血性贫血可分为三类?同种免疫性溶血性贫血?自,直接抗人球蛋白试验阳性的意义课件,直接抗人球蛋白试验阳性的意义课件,直接抗人球蛋白试验阳性的意义课件,自身免疫性溶血性贫血可分为四种主要类型：,1,、,温抗体型自身免疫溶血性贫血,（,WAIHA,）,原发性的,（自发性）,继发性的,（与淋巴瘤、系统性红斑狼疮、,癌症或药物处理有关）,2,、,冷凝集素综合征,（,CAS,）,原发性的,（自发的）,继发性的,（与淋巴瘤支原体肺炎、传染性,单核细胞增多症,有关）,自身免疫性溶血性贫血可分为四种主要类型：1、温抗体型自身免疫,直接抗人球蛋白试验阳性的意义课件,?,混合型自身免疫性溶血性贫血,（,MTA,）,原发性的,（自发的）,继发性的,（与系统性红斑狼疮、淋巴瘤有关）,?,阵发性寒冷性血红蛋白尿,（,PCH,）,原发性的,（自发性的）,继发性的,（与梅毒、病毒感染有关）。,?混合型自身免疫性溶血性贫血（MTA）原发性的（自发的）继发,三、血清学特征,三、血清学特征,温抗体型自身免疫溶血性贫血,（,WAIHA,）,常见的自身免疫性溶血性贫血，,约占,所有免疫性溶血性病例的,48,70%,，,与温反应性自身抗体有关,温抗体型自身免疫溶血性贫血（WAIHA）常见的自身免疫性溶血,WAIHA,典型的血清学特征,1,、,直接抗球蛋白试验,使用单特异性,IgG,及抗,C3,试剂时，可有,三种,形式的反应：,单独,IgG,反应,、,单独,C3,致敏、,IgG+C3,致敏，,WAIHA典型的血清学特征1、直接抗球蛋白试验使用单特异性I,2,、,在血清中的自身抗体,是,IgG,型的，与所有的红细胞在,间接抗人球,蛋白试验,中都呈,阳性,反应。血清中的游离抗体量,非常少。,3,、,放散液中,可检到,IgG,抗体。,4,、,自身抗体特异性,主要是针对,Rh,抗原复合物,，但只有在得到,稀有表现型红细胞，如,D,阴性，或,Rh,null,时才能明,确,2、在血清中的自身抗体是IgG型的，与所有的红细胞在间接抗人,冷凝集素综合征（,CAS,）,CAS,（也称冷凝集素疾病,CHD,),，,是与,冷反应自身抗体有关的溶血性贫血中最常见,的一种类型，约占所有免疫性溶血性病例的,16-32%,。可有,急性,和,慢性,两种情况。,冷凝集素综合征（CAS）CAS（也称冷凝集素疾病CHD)，是,CAS,典型的血清学特征,1.,直接抗球蛋白试验,补体,是红细胞上,唯一,能被检出的蛋白。多,特异性抗球蛋白试剂中抗,C3d,（,C4d,）成分是,造成,DAT,阳性的原因。,CAS典型的血清学特征1.直接抗球蛋白试验补体是红细胞上唯一,直接抗人球蛋白试验阳性的意义课件,2,血清,在,4,温,度,测,定,与,免,疫,性,溶,血,有,关,的,IgM,冷反应性自身凝集素效价常大于,1,，,000,以上,；在体外用超过,32,温度盐水悬浮红细,胞时则很少有反应。若在反应介质中加入,30%,牛白蛋白时，,70,%,有临床意义的样本,将在,37,反应,2血清在4温度测定与免疫性溶血有关的IgM冷反应性自身凝,3,、,放散液,若红细胞在,37,收集和洗涤，细胞上没有,免疫球蛋白，放散液中不会有反应发生。,3、放散液若红细胞在37收集和洗涤，细胞上没有免疫球蛋白，,?,4,、,自身抗体的特异性,?,最,常,见,与,CAS,有,关,的,特,异,性,为,抗,I,。,较不常见的抗,i,特异性则与感染性单核,球症有关。,在及稀有的情况下，血清中冷反应性,自身凝集素具有,Pr,特异性或其他特异性。,?,?4、自身抗体的特异性?最常见与CAS有关的特异性为抗I。较,阵发性寒冷性血红蛋白尿（,PCH,）,是,DAT,阳性的自身免疫性溶血性贫,血症最少见的类型，成人中很少见，儿,童中占,32%,。,较,为,常,见,PCH,是急性暂时的情况，继发于病毒感染症，,尤其在幼童当中。它也能出现在老年人,中，为一特发性的慢性病。,阵发性寒冷性血红蛋白尿（PCH）是DAT阳性的自身免疫性溶血,PCH,典型的血清学特征,1,、,直接抗球蛋白试验,PCH,中的自身抗体是,IgG,，它和,IgM,冷,自身凝集素一样，在身体较冷的部位，,PCH,的,IgG,自身抗体与红细胞起反应，使,补体成分,（,C3,及,C4,）与红细胞发生,不可逆,的结合，然后在较温暖的部位,IgG,分离。,所以直抗阳性是补体造成的。,PCH典型的血清学特征1、直接抗球蛋白试验PCH中的自身抗体,2,、,血清免疫球蛋白类型,在,PCH,中,IgG,自身抗体，习惯上称为,双相,性溶血素,，因为它在低温与红细胞相结合，在,37,时,使,致,敏,红,细,胞,溶,血,。,Donath,Landsteiner,(,DL,),试验是诊断这种疾病的基础。,2、血清免疫球蛋白类型在PCH中IgG自身抗体，习惯上称为双,3,、,释放液免疫球蛋白类型,由于补体成分是循环红细胞上唯一存在的,球蛋白，因此从,PCH,病人红细胞上得到的洗脱,液一般是没有活性的。