动物细胞工程复习课课件

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,动物细胞工程专题复习,侯集中学高二生物组,马靖,动物细胞工程专题复习侯集中学高二生物组 马靖,1,高考考点,1.动物的细胞培养与体细胞克隆（A）,2.细胞融合与单克隆抗体（A）,高考考点,2,动物细胞,工程,动物细胞培养,细胞融合与,单克隆抗体,核移植与,体细胞克隆,动物细胞动物细胞培养细胞融合与核移植与,3,动物细胞,培养,含义,原理,过程,条件,应用,细胞的结构及物质组成,细胞增殖,植物组织培养,细胞,物质的跨膜,运输,细胞癌变,酶的特性,原理,过程,培养基的性质和成分,结果,用途,基因工程,动物细胞含义原理过程条件应用细胞的结构及物质组成细胞增殖植物,4,考点一：动物细胞培养,、无菌、无毒的环境.如何控制？,、必备营养成分，应注意什么问题？,、温度和PH？,、气体成分有哪些？分别有什么作用？,1.原理,2.材料选择及原因,3.一般过程,4.培养条件,5.主要应用,剪碎组织,胰蛋白酶处理,单个细胞,细胞培养,幼龄动物,取动物器官和组织,动物细胞培养技术,是其他动物细胞工程技术的基础,因为其细胞生命力旺盛，分裂能力强，分化程度低。,细胞增殖,考点一：动物细胞培养、无菌、无毒的环境.如何控制？1.原理,5,动物细胞培养的条件:,1）无菌无毒 的环境：,适宜的温度：,人和哺乳动物细胞最适温度为,36.5,0.5,。,适宜的酸碱度：,PH：7.2-7.4,液体合成培养基,：（糖、氨基酸）、促生长因子、（水、无机盐、微量元素）,等；通常还需加入,血浆、,血清等,天然成分。,4）气体环境：,2）营养：,3）温度和pH：,“95O,2,+5,CO,2,”,的混合气体培养箱,。,氧气是细胞代谢必须的；,CO,2,维持培养液的PH。,对培养液和所有培养用具无菌处理；培养液中添加,抗生素,防止培养过程中污染；定期更换培养液以清除代谢产物，防止对培养细胞造成危害。,使用时需要注意的问题？,为何动物细胞培养必须加入血清？,动物细胞培养的条件:1）无菌无毒 的环境： 适宜的温度：人,6,拓展探究：,问题1、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？,问题2：,为什么用胰蛋白酶处理？,为什么用胰蛋白酶处理而不用胃蛋白酶？,用胰蛋白酶处理不会把所培养的细胞消化掉吗？,问题3：如何区分原代培养与传代培养；细胞株与细胞系？,问题4：动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有何独特之处？,问题5：动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？,问题6：目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常在10代以内，为什么？,扩大细胞与培养液的接触面积，利于细胞吸收营养,。,分装前的初次培养为原代培养，分装后的培养为传代培养。,遗传物质未发生改变的为细胞株，遗传物质发生改变的为细胞系。,主要成分：（葡萄糖、氨基酸）、（水、无机盐）、维生素和动物血清等。独特之处有：1、液体培养基 2、成分中有动物血清等,10代以内的细胞遗传物质不改变，保持正常二倍体核型。,动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，蛋白酶处理动物组织，可以使动物组织细胞间的蛋白质和细胞外的其他成分酶解，获得单个细胞。,不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体,动物细胞培养的最适PH值为7.2-7.4，胰蛋白酶作用的适宜PH为7.2-8.4，胃 蛋白酶适宜PH为2，胃蛋白酶在PH为7.2-7.4的动物细胞培养中无活性。,长时间处理当然会损伤细胞，控制好时间。,拓展探究：问题1、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？问,7,动物细胞与,组织培养,含义,原理,过程,条件,应用,细胞的结构,及物质组成,细胞增殖,植物组织培养,细胞,物质跨膜,运输的方式,细胞癌变,酶的特性,原理,过程,培养基的性质和成分,结果,用途,基因工程,动物细胞与含义原理过程条件应用细胞的结构细胞增殖植物组织培养,8,例一某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：,（1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其他培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量,_ _,。,（2）在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是,_ _,。,细胞培养应在含5CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是,_ _,。,（3）在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长,_,药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更,_ _,。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用,_ _,处理。