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,观察叶绿体、植物细胞有丝分裂,标本的制作与观察、植物多倍体的诱发,观察叶绿体、植物细胞有丝分裂,观察叶绿体,:,人教版,47,页,观察叶绿体:人教版47页,目的要求,使用高倍显微镜观察叶绿体的形态和分布,材料用具,1.,新鲜的藓类的叶(或菠菜叶、黑藻叶等)。,2.显微镜、载玻片,盖玻片,滴管,镊子,消毒,牙,签,方法步骤,1.制作藓类叶片临时装片 在洁净的载玻片中央滴一滴清水。用镊子取一片藓类的小叶,或者取菠菜叶稍带些叶肉的下表皮,放入水滴中,盖上载玻片。,2.观察叶绿体 将制作好的叶片临时装片放在低倍显微镜下观察,找到叶片细胞后,换用高倍镜,仔细观察叶片细胞内叶绿体的形态和分布情况,观察叶绿体,:,人教版,47,页,目的要求使用高倍显微镜观察叶绿体的形态和分布材料用具1.新鲜,观察叶绿体,:,人教版,47,页,观察叶绿体:人教版47页,观察叶绿体,:,人教版,47,页,实验改进:,实验材料:藓类叶片或者菠菜叶片 万年青叶片(景天科),优点:种植广泛、叶片较厚、叶肉细胞排列规则、叶绿体分布均匀、与课本彩图非常相似 黑藻效果最好,但难以获得,水棉、芦荟、天门冬、菠菜(容易取到单层细胞就行),普通光学显微镜 多功能数码显微镜,(莴笋、蚕豆叶、葱叶),实验过程,:,芦荟,:纵剖芦荟肉质叶,洗去凝胶置于载玻片上,用解剖针轻轻来回划动刮下叶肉细胞涂于载玻片上的水滴中、盖片观察。,菠菜,:事先去除黄叶洗净,在无直射光和强光处;晾晒,当菠菜叶稍微变软,用镊子贴近叶下表皮从叶片部向边缘撕揭,可得到连有一定量的叶肉细胞下的表皮,放入载玻片上的水滴中,盖片观察。,观察叶绿体:人教版47页实验改进:,观察叶绿体,:,人教版,47,页,实验总结,:,1.,任何一种绿色植物,只要,容易取到单层细胞,,基本上都可以作为实验材料,教师可根据当地的实际情况做准备。,2.,在观察过程中还会看到胞质环流,要引导学生仔细观察现象,积极思考,并能对观察到的现象做出解释。,观察叶绿体:人教版47页实验总结:,3.,观察和绘图:显微镜,2.,装片制作,1.,洋葱根尖的培养:实验前,3-4d,,待根长到,1-5cm,取生长健壮的根尖,细胞有丝分裂的观察,3.观察和绘图:显微镜 2.装片制作,取根尖,2-3mm,解离液:质量分数为,0.1,的盐酸,目的:使组织中的细胞分离开,时间:,10-15min,程度:根尖变软,操作:用镊子将根尖压扁,盖上盖玻片,再,覆盖上一张滤纸片,然后用橡皮或者笔端轻轻敲击盖玻片几下。,目的:使细胞分散开,取材,解离,漂洗,染色,染液:,0.01g/ml,的龙胆紫溶液,目的:使染色体(质)着色,时间:,1-2 min,细胞有丝分裂的观察:装片制作,制片,漂洗液:清水,目的:洗去解离液,便于染色,时间:约,10min,取根尖2-3mm解离液:质量分数为0.1的盐酸操作:用镊子将,细胞有丝分裂的观察:观察和绘图,观察,:,(,1,)低倍物镜观察:找到分生区细胞,其特点是细胞呈正方形,排列紧密,(,2,)高倍物镜观察:在低倍镜的基础上换高倍物镜,目的是看清细胞的物象,(,3,)仔细观察:先找中期细胞,再找其余各期,注意染色体的特点。,(,4,)移动观察:慢慢移动装片,以便完整地观察各个时期的细胞。,绘图,:一定要绘制实际观察到的图像,不要受教材中模式图的影响,,细胞有丝分裂的观察:观察和绘图观察:(1)低倍物镜观察:找到,细胞有丝分裂的观察:实验改进,1,实验改进,材料选择,:实验一般安排在,9,月下旬,-10,月中旬,,6,月下旬采购洋葱,确保洋葱植物的高质量生根率。根尖材料长到一厘米左右最为合适。,洋葱根尖 大蒜根尖(降成本、易培养、生根快),实验过程:,漂洗:将培养皿中的解离液倒入塑料水杯中,就在培养皿中洗去解离液的残余液体。卢小玉、张豪提供的动态冲洗的方法,用镊子搅动培养皿中的水,这种流动的小水流在三次换水后可达到最好的漂洗效果。