,3、释放液免疫球蛋白类型由于补体成分是循环红细胞上唯一存在的,4,、,自身抗体的特异性,PCH,的自身抗体大部分呈现抗,-,P,特异性，,与所有的红细胞（包括病人自己的红细胞）起,反应，与罕见,p,或,Pk,表现型不反应。亦有例子,报告具有抗,-,I,、抗,-,i,和抗,-,Pr,等特异性。,4、自身抗体的特异性PCH的自身抗体大部分呈现抗-P特异性，,直接抗人球蛋白试验阳性的意义课件,直接抗人球蛋白试验阳性的意义课件,?,病人的红细胞是抗体还是补体致敏？,?,血清中有抗体吗？,如果有，这些抗体是凝集,还是非凝集性抗体？,体外溶血吗？,最适反应温度是暖（,37,）还是冷（,4,）？,是自身抗体还是同种抗体？,?,洗脱液中有抗体活性吗？,?病人的红细胞是抗体还是补体致敏？?血清中有抗体吗？如果有，,四、具有自身抗体的患者的血清学检查,（一）、,输血前试验中可能存在的问题,1,、,冷型反应性自身抗体能引起自身凝集,反应，致使,ABO,及,Rh,分型试验结果发,生矛盾。自身抗体亦凝集血清分型试,验所用的,A,型和,B,型试剂红细胞。,四、具有自身抗体的患者的血清学检查（一）、输血前试验中可能存,2,、,被球蛋白致敏的红细胞在接触到高蛋白含,量的商品化的抗,-,Rh,血清试剂时，可发生,自发性的凝集反应，致使,Rh,定型试验的,结果发生矛盾。,2、被球蛋白致敏的红细胞在接触到高蛋白含量的商品化的抗-Rh,3,、,血清里存在游离的自身抗体时，不可能获,得在血清学上完全相配合的血液。这种情,况下要考虑,自身抗体可能掩盖有临床意义,的同种抗体的存在,。倘若时间允许，在输,血前应测定是否存在同种抗体,3、血清里存在游离的自身抗体时，不可能获得在血清学上完全相配,解决,ABO,定型中的问题,1,、采集标本后，立即将标本放入,37,并在试,验前用温盐水（,37,45,）洗涤红细胞。,2,、用硫醇类试剂（,2-Me,、,DTT,等）处理红细,胞,。,3,、反定型中，可将血清和,A,、,B,红细胞在,37,预热进行试验。,4,、用吸收后血清进行试验（自身吸收的或用,纯合子,O,型红细胞吸收的,解决ABO定型中的问题1、采集标本后，立即将标本放入37,解决,Rh,定型中的问题,1,、由冷自身抗体造成可用解决,ABO,定型问题,的方法来避免。,2,、由,IgG,致敏的红细胞，试验必须要进行适当,的对照试验。,或使用使用有盐水反应活性,的试剂。,解决Rh定型中的问题1、由冷自身抗体造成可用解决ABO定型问,（二）,在有自身抗体存在时检测同种抗体,1,、,有温型反应性抗体存在时检测同种抗体,?,自身吸收,?,异体吸收法,?,稀释技术,（二）在有自身抗体存在时检测同种抗体1、有温型反应性抗体存在,直接抗人球蛋白试验阳性的意义课件,2,、,有冷型反应性抗体存在时检测同种抗体,?,用病人本身红细胞在,4,吸收血清,?,试验应严格掌握在,37,?,禁止使用小牛白蛋白和其它增强介质,?,使用,EDTA,抗凝血浆或加,EDTA,的血清,?,使用抗,-IgG,试剂，不用多特异性抗蛋白血清,2、有冷型反应性抗体存在时检测同种抗体?用病人本身红细胞在4,五、自身免疫溶血性贫血病人的输血指南,?,为患,WAIHA,病人选择血液,?,为患,CAS,病人选择血液,?,为患,PCH,病人选择血液,五、自身免疫溶血性贫血病人的输血指南?为患WAIHA病人选择,hc72)$XSNIDy,toje94+&#VQLGBwrmhc72)$XSNIDy,toje94+*#VQLGBwrmhc72)$XSNI,Dy,toje940*#VQLGBwrmhc72)$XSNIDy,toje950*#VQLG,Bwrmhc72)$,XSNIDy,tojea50*#VQ,LGBwrmhc72),$XSNI,Dy,tojfa50*#VQLGBw,rmhc72)$XSN,IDy,tojfa50*#VQLGBwrmhc72)$XSNIDy,to,fa50*,#VQL,GBwrmhc72)$,XSNIDy,tp,fa,50*#V,QLGBw,rmhc72)$XSN,IDy,upkfa50*#,VQLG,Bwrmhc72)$X,SNID,zup,fa5,0*#VQ,LGBwrmhc72),$XSNI,zup,a50*#V,QLGBwrmhc72)$XSNJE,zup,kfa50*,#VQL,GBwrmhc72)$,XSOJE,zup,fa5,0*#VQ,LGBw,rmhc72)$XTO,JE,zup,kfa50*#,VQLGBwrmhc72)$YTOJEzupkfa50*#,VQLG,Bwrmhc72)%,YTOJE,zup,fa5,0*#VQ,LGBwrmhc72,)%YT,OJE,zup,kfa50*#,VQLG,Bwrmhc72-%,YTOJE,zup,fa,50*#V,QLGBw,rmhc73-%YT,OJE,zup