第二章检查和鉴别..

,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,第二章,药物的纯度检查和鉴别方法,药品质量,真实性,纯度,品质优良度,性状 鉴别,检查,含量测定,一、药物的性状,二、鉴别实验,三、检查药物的纯度检查,四、药物杂质检查方法和其限量计算,五、一般杂质检查,六、特殊杂质检查,一、药物的性状,外观(色泽,臭味)Description colour 状态,溶解度 Solubility,物理常数 Physical Constants,熔点,Melting point,吸收系数,(UV)Absorptivity Coeffcient,比旋度,：手性药物,晶型:,粉末X-射线衍射谱,初溶T,终溶T,二、,鉴别实验,Identification Test,1.,红外光谱,：原料药首选,2.紫外光谱：制剂,，吸收度比值,3.色谱法：,TLC,4.化学（沉淀/呈色）反应,三、检查药物的纯度检查,杂质,（Impurity）,：,指影响药物稳定性和疗效，甚至对人体有害的物质。,一般杂质,自然界分布较广，较易引入的杂质。,多数是无机杂质，Cl,-,、SO,4,2-,、As、Fe、重金属、酸、碱、水分、炽灼残渣等。检查方法收载于中国药典,附录,里。,特殊杂质,制备、贮存过程中产生的，非其他药物均能产生的。多数为有机杂质,收载在中国药典正文,有关物质项,原料、中间体、降解产物,原料、中间体、副产物、异构体、有机溶剂残留等（生产过程中引入）,降解产物、氧化产物（生产、贮存中产生）,特殊杂质,四、药物杂质检查方法和其限量计算,指药物中允许杂质存在的最大量，通常用百分之几或百万分之几（ppm）来表示,杂质限量,（,L）：,（一）,对照法,限度试验,Limit Test,例：,NaCl中Br,-,的检查,供试管 NaCl样 2.0g+H,2,O10ml,对照管 标准KBr 1.0mg Br,-,/ml 1.0ml,各加HCl 3d，氯仿1.0ml，加2%氯胺T液 3d，氯仿层若显色，不得比对照液更深。,限量0.05%,操作注意点：平行原则，用纳氏比色管,特点：,不需知道杂质准确含量,。,p16 例,2-1,2-2,2-3,2-4,例：,检查某药物中的砷盐，取标准砷溶液2ml（每1ml相当于1,g的As）制备标准砷斑，砷盐限量为0.0001，应取供试品的量为,A.0.20g B.2.0g C0.020g,D.1.0g E.0.10g,解：已知：,c,1,g/ml110,6,g/ml,V,2ml,L,0.0001%,（,二,）,灵敏度法,供试品液中加入试剂，一定反应条件下，不得有正反应出现，判断符合规定。,例：,NaBr中I,-,检查,特点：不需对照品,（,三,）,吸收度限度法,供试液的吸收度不得超过一定值,例：盐酸去氧肾上腺素中酮体检查,2.0mg/ml A,0.20,(,310 nm,),特点：不需对照品,五、一般杂质检查,氯化物 溶液澄清度与颜色,硫酸盐 溶液酸碱度,铁盐 炽灼残渣,重金属,干燥失重,砷盐,水分,（,一,）,氯化物,（Chlorides）的检查,ChP（2005）二部附录 A,供试管,样品x g+水 25ml,对照管,标准NaCl液10,g Cl,-,/ml x ml,各加稀硝酸10ml，加水至40ml，加入AgNO,3,试液1ml，加水至刻度，于暗处放置5，比浊，在黑色背景下由上向下观察。,（二）,硫酸盐,（sulfates）检查法,ChP（2005）二部附录 B,供试管,样 x g+水,对照管,标准K,2,SO,4,100,g,SO,4,2-,/ml x ml,加水至40 ml，加稀HCl 2ml，25%BaCl,2,5ml，然后加水至50ml刻度，放置10分钟，比浊。,（三）,铁盐,（iron salt）检查法,ChP（2005）二部 附录 G,硫氰酸盐法,n=16,供试管,样x g,对照管,标准Fe,3+,10,g/ml,x ml,加水25ml，稀HCl 4ml，过硫酸铵50mg，30%硫氰酸铵液3ml，加水至50ml，比色。,加,过硫酸铵,目的：,（四）,重金属,（Heavy Metals)检查法,ChP（2005）二部 附录 H,重金属：,实验条件,下能与,硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质,，如Ag、Pb、Hg、Cu、Bi、Cd、Sb、Sn、As、Ni、Co等。,测定以,Pb,为代表。,Chp.2005有四种方法，常用1和2,第一法,适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物，最常用。,硫代乙酰胺法,供试管,供试液 25ml,对照管,标准铅 10,g Pb/ml x ml+,pH3.5,醋酸盐缓冲液 2ml,各加硫代乙酰胺试液 2ml，放置2min，比色。,第二法,适用于含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸及乙醇的有机药物。,炽灼残渣法,重金属与芳环、杂环易形成牢固价键，必须先破坏使其游离。,（五）,砷盐,（,Arsenic）检查法,ChP2005.