Waters检测器培训ppt课件

Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,检测器,Waters LC School 培训教材,检测器Waters LC School 培训教材,对检测器的要求,高灵敏度,可重现的设置,合适的带宽,快速或可变的时间常数,宽的线性响应,容易使用及保养,自我诊断功能,对检测器的要求高灵敏度,检测器的种类,检测器的种类,衡量检测器的指标,灵敏度 S=R/Q,R是检测器响应值的增量,Q是样品量的增量,噪音 没有样品时检测器的最大输出信号,漂移 检测器在一段时间内响应值的变化,线性动态范围最大线性相应与最小检出限之比,最小检测限样品产生两或三倍于噪音信号时的浓度,信噪比S/N,注意最小检测限不是一个单纯的检测器指标。它实际上是评价整个色谱系统的指标，包括了色谱系统、分离机理、色谱柱在内的综合性指标，信噪比亦如此,衡量检测器的指标灵敏度 S=R/Q,紫外-可见光检测器,基于样品池(S)中的样品对光产生吸收，有信号差,如是可变波长检测器，还有分光系统(光珊),紫外-可见光检测器基于样品池(S)中的样品对光产生吸收，有信,Beers Law-BEER定律,光能量,P,0,=透过溶剂的光能量,P=透过样品的光能量,光通量(透过率%)T=P/P,0,吸光度 A=-log(T)=log(P,0,/P),吸光度=单位吸光度 流动池长度 溶液浓度,即 A=abc,Beers Law-BEER定律光能量,同紫外检测器灵敏度有关的因素,信号强度(S),从BEER定律可看出,样品的种类,样品浓度及进样的体积,检测池的长度,所使用的波长，检测器的时间常数,噪音(N),流动相,所使用的波长，灯的能量,检测器的时间常数,非检测器因素-电噪音，泵脉动等,同紫外检测器灵敏度有关的因素信号强度(S),紫外检测器的溶剂影响,不同种类溶剂有其截止波长,溶剂的质量好坏对其截止波长有影响,为何溶剂质量不好?,含紫外吸收的杂质,溶解在其中的氧气,缓冲液溶质的紫外吸收,紫外检测器的溶剂影响不同种类溶剂有其截止波长,背景吸收的影响,背景吸收减少线性范围,许多溶剂产生背景吸收,背景吸收的影响背景吸收减少线性范围,示差折光效应,示差折光效应的危害,产生假的紫外吸收变化,定量误差，光谱图不准确,梯度时严重的基线漂移,梯形池设计（曾用于440/441，490及486检测器）,最初的专利设计,示差折光效应示差折光效应的危害,Waters 2487 检测器,用于2487的消除示差折光效应的设计,专利的梯形狭缝设计，消除示差折光效应,同时；进一步提高灵敏度及线性范围,Waters 2487的其他特点：,双通道、高灵敏度,仪器内集成比色皿位置,多种功能，胜任更复杂的工作,MaxPlot，RatioPlot，灯优化软件等,Waters 2487 检测器用于2487的消除示差折光效应,梯形狭缝,(TaperSlit,)流动池,Patent applied for,梯形狭缝(TaperSlit)流动池Patent app,不同种类流动池的比较,普通的圆柱形池,梯形池,梯形狭缝池,进口,出口,进口,出口,进口,出口,不同种类流动池的比较普通的圆柱形池梯形池梯形狭缝池,486的面板及操作,按此键后可调波长,(190nm-600nm),波长数值显示在面板下面一行,按此键褉环改变面板上面一行显示的内容,Absorbance:吸光度,Reference:参比池的能量,Sample:样品池的能量,调正满刻度量程,对积分输出无作用,调正滤波参数,常设为1.0,自动调零,486的面板及操作按此键后可调波长,486的Diagnostics操作,按此键后，进入Diagnostics状态,面板下面一行显示ddd，按相应的数字可进行不同的校正，常用的如下(详细参见操作手册),4，重新校正波长,12，显示检测器(486)的版本号,13，显示及修改IEEE地址(2-29)，缺省值及非IEEE操作是0,15，正常参比及样品池位置,16，转换参比及样品池位置，常用于制备,20，设置关灯时间,21，设置积分输出的偏置,26，设置扫描参数起、止波长，步宽(nm)，停留时间,27，和26号参数一起工作，完成扫描,486的Diagnostics操作 按此键后,2487的面板及操作,回车键,分屏显示键,选项移动键,主屏幕,方法调用，A/B通道参数显示切换,设置及诊断,单/双波长方式切换，自动调零,运行/停止键,第二功能键,监视色谱图,2487的面板及操作回车键分屏显示键选项移动键主屏幕方法调用,2487的显示面板,通道,吸光度,灯开/关,波长,灵敏度,下一画面,运行时间,自控/遥控,诊断开/关,键盘锁开/关,单/双波长,Shift,开/关,2487的显示面板通道吸光度灯开/关波长灵敏度下一画面运行时,光电二极管矩阵检测器,简称PDA(Photodiode Array Detector),兼顾紫外检测器及可见分光光度计的信息,在收集色谱图的同时，得到光谱图,色谱峰的纯度鉴定，色谱峰的确认,任意波长的再处理,对PDA的要求,色谱的灵敏度,光谱的灵敏度,光谱的分辨率,光电二极管矩阵检测器简称PDA(Photodiode