2011高考生物一轮复习课件：选修1专题5、6 DNA蛋白质技术

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,2011高考生物一轮复习课件：选修1专题5、6 DNA蛋白质技术,最新考纲,高频考点,1.PCR,技术的基本操作和应用,2,蛋白质的提取和分离,3,从生物材料中提取某些特定的成分,1.DNA,粗提取的原理、方法和注意事项,2,PCR,技术操作及原理,3,蛋白质提取的原理和方法,4,提取芳香油的三种常用方法及适用范围,5,层析法鉴定胡萝卜素时点样的关键,最新考纲高频考点1.PCR技术的基本操作和应用1.DNA粗提,一、多聚酶链式反应扩增,DNA,片段,1,细胞内,DNA,复制与,PCR,技术的比较,2011高考生物一轮复习课件：选修1专题5、6 DNA蛋白质技术,细胞内,DNA,复制,PCR,不,同,点,解旋,在解旋酶作用下边解旋边复制,80,100,高温解旋，双链分开,酶,DNA,解旋酶、,DNA,聚合酶,Taq,DNA,聚合酶,引物,RNA,DNA,或,RNA,温度,体内温和条件,高温,相,同,点,需提供,DNA,复制的模板,四种脱氧核苷酸作原料,子链延伸的方向都是从,5,端到,3,端,都需要酶的催化,细胞内DNA复制PCR不解旋在解旋酶作用下边解旋边复制80,2.PCR,的反应过程,一般要经历三十多次循环，每次循环可分为变性复性延伸三步。,3,PCR,技术反应过程中控制不同温度的意义,(1)90,以上时变性，双链,DNA,解聚为单链；,(2)50,左右时复性，两种引物与两条单链,DNA,结合；,(3)72,左右时延伸，,Taq,DNA,聚合酶促使,DNA,新链的合成。,2.PCR的反应过程,1,多聚酶链式反应,(PCR),是一种体外迅速扩增,DNA,片段的技术。,PCR,过程一般要经历,30,多次下述循环：,95,条件下使模板,DNA,变性、解链,55,条件下复性,(,引物与,DNA,模板链结合,)72,条件下引物链延伸,(,形成新的脱氧核苷酸链,),。下列有关,PCR,过程的叙述，不正确的是,(,),A,变性过程中破坏的是,DNA,分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现,B,复性过程中引物与,DNA,模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的,2011高考生物一轮复习课件：选修1专题5、6 DNA蛋白质技术,C,延伸过程中需要,DNA,聚合酶、,ATP,、,4,种核糖核苷酸,D,PCR,与细胞内,DNA,复制相比，其所需要酶的最适温度较高,C延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、4种核糖核苷酸,【,解析,】,PCR,一般要经历,30,多次循环，每次循环可以分为变性、复性和延伸三步。从第二轮循环开始，上一次循环的产物也作为模板参与反应，并且由引物,延伸而成的,DNA,单链会与引物,结合，进行,DNA,的延伸。,DNA,变性,(90,96),：双链,DNA,模板在热作用下，氢键断裂，形成单链,DNA,。复性,(25,65),：系统温度降低，引物与,DNA,模板结合，形成局部双链。延伸,(70,75),：在,Taq,酶,(,在,72,左右活性最高,),的作用下，以,dNTP,为原料，从引物的,5,端向,3,端延伸，合成与模板链互补的,DNA,链。,【,答案,】,C,【解析】PCR一般要经历30多次循环，每次循环可以分为变性,二、,DNA,的粗提取与鉴定,1,基本原理,(1)DNA,在不同浓度的,NaCl,溶液中的溶解度不同，在,0.14 mol/L,的,NaCl,溶液中的溶解度最低；,(2)DNA,不溶于酒精溶液；,(3)DNA,不被蛋白酶所水解；,(4)DNA,可被二苯胺染成蓝色。