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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,.,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,.,*,病毒学,病毒感染的,检查方法与防治原则,1,.,病毒学病毒感染的1.,教,学,目,标,熟悉：,人工主动免疫和人工被动免疫的常用生物制品。,了解：,病毒感染的实验室诊断方法。有效抗病毒药物的抗病毒机制及应用价值。,2,.,教学目标熟悉：2.,思考：,病毒如此之小和活细胞内寄生，我们如何分离培养及检查？,血清学诊断和分子生物学检查的理论基础是什么？,可通过什么方式预防病毒的感染？,3,.,思考：病毒如此之小和活细胞内寄生，我们如何分离培养及检查？3,对抗病毒有招,-,巴斯德,在,1889,年发明了狂犬病疫苗 病毒的面貌清晰地呈现在人们的眼前仅仅百余年的历史，但明确的病毒致病的记载早在四百多年前就有了。早在,1566,年，疯狗咬人致病的案例已经被记录下来，但直到,1885,年，人们还不知道狂犬病到底由什么引起。,4,.,对抗病毒有招-巴斯德在1889年发明了狂犬病疫苗 病毒,在细菌学说占统治地位的年代，,巴斯德,的试验为狂犬病的防治开辟了新的路径。巴斯德发现，将狂犬病延髓提取液多次注射兔子后，再将这些毒性已递减的液体注射狗，狗就能抵抗狂犬病毒的侵染。,1885,年的一天，人们把一个被疯狗咬过的,9,岁男孩迈斯特尔送来求救，巴斯德给这个孩子注射了毒性减到很低的提取液，然后再逐渐用毒性较强的提取液注射。巴斯德的方法拯救了男孩的生命。,5,.,在细菌学说占统治地位的年代，巴斯德的试验为狂犬病的防治开,第一节 病毒感染的检查,检,测,内,容,查病毒,查特异性抗体,病毒颗粒,病毒抗原,病毒核酸,病毒酶类：如逆转录酶,电镜直接观察,光镜检查包含体,分离培养,6,.,第一节 病毒感染的检查检查病毒查特异性抗体 病毒颗粒电镜直,一、标本的采集与送检,原则基本与细菌相似，但应注意：,1.,标本用“双抗”或两性霉素,B,处理,2.,低温保存，尽快送检,3.,血清学诊断采双份血清,7,.,一、标本的采集与送检原则基本与细菌相似，但应注意：7.,二、病毒的分离与鉴定,（一）病毒分离培养方法类型,细胞培养（,cell,culture,）,鸡胚接种（,egg inoculation,）,动物接种（,animal inoculation,）,8,.,二、病毒的分离与鉴定（一）病毒分离培养方法类型8.,标本,无菌处理,细胞培养,鸡胚培养,动物接种,指标阳性,指标阴性,病毒鉴定,盲传,2,3,代,指标阴性,病毒阴性,一般程序,9,.,标本无菌处理细胞培养指标阳性病毒鉴定盲传23代指标阴性病毒,1.,动物接种,最原始,应用：尚无敏感细胞的病毒培养,动物：兔、鼠、黑猩猩、猴等,优点：结果易观察，可建立动物模型,缺点：有饲养条件要求，费用高，动物体内常带有潜伏病毒,10,.,1.动物接种 最原始10.,绒毛尿囊膜（,allantocherion,）,痘苗病毒、人类疱疹病毒,尿囊腔（,allantoic cavity,）,流感病毒、腮腺炎病毒,羊膜腔,流感病毒,卵黄囊（,yolk sac,）,嗜神经病毒,2.,鸡胚接种 孵化,9,14,天的鸡胚,11,.,绒毛尿囊膜（allantocherion）尿囊腔（allan,3.,细胞培养,在一定条件下用离体的活组织或活细胞培养病毒的方法,证实病毒存在的方法：,CPE,红细胞吸附及凝集,干扰现象,pH,值改变,12,.,3.细胞培养证实病毒存在的方法：12.,细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落,如腺病毒等多数病毒,13,.,细胞变圆、聚集、坏死、溶解或脱落13.,腮腺炎病毒感染细胞,红细胞吸附（,hemadsorption,）,HA,红细胞表面,HA,受体,细胞吸附,病毒胞膜表面血凝素,(HA),相应抗体,红细胞,吸附抑制,红细胞吸附抑制试验,14,.,腮腺炎病毒感染细胞红细胞吸附（hemadsorption）,干扰现象（,interference,）,风疹病毒人胚肾细胞 病毒增殖，,CPE(,),埃可病毒人胚肾细胞 病毒增殖，,CPE(,),人胚肾细胞,风疹病毒,埃可病毒,CPE(-),风疹病毒,(+),埃可病毒,(-),CPE(+),风疹病毒,(-),埃可病毒,(+),15,.,干扰现象（interference）风疹病毒人胚肾细胞,（二）病毒的鉴定,1.,形态学鉴定 电子显微镜,2.,病毒的血清学鉴定,鉴定病毒种、型、亚型,血凝抑制试验、免疫标记,3.,病毒分子生物学鉴定,16,.,（二）病毒的鉴定1.形态学鉴定 电子显微镜16.,三、病毒感染的诊断（一）病毒形态学鉴定,电子显微镜：设备、操作复杂，应用受限,光学显微镜：可见大病毒（痘类病毒）或包涵体，对一般病毒检测意义不大,17,.,三、病毒感染的诊断（一）病毒形态学鉴定电子显微镜：设备、操,（二）,免疫学检查法,检查病毒抗原,ELISA,血凝抑制试验、中和试验,检查病毒特异性,IgM,风疹病毒、甲型肝炎病毒等,（三）检查病毒核酸,核酸杂交技术,PCR,技术,18,.,（二）免疫学检查法18.,第二节 病毒感染的防治原则,一、人工主动免疫常用生物制品,灭活疫苗、活疫苗；,基因工程疫苗；,亚单位疫苗；,核酸疫苗,19,.,第二节 病毒感染的防治原则一、人工主动免疫常用生物制品灭活疫,二、人工被动免疫常用生物制品,免疫血清,血清丙种球蛋白,细胞因子等,20,.,二、人工被动免疫常用生物制品免疫血清20.,三、病毒感染的治疗,干扰素和干扰素诱生剂,中草药,基因治疗剂,治疗性疫苗,抗病毒,化学制剂,反义寡核苷酸,干扰,RNA,核酶（,ribozyme,）,核苷类药物,碘苷 阿昔洛韦,非核苷类反转录酶抑制剂,蛋白酶抑制剂,其他抗病毒药物,21,.,三、病毒感染的治疗干扰素和干扰素诱生剂抗病毒反义寡核苷酸核苷,总结,病毒感染的检查方法与一般程序。,病毒感染的特异预防,病毒感染的治疗,22,.,总结病毒感染的检查方法与一般程序。22.,思考题,1.,分离病毒的标本和作血清学诊断的标本各有何要求？,2.,预防病毒性感染有哪些人工自动免疫制剂？,23,.,思考题1.分离病毒的标本和作血清学诊断的标本各有何要求？23,下次课预习内容,第二篇 病毒学,第,二十五,章 呼吸道病毒,24,.,下次课预习内容第二篇 病毒学第二十五章 呼吸道病毒24.,Thanks for Your Attention,25,.,Thanks for Your Attention25.,
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