Ar,光电二极管矩阵检测器示意图,光电二极管矩阵检测器示意图,Waters的光电二极管矩阵检测器,全新的光路设计,不用聚光镜及各种消色差镜，以减少光路损失,反相梯形光束流动池，用以消除示差折光效应,灵敏度及分辨率的同时提高,分辨率：1.2nm,噪音：1.5,10,-5,AU,Waters的光电二极管矩阵检测器全新的光路设计,996与传统光学单元的比较,996与传统光学单元的比较,示差折光效应的影响,示差折光效应的影响,从硬件上消除示差折光效应,带来的好处,不损失灵敏度及分辨率,不会因错选参比波长而损失色谱及光谱信息,只需设定如下参数即可操作,波长范围,分辨率,每秒采集的光谱数,操作极为简便,不需费神选择参比波长及其带宽,从硬件上消除示差折光效应带来的好处,Waters 996 的操作,996需同2019一起工作,所有的操作在2019上完成,Waters 996 的操作996需同2019一起工作,示差折光检测器,Differential Refractive Index Detector,示差折光检测器Differential Refractive,Waters 410及2410的日常操作,调整检测器内、外(如有柱温箱)温度,以5ml/min的流速“purge”参比池五分钟,不接色谱柱！,视室温变化大小，需较长时间的平衡,参数设置按文献值或实验决定,通常410可以在白天结束工作后不关机，节省第二天的平衡时间，保持0.1到0.5ml/min的流速,Waters 410及2410的日常操作调整检测器内、外(如,显示,参数指示灯,Waters 410及2410的面板,显示参数指示灯Waters 410及2410的面板,410及2410操作：键盘及指示灯,按下键盘上的某些键，会有相应的指示灯亮，分别表示,%Full Scale屏幕上的显示为记录仪输出满刻度量程的百分比,SENS屏幕上的显示为目前的灵敏度设置,SCALE FACTOR屏幕上的显示为目前的刻度因子，10mV 输出起作用,EXT1/EXT2屏幕上的显示为外部柱温箱温度，或可设置温度,INT屏幕上的显示为检测器内部温度,2ND FUNC按下此键(蓝色)可选键上方指示的第二功能，其指示灯在 ENTER键的旁边,REMOTE表示410在其他控制器的控制下,410及2410操作：键盘及指示灯按下键盘上的某些键，会有相,示差检测器的注意事项,不能做梯度实验,最大的池耐压是 100 psi,流速范围是 0.3-10 ml/min.,示差检测器的注意事项不能做梯度实验,荧光检测器,Fluorescence Detector,滤光片分类,近通 Short pass-低于特定点的所有波长可以通过,远通 Long pass-高于特定点的所有波长可以通过,带通 Band pass-在特定范围内的所有波长可以通过,荧光检测器Fluorescence Detector 滤光片,Waters 474 的特点,可调波长荧光检测器,双扫描发射波长及激发波长均可扫描,在扫描模式下(Scan),高灵敏度水的RAMAN峰S/N大于200,可编程 时间-波长 时间-增益,在编程模式下(Program),Waters 474 的特点可调波长荧光检测器,474的操作,显示在一般(Normal)操作模式下，474有如下显示,Mode显示474目前的操作模式，Normal、Program、Scan,Signal显示当前荧光发射信号的强度,Response响应设置的大小，相当于滤波(Filter)常数,EX激发波长(nm),EM发射波长(nm),Gain增益设置的大小，加在光电倍,增管上的电压，大时灵敏度高,Atten衰减设置的大小，对10mV信号,的衰减，积分信号不起作用,键盘 很多键有多个功能，需用Shift 键控制,474的操作显示在一般(Normal)操作模式下，474有,电化学检测器,Electrochemical Detector,随着化合物被氧化或还詟，产生正比于浓度的电流,电化学检测器Electrochemical Detector,Waters 464 的面板,464的面板有显示屏、键盘及指示灯,指示灯表示,Cell On:464在工作状态，电极上加了电压,Run:464在工作状态，不断测定池子的电流并输出,Potential Overload:不能保持电极上的电压，一般是池及其连接部分有问题,Current Overload:电流超过满量程,Communication Error:目前不用,Shift:按下Shift键，这时可用第二功能,Waters 464 的面板464的面板有显示屏、键盘及指示,Waters 464 的操作,开机后，可在SELECT MODE下用蒉键选五种模式之一,DC 直流模式，常用于高灵敏度检测,SCAN 扫描模式，可得到样品的电位-电流图,PULSE 脉冲模式，可优化某些样品的相应，如分析离子，该模式下稳定性好而灵敏度稍低,SYSTEM 模式，对仪器进行设置,CALIBRATION 模式，对仪器自检或校正,Waters 464 的操作开机后，可在SELECT MOD,电导检测器,Conductivity Detector,电导检测器Conductivity Detector,Waters 432的操作,根据流动相的本底电导设定基础电压,电导检测器是温度敏感检测器，注意恒温,电导检测器是压力敏感检测器，注意选用无压力波动的溶剂输送系统,用一般色谱泵时注意，如系统反压低1000psi时，加额外的压力阻尼装置,Waters 432的操作根据流动相的本底电导设定基础电压,