,二、DNA的粗提取与鉴定,2,方法目的,方法,目的,溶于,NaCl,溶液中并稀释,NaCl,浓度为,2 mol/L,时，,DNA,溶解，而部分蛋白质发生盐析而生成沉淀，通过过滤可除去部分蛋白质及不溶于,NaCl,溶液的杂质,当,NaCl,溶液稀释至,0.14 mol/L,时，,DNA,析出，过滤可除去溶于,NaCl,中的部分蛋白质和其他杂质,加入嫩肉粉,嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，水解蛋白质,加入冷却酒精,(95%),DNA,析出，除去溶于酒精的蛋白质,加入二苯胺，并沸水浴,鉴定,DNA,2方法目的方法目的溶于NaCl溶液中并稀释NaCl浓度为,(1),哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核，也没有,DNA,，不适于作,DNA,提取的材料，但却是提取血红蛋白的理想材料。,(2),实验过程中两次用到蒸馏水，第一次目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出,DNA,，第二次目的是稀释,NaCl,溶液。,(1)哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核，也没有DNA，,2,(2010,年青岛模拟,),下列关于,DNA,粗提取与鉴定的说法正确的是,(,),A,氯化钠的浓度越低，,DNA,的溶解度越大,B,人的血液不可代替鸡血进行该实验,C,柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂,D,利用,DNA,易溶于酒精的特点可除去,DNA,中的部分杂质,2011高考生物一轮复习课件：选修1专题5、6 DNA蛋白质技术,【,解析,】,人是高等哺乳动物，其成熟的红细胞中没有细胞核不能进行该实验。,A,项,NaCl,溶液浓度在小于,0.14 mol/L,时，溶液的浓度越低，对,DNA,的溶解度越大是正确的，没有前提条件这种说法是错误的；柠檬酸钠的作用是抗凝血；,DNA,不能溶于酒精中，所以,B,项是对的。,【,答案,】,B,【解析】人是高等哺乳动物，其成熟的红细胞中没有细胞核不能进,3,向溶有,DNA,的,2 mol/L,的,NaCl,溶液中不断加入蒸馏水，在这个过程中,DNA,和杂质蛋白质的溶解度变化情况分别是,(,),A,减小；减小,B,增大；增大,C,先减小后增大；增大,D,减小；增大,3向溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液中不断加入蒸馏,【,解析,】,DNA,在,NaCl,溶液中的溶解情况如右图所示：在向溶有,DNA,的,2 mol/L,的,NaCl,溶液中不断加入蒸馏水时，,DNA,的溶解度先减少后增大，而蛋白质在高浓度盐溶液中会沉淀，随盐浓度的降低，蛋白质的溶解度升高。,【,答案,】,C,【解析】DNA在NaCl溶液中的溶解情况如右图所示：在向溶,三、血红蛋白的提取和分离,1,方法及原理,方法,原理,凝胶色谱法,根据相对分子质量的大小分离蛋白质,电泳法,各种分子带电性质的差异以及分子本身大小、形状的不同来分离蛋白质,三、血红蛋白的提取和分离方法原理凝胶色谱法根据相对分子质量的,2.,实验操作程序,(1),样品处理,红细胞的洗涤：除去血浆蛋白等杂质，以利于后续步骤的分离纯化；,血红蛋白的释放：使红细胞涨破，血红蛋白释放出来；,分离血红蛋白溶液：经过离心使血红蛋白和其他杂质分离开来，便于下一步对血红蛋白的纯化。,2.实验操作程序,(2),粗分离,透析：除去样品中相对分子量较小的杂质。,(3),纯化：一般采用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离和纯化。,(4),纯度鉴定：一般用,SDS,聚丙烯酰胺凝胶电泳法来测定蛋白质的分子量，即对血红蛋白进行纯度鉴定。,(2)粗分离透析：除去样品中相对分子量较小的杂质。,相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，而相对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶外部移动，移动速度快，因此蛋白质分子彼此分离。