,细胞有丝分裂的观察:实验改进1实验改进,细胞有丝分裂的观察:实验改进,2,实验改进,常温水培一周 常温,+,低温水培(将洋葱在常温条件下水培一周,然后再放入,4,冰箱中培养,1,个月。,如此处理可让洋葱长出许多根,且每条根都特别粗壮,避免根在长期常温培养条件下变细的缺点,),直接取材 同步化、固定后取材,(利用化学试剂羟基脲进行同步化处理,可成倍提高根尖有丝分裂指数,具体操作如下:将,0.095g,的羟基脲溶于,1L,清水中制成,1.25mmol,的羟基脲水溶液,将洋葱根置于该水溶液中培养,28h,后,用清水清洗根,5,次,每次,3min,,以此去除阻断剂,最后将根放入清水中恢复培养,4-9h,),将有丝分裂指数处于较高时期的根尖剪下,用吸水纸吸干水分,将其放入卡诺氏固定液(乙醇:冰醋酸,=3:1,)中固定,4h,以上。固定完毕后将根尖取出,再用吸水纸吸干液体。最后将根尖放入酒精中,在,4,冰箱中保存待用,注意保存时间不超过,2,个月。如果洋葱根尖细胞同步化后的恢复期恰好是实验课上课时间,固定这一步也可省略。以上实验准备工作由教师完成,准备时间约为,2d,,该操作可节省课堂制片时间,显著提高实验成功率),细胞有丝分裂的观察:实验改进2实验改进,细胞有丝分裂的观察:实验改进,2,实验改进,染色:使用龙胆紫染色液对洋葱根尖细胞染色,10min,(,染色效果不理想,易使细胞内的其他物质也着色),改用质量分数,0.01,的龙胆紫溶液染色,5min,后,再多加,1,个步骤:滴加解离液分色,分色时间为,1min,(分色的原理是用解离液脱去细胞核中结合过多的染料和细胞浆中吸附的染料,以此去掉细胞内其他物质的着色,使细胞核和染色体着色更清晰可见。),实验教学:教师可根据本班的实际情况尝试进行小组合作式探究实验教学,加深学生对有丝分裂整个过程及各个时期的理解,让学生体会到学以致用的快乐,细胞有丝分裂的观察:实验改进2实验改进,取根尖,2-3mm,卡诺氏固定液,固定,5h,以上,解离液:,浓盐酸,:,95%,乙醇,=1:1,时间:,10-15min,程度:根尖变软,操作:用镊子将根尖压扁,盖上盖玻片,再,覆盖上一张滤纸片,然后用橡皮或者笔端轻轻敲击盖玻片几下。,目的:使细胞分散开,取材,固定解离,漂洗,染色,染液:,1%,或,0.5%,龙胆紫:,10%,醋酸,=1:1,染色液,目的:使染色体(质)着色,时间:,3 min,细胞有丝分裂的观察:装片制作,制片,漂洗液:清水,换水,目的:洗去解离液,便于染色,时间:约,10min,10%,醋酸,清洗,取根尖2-3mm卡诺氏固定液固定5h以上操作:用镊子将根尖压,失败的制片,1,染色过浅,调焦不正确,2,染色过度,整片变紫,失败的制片1 染色过浅,调焦不正确2 染色过度,整片变紫,高中生物观察叶绿体、植物细胞有丝分裂标本的制作与观察公开课课件,实验结果图,后期,末期,实验结果图后期末期,细胞有丝分裂的观察:实验总结,高中有丝分裂观察实验成功率较低,教师需要提前做好实验改进的方案,来改善实验的观察效果,提高实验成功率。此外,建议将本实验教学由验证性实验改进为小组合作探究性实验。,本次材料选择帝王菜根尖。,取材时间必须严格,否则处于分裂期的细胞较少。,细胞有丝分裂的观察:实验总结高中有丝分裂观察实验成功率较低,,1.,如图为某同学观察洋葱根尖细胞有丝分裂永久装片时,在显微镜下观察到的视野下列叙述正确的是(),A细胞不着色,细胞、着色,B向左下方移动装片可将细胞移到视野中央,C一段时间后,细胞将分裂成两个子细胞,D细胞含有四个染色体组,:A、紫溶液或醋酸洋红液都是碱性染料,都能将染色质或染色体染成深色,因此细胞都能着色,A错误;,B、向右上方移动装片可将细胞移到视野中央,B错误;,C、该装片为有丝分裂永久装片,在制作该装片的解离环节,细胞就已死亡,所以一段时间后,细胞不会分裂成两个子细胞,C错误;,D、为处于有丝分裂后期的细胞,其细胞中含有的染色体组数是体细胞的2倍,即4个染色体组,D正确,故选:D,细胞有丝分裂的观察:考题链接,1.