附录 J,古蔡氏法,（Gutzeit）,原理：,遇,HgBr,2,试纸生成,黄色棕色,的砷斑，与2ml标准砷溶液在相同条件下生成的砷斑比较。,Pb(AC),2,棉花：,避免了硫化物的干扰,标准砷斑,标准砷溶液（As,2,O,3,）1,g As/ml 2ml,样品砷斑,与标准砷斑比较，不得更深。,加,KI、SnCl,2,的目的使AsO,4,3-,还原为为AsO,3,3-,，因为AsO,3,3-,生成AsH,3,的速度快。,（六）,酸碱度,检查法,（,Acidity or Alkalinity,),ChP（2005）二部 附录 A,原料药、液体制剂一般均进行酸碱度检查。,酸度,：检查时采用碱液滴定或规定的pH值小于7.0。,碱度,：,检查时采用酸液滴定或规定的pH值大于7.0。,酸碱度,：检查时先后用碱、酸液分别进行滴定或pH范围在7.0两侧。,pH,值测定法,用,电位法,测定供试品溶液的,pH,值,如 注射用水,pH,值应为,5.0,7.0,青霉素钠盐、钾盐,pH,值应为,5.0,7.5,红霉素,pH,值应为,8.0,10.5,2005,年版,ChP,pH,值测定法 见附录,H,2.,指示液法,将一定量的,指示液,加入供试品中，根据指示液的颜色变化来控制酸碱性杂质的限量。,例：,纯化水的酸碱度,取10ml，加甲基红指示剂（4.26.3红黄）2 d，不得显红色；另取10ml，加溴麝香草酚兰6.07.6黄蓝）5 d，不得显兰色。则纯化水的 pH值为4.27.6。,3.,酸碱滴定法,在一定的指示液下，用酸或碱滴定液滴定供试品溶液中碱性或酸性杂质，以消耗酸或碱滴定液的ml数为限度指标。,例：,苯甲酸钠的酸碱度,本品1.0g，加水20ml，酚酞2d（无红）,如显淡红色，加硫酸滴定液0.25ml（0.05mol/L）,淡红色应消失。,如显无色，加NaOH滴定液0.25ml（0.1mol/L）,应显淡红色。,表明本品1g中所含酸、碱性杂质的限量分别为0.025和0.0125 mmol。,（七）,澄清度检查法,（Clarity of Solution）,检查药品中存在的,不溶性杂质,，尤其用作注射液的原料药。,2005年版ChP.附录 B,原理：,硫酸肼与乌洛托品 标准比浊液,1.00硫酸肼溶液10乌洛托品溶液等量混合配制浊度标准贮备液 浊度标准原液 浊度标准液（5个级号）,澄清,：未超过0.5级浊度标准液,或与所用溶剂相同,浊度0.5级,：大于0.5级，小于1级,（八）,溶液颜色检查法,（Color of Solution）,ChP2005年版 二部附录 A,控制,有色杂质,限量的一种方法,1.,目视比色法,供试液与标准液比较，不得更深,例：,盐酸异丙嗪,（抗组胺药）,溶液的,澄清度与颜色,取本品1.0 g，加水10ml溶解后，溶液应澄清无色；如显浑浊，与1号浊度标准液（附录 B）比较，不得更深；如显色，与黄色2号标准比色液（附录 A）比较，不得更深。,2.,分光光度法,在某波长下，测定溶液的吸收度，并规定其吸收度不得超过某一限度。,例：,华法林钠,（抗凝血药）,取本品0.20 g，加丙酮10ml溶解后，溶液应澄清无色；如显浑浊，与1号浊度标准液比较，不得更浓；如显色，置4cm吸收池中，在460nm的波长处测定吸收度，不得过0.12。,（九）,干燥失重测定法,（Loss on Drying）,ChP（2005）二部 附录 L,测挥发性杂质，主要为水,1.,常压恒温,干燥法 如葡萄糖 常用烘箱105或以上。,受热稳定,药物。,2.,干燥剂,干燥法 用于,受热不稳定,，易挥发的药物。干燥器放P,2,O,5,、浓硫酸或硅胶，效果不好，时间长。,3.,减压,干燥法,用于,受热不稳定,的药物。20mmHg以下压力，恒温减压干燥箱,4.,热重法,Thermogravimetry,TG,是在程序控制温度下,借助,热天平,以获得物质的质量,与温度关系得一种热分析技术。,例：,葡萄糖,干燥失重,扁平称量瓶 t,1,t,2,恒重,t+s t+w,1,t+w,2,放在干燥器内冷却30分钟。,恒重:,t,1,-t,2,0.3mg,(t+w,1,)(t+w,2,)0.3mg,指物品连续两次干燥或灼烧后称得的重量相差小于0.3mg，称为,达,恒重,。,（,十）,炽灼残渣检查法,（Residue on Ignition,）,ChP（2005）二部 附录 N,有机药物炽灼炭化，再加硫酸湿润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，于电炉高温（,700800,）炽灼至完全灰化，使有机物质破坏分解变成挥发性物质逸出，残留的,非挥发性无机杂质,成为硫酸盐，称为,炽灼残渣,。,无机杂质的限度一般为0.1%，称样量为 1 g。,空坩埚 取出放干燥器冷却，,称重t,1,，重复一次，称重t,2,。,恒重,t,1,-t,2,0.3mg,比较附录三种药物质标上各有哪些一般杂质检查项目？,思考,六、,特殊杂质检查,药典中“特殊,杂质,”指的是,有关物质,，如,原料与中间体,、副产物、,降解产物,等。,例1：,盐酸杜冷丁,（），副产物和（无活性）,TLC法,例2：,去氧肾上腺素,中,中间体,酮体,的检查,酮体在310nm处有吸收，而药物无吸收。,例3：,阿司匹林的杂质检查,水杨酸,（原料，降解产物），目视比色法（+Fe,3+,紫色,）控制限度。,乙酰水杨酸酸酐,（致过敏）,