,相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋,4,(2009,年南京质检,),下列有关蛋白质提取和分离的说法，错误的是,(,),A,透析法分离蛋白质的原理是利用蛋白质不能通过半透膜的特性,B,采用透析法使蛋白质与其他小分子化合物分离开来,C,离心沉降法通过控制离心速率使分子大小、密度不同的蛋白质分离,D,蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相同的电极方向移动,2011高考生物一轮复习课件：选修1专题5、6 DNA蛋白质技术,【,解析,】,带电离子或分子在电场中向着与其所带电荷相反的电极移动。,【,答案,】,D,【解析】带电离子或分子在电场中向着与其所带电荷相反的电极移,四、五种物质的提取方法、原理及步骤,提取物质,提取方法,提取原理,步骤,DNA,盐析法,在不同浓度的,NaCl,溶液中溶解度不同,不溶于酒精，但某些蛋白质则溶于酒精,溶解在,2 mol/L,的,NaCl,溶液中,加水稀释至,0.14 mol/L NaCl,溶液使,DNA,析出过滤,加入冷却酒精析出,四、五种物质的提取方法、原理及步骤提取物质提取方法提取原理步,提取物质,提取方法,提取原理,步骤,血红,蛋白,凝胶色谱法、电泳法,根据相对分子质量的大小,各种分子带电性质差异,样品处理,粗提取,纯化,纯度鉴定,玫瑰,精油,水蒸气蒸馏法,利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来,水蒸气蒸馏,分离油层,除水过滤,橘皮,精油,压榨法,通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油,石灰水浸泡、漂洗,压榨、过滤、静置,再次过滤,提取物质提取方法提取原理步骤血红凝胶色谱法、电泳法根据相对,提取物质,提取方法,提取原理,步骤,胡萝,卜素,萃取法,使提取物溶解在有机溶剂中，蒸发后得到提取物,粉碎、干燥,萃取、过滤,浓缩,提取物质提取方法提取原理步骤胡萝萃取法使提取物溶解在有机溶剂,水中蒸馏、水上蒸馏、水汽蒸馏的区别：,(1),这三种方法的基本原理相同，但原料放置位置不同。,(2),水中蒸馏：原料放在蒸馏容器的水中，水要完全浸没原料。,(3),水上蒸馏：容器中水的上方有筛板，原料放在筛板上，水量以沸腾时不浸湿原料为宜。,(4),水汽蒸馏：蒸馏容器下方有一排气孔，连接外源水蒸气，上方有筛板，上面放原料。,各自特点：水中蒸馏设备简单、成本低、易操作，而水上蒸馏和水气蒸馏时间短，出油率高。,水中蒸馏、水上蒸馏、水汽蒸馏的区别：,5,玫瑰精油称为,“,液体黄金,”,，其提取方法,(,),A,只能用水蒸气蒸馏法,B,可用蒸馏法和压榨法,C,可用蒸馏法和萃取法,D,可用压榨法和萃取法,【,解析,】,用玫瑰花提取精油，根据玫瑰花的干湿情况可采用不同的提取方法，鲜玫瑰花可采用水蒸气蒸馏法，干玫瑰花可使用有机溶剂萃取法，一般不采用压榨法。,【,答案,】,C,2011高考生物一轮复习课件：选修1专题5、6 DNA蛋白质技术,6,作为萃取胡萝卜素的有机溶剂，哪一项不符合实验要求,(,),A,能充分溶解色素,B,与水混溶,C,对人无毒,D,易与产品分离,【,解析,】,作为萃取胡萝卜素的有机溶剂应该具有较高的溶点，能够充分溶解胡萝卜素，并且不与水混溶。此外，还需要考虑萃取效率、对人的毒性、是否易燃、有机溶剂是否能从产品中完全除去、会不会影响产品质量等问题。,【,答案,】,B,6作为萃取胡萝卜素的有机溶剂，哪一项不符合实验要求,(2009,年高考江苏卷,),下列关于,DNA,和蛋白质提取与分离实验的叙述，正确的有,(,多选,)(,),A,提取细胞中的,DNA,和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞,B,用不同浓度,NaCl,溶液反复溶解与析出,DNA,可去除蛋白质,C,蛋白质提取和分离过程中进行透析可以去除溶液中的,DNA,D,蛋白质和,DNA,都可以用电泳的方法进行分离纯化,2011高考生物一轮复习课件：选修1专题5、6 DNA蛋白质技术,【,解析,】,提取,DNA,需用蒸馏水涨破细胞，提取蛋白质可以直接用豆浆或研磨的大豆；透析法不能除去,DNA,；,DNA,在不同浓度的