如图为某同学观察洋葱根尖细胞有丝分裂永久装片时,在显微,植物多倍体的诱发:人教版必修二,96-97,页,植物多倍体的诱发:人教版必修二96-97页,植物多倍体的诱发:人教版必修二,96-97,页,与二倍体植株相比,多倍体的植株常常是茎秆粗壮,叶片、果实和种子都比较大,糖类和蛋白质等营养物质的含量等都有所增加。,1.,原理:染色体数目变异,2.,常用方法:用秋水仙素来处理萌发的种子或幼苗。,(吴一民秋水仙碱对植物多倍体的诱发实验),3.,作用机理:秋水仙素能抑制细胞分裂时纺锤体的形成,染色体复制后不能分离,最终导致染色体数目加倍。,4.,实际应用:无籽西瓜的培育过程,植物多倍体的诱发:人教版必修二96-97页与二倍体植株相比,,植物多倍体的诱发:低温诱导植物染色体数目变化,原理:,其原理是低温破坏微管的装配,因此用低温处理植物分生组织细胞,能够抑制纺锤体的形成,使染色体分裂加倍后停留在赤道板上而不向两极移动,也不形成新的隔膜,而结合在同一个细胞内形成染色体加倍的细胞,因此植物染色体数目发生变化。,材料用具:,洋葱或大葱,蒜(均为二倍体,体细胞中的染色体数为,16,),培养皿,滤纸,纱布,烧杯,镊子,剪刀,显微镜,载玻片,盖玻片,冰箱,卡诺氏液,改良苯酚品红染液,体积分数为,0.15,的盐酸溶液,体积分数为,0.95,的酒精溶液。,方法步骤,1.,将洋葱(或大葱大蒜)放在装满清水的广口瓶上,让洋葱的底部接触水面。待洋葱长约,1cm,左右的不定根时,将整个装置放入冰箱的低温室内(,4,),诱导培养,36h,。,2.,剪取诱导处理的根尖约,0.5-1cm,,放入科诺氏液中浸泡,0.5-1h,,以固定细胞的形态,然后用体积分数为,0.95,的酒精冲洗,2,次。,3.,制作装片,包括:解离、漂洗、染色和制片,4,个步骤,具体操作方法与实验,“,观察植物细胞的有丝分裂,”,相同。,4.,先用低倍镜寻找染色体形态较好的分裂相。视野中既有正常的二倍体细胞,也有染色体数目发生改变的细胞。确认某个细胞发生染色体数目变化后,再用高倍镜观察。,植物多倍体的诱发:低温诱导植物染色体数目变化,植物多倍体的诱发(低温诱导):实验改进,实验材料:大蒜较好,洋葱、蚕豆,实验过程:,1.,增加低温处理后恢复常温短时间培养这一步骤,,来大大增加了染色体数目发生变化的细胞数量,方便观察。,2.,固定:教材中是放入科诺氏液中浸泡(无水酒精:冰醋酸,=3:1,)0.5-1h,但在实际操作中发现固定,24,小时,根尖细胞分散程度较好,有利于染色体数目的观察。,3.,解离:解离中,关键是时间的把握。教材中提到常温下在解离液中解离,3-5min,,时间太短,观察时细胞细胞重叠在一起,可以适当延长为,8-10min,,效果较好。或者将盛有解离液和根尖的小烧杯放在,60,左右的温水中,3-5min,,同样可以观察到较好的实验结果。,4.,漂洗:最好用蒸馏水,可以起到低渗作用,使细胞体积有一定的膨胀,便于以后染色体形态的观察。,5.,染色:用改良苯酚品红溶液进行制片染色,可使其染色体部分染色较深,而细胞质部分基本不染色,色差很明显,利于观察。,植物多倍体的诱发(低温诱导):实验改进实验材料:大蒜较好,洋,植物多倍体的诱发(低温诱导):实验改进,实验总结:,1.,恢复常温培养步骤的改进:多位学者通过实验验证了,增加低温处理后恢复常温短时间培养这一步骤,,能够增加细胞分裂数,是实验结果更利于观察。在实际教学中,教师在引导学生理解低温诱导染色体数目变化本质的基础上,进一步的延伸其在生产实践例如细胞同步化中的应用,从而将生物与技术、社会相联系。,2.,选材上,大蒜、洋葱、蚕豆效果较好。以蚕豆做实验的建议从正规种子公司购买当年的蚕豆种子,以保证萌发率。教师可以课前做好预实验。,植物多倍体的诱发(低温诱导):实验改进实验总结:,秋水仙素处理的效果,秋水仙素处理的效果,实验结果图,实验结果图,植物多倍体的诱发:考题链接,(
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