,（4）为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的,_ _,。,动物细胞能力提升:,多,停止,多,胰蛋白酶,抗生素,血清可以补充合成培养基中缺乏的物质(如促细胞生长因子等),维持培养液的pH,例一某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物,9,考点二：动物体细胞核移植与克隆动物,1.本节的基础知识考点有哪些？,2.可以与其他哪些章节联系进行整合？,基础考点知识有：,核移植的概念、种类、原理、过程、应用和存在问题,考点二：动物体细胞核移植与克隆动物1.本节的基础知识考点有哪,10,取供体细胞传代培养10代以内的细胞.为什么？,用的是去核的减数第二次分裂中期细胞（,M,中期,）为什么？,激活方法：,激活目的：,促融方法：电刺激,胚胎移植至代孕受体内,妊娠、分娩,体细胞核移植流程图,供体：优质高产奶牛,受体：普通奶牛（卵母细胞的采集与培养）,1.体积大，易操作。2.含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件。,遗传性状与供体牛完全相同吗？,取供体细胞传代培养10代以内的细胞,11,动物体细胞核移植与克隆动物,胚胎工程,卵细胞的形成,与体外受精,早期胚胎的培养,胚胎移植,与试管动物的比较,基因工程,动物细胞培养,动物体细胞核移植与克隆动物知识体系,概念,存在问题,种类,原理,过程,应用,动物体细胞核移植与克隆动物胚胎工程卵细胞的形成早期胚胎的培养,12,注射抗原,B淋巴细胞,骨髓瘤细胞,细胞融合、筛选,杂交瘤细胞,细胞培养,筛选，继续培养,足够数量的、能产生特定抗体的细胞群,体外培养,注射到小鼠腹腔,单克隆抗体,1.梳理本考点知识的考点内容有哪些？,2.就此单克隆制备的过程图,你认为哪些地方可以作为考点进行设问考查?,3.你认为本节内容常与哪些章节的,内容联系进行综合考查?,考点三：动物细胞融合与单克隆抗体的制备,注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞细胞融合、筛选杂交瘤细胞,13,例二上图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。,( l ),技术是单克隆抗体技术的基础。,( 2 )根据培养基的用途分类，图中 HAT 培养基属于,培养基，目的是,。在培养的过程中需要添加无机盐，但要注意营养物的,，以保证生命活动的正常进行。,( 3 )单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是,。,( 4 )动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用,。,( 5 )选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的,特点，又具备淋巴细胞的,特点。,( 6 )淋巴细胞是由动物体,中的,细胞分化、发育而来。,( 7 )杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是,。,（8）若用15N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞，放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是,。,动物细胞培养,选择性,筛选出杂交瘤细胞,种类和数量,特异性强，灵敏度高,灭活的病毒,分泌特异性抗体,在体外大量增殖,骨髓,造血干,主动运输,核糖体 内质网 高尔基体 细胞膜,例二上图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。动物细胞培养选择性,14,动物细胞工程,动物细胞融合,动物细胞培养 （,基础,）,生产单克隆抗体,概念,过程,应用,应用,细胞核移植,概念,过程,应用,构建知识网络,原理,过程,条件,应用,细胞,植物组,织培养,酶的特性,基因工程,胚胎工程,基因工程,植物体细胞杂交,免疫学知识,基因工程,动物细胞工程动物细胞融合动物细胞培养 （基础）生产单克,15,3右图为细胞融合的简略过程，请据图回答：,（1）若A、B是植物细胞，在细胞融合前可用,除去细胞壁得到,；D杂种细胞能培育成杂种,植株，说明植物细胞具有,。A、B到C的过程中常用,的物理方法是,，融合完成的标志,。,（2）若A、B是植物细胞，则形成的D细胞还要应用,技术把D培养成植株。,（3）若A、B是动物细胞，一般取自,_,，,然后用,使其分散开来；由A、B到C的过程中，常用的不同于植物细胞融合的手段是,_,，所形成的D称为,_,，A、B融合为C的过程说明了细胞膜具有,。,（4）若该过程是制备单克隆抗体，A为小鼠效应B细胞，那么，在获得此细胞之前，小鼠已经被注射了,。注射后小鼠身体发生了相应的免疫反应，生成了,_,， 图中B为,_,。,（5）若该过程仍是制备单克隆抗体，在A、B到C的过程中，所形成的C有,种，用来培养的D细胞应该是,_,。从中选择出它的方法是,_,培养，获得D后，常用的培养方法是培养液中培养和,_,。,纤维素酶和果胶酶,原生质体,全能性,电刺激,产生新的细胞壁,植物组织培养,幼龄动物的组织、器官或胚胎,胰蛋白酶,灭活的病毒诱导,杂种细胞,流动性,抗原,效应B细胞、记忆细胞、抗体,3,杂交瘤细胞,用特定选择培养基,小鼠腹腔内增殖,骨髓瘤细胞,综合训练：,3右图为细胞融合的简略过程，请据图回答：纤维素酶和果胶酶原,16,