体液中酶的生物化学检验课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,体液中酶的生物化学检验,1,体液中酶的生物化学检验1,1,、,掌握,临床诊断中常用酶与同工酶的检测方法、参考区间及临床意义,2,、,熟悉,酶及同工酶的基本概念、分类与特征,本章教学要求：,2,1、掌握临床诊断中常用酶与同工酶的检测方法、参考区间及临床意,第一节 概述,3,一、基本概念,酶（,E,）：,具有催化作用的生物大分子，在生命进程中发挥着重要作用。除少数酶是核酸外，绝大多数酶是,蛋白质,酶的底物（,S,）：,酶所催化的反应物,酶的产物（,P,）：,酶促反应的生成物,酶的活性：,酶的催化能力的大小,第一节 概述3一、基本概念酶（E）：具有催化作用的生物大分子,4,二、酶的分类,单纯酶,结合酶,酶蛋白（蛋白质部分）,辅助因子,辅酶（非共价键结合）,辅基（共价键结合）,1,、酶分子的组成,4二、酶的分类单纯酶辅酶（非共价键结合）,5,2,、催化的反应性质,1.,氧化还原酶,2.,转移酶,3.,水解酶,4.,裂合酶或裂解酶,5.,异构酶,6.,合成酶或连接酶,酶的命名采用,系统命名法,52、催化的反应性质1.氧化还原酶酶的命名采用系统命名法,临床常用酶的名称与编号,EC,编号,习惯用名,英语缩写,EC,编号,习惯用名,英语缩写,1.1.1.27,乳酸脱氢酶,LD,、LDH,2.7.3.2,肌酸激酶,CK,、CPK,1.1.1.37,苹果酸脱氢酶,MD,、MDH,3.1.1.3,脂肪酶,LPS,1.1.1.41,异柠檬酸脱氢酶,ICD,、ICDH,3.1.1.8,胆碱酯酶,CHE,1.1.1.49,6-,磷酸葡萄糖脱氢酶,G6PDH,3.1.3.1,碱性磷酸酶,ALP,、AKP,1.4.1.3,谷氨酸脱氢酶,GLD,、GLDH,3.1.3.2,酸性磷酸酶,ACP,1.4.3.4,单氨氧化酶,MOD,3.1.3.5,5-,核苷酸酶,5-NT,2.1.3.3,鸟氨酸氨甲酰基转移酶,OCT,3.2.1.1,-,淀粉酶,AMY,、AMS,2.3.2.2,-,谷氨酰基转移酶,-GT,、GGT,3.2.1.30,-N-,乙酰(基)-,D氨基葡萄糖苷酶,NAG,2.4.1.1,糖原磷酸化酶,GP,3.2.1.51,-L-,岩藻糖苷酶,-FU,、AFU,2.5.1.18,谷胱甘肽转移酶,GST,3.4.23.1,亮氨酸氨基肽酶,LAP,2.6.1.1,门冬氨酸氨基转移酶,AST,、GOT,4.1.2.13,果糖二磷酸醛缩酶,ALD,2.6.1.2,丙氨酸氨基转移酶,ALT,、GPT,6,临床常用酶的名称与编号EC编号习惯用名英语缩写EC编号习惯用,7,三、同工酶,同工酶：,催化的化学反应相同，但酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶。,根据同工酶的来源和结构不同，从基因角度可将其分为单基因决定的同工酶、复等位基因同工酶、多基因决定的同工酶和修饰同工酶四类。,7三、同工酶同工酶：催化的化学反应相同，但酶蛋白的分子结构、,8,8,9,四、血清酶,血浆特异酶（血浆固有酶）：,凝血酶、纤溶酶、胆碱酯酶、铜氧化酶（铜蓝蛋白）、脂蛋白酯酶等,非血浆特异酶：,外分泌酶和细胞酶,（一）分类,9四、血清酶血浆特异酶（血浆固有酶）：凝血酶、纤溶酶、胆碱酯,10,（二）影响血清酶的因素,1,、生理变化,性别,年龄,饮食,运动,妊娠,10（二）影响血清酶的因素1、生理变化性别,11,2,、病理变化,（,1,）酶合成异常：大多数酶在肝脏合成,（,2,）酶释放增加：酶从病变（或损伤）细胞中释放增加是疾病时大多数酶增高的原因,（,3,）酶清除异常：同酶的半寿期以及其他一些因素有关,血清酶的半寿期（,T,1/2,）：,指酶失活至原来活性一半时所需要的时间。半寿期长的酶，在血清中持续时间长。,112、病理变化（1）酶合成异常：大多数酶在肝脏合成血清酶的,12,12,13,第二节 临床诊断中常用的酶与同工酶,一、丙氨酸氨基转移酶（,ALT,）,也称,谷丙转氨酶（,GPT,）,一种参与人体蛋白质新陈代谢的酶，起加快体内蛋白质氨基酸在体内转化的作用，它广泛存在于人体各种组织、器官、肌肉、骨骼中，以,肝细胞,的细胞浆中最多。,13第二节 临床诊断中常用的酶与同工酶一、丙氨酸氨基转移酶（,14,（一）检测方法,连续监测法,可在,340nm,处连续监测,NADH,的消耗量，从而计算出,ALT,活性浓度。,L-,丙氨酸,+,-,酮戊二酸,-,丙酮酸,+L-,谷氨酸,ALT,-,丙酮酸,+NADH+H,+,乳酸,+NAD,+,LD,14（一）检测方法连续监测法可在340nm处连续监测NADH,15,（二）参考区间,男性：,9-50U/L,女性：,7-40U/L,（三）临床意义,1,、活性增高,（,1,）肝胆疾病：传染性肝炎、肝癌、中毒性肝炎、脂肪肝、胆管炎等,（,2,）心血管疾病：心梗、心肌炎、脑出血等,（,3,）药物和毒物,2,、活性降低：,磷酸吡哆醛缺乏症,15（二）参考区间男性：9-50U/L 女性：7,16,二、天冬氨酸氨基转移酶（,AST,）,也称,谷草转氨酶（,GOT,）,，,AST,和,ALT,是人体内糖和蛋白质相互转变所需的酶。,AST,广泛分布于全身各组织，尤其以,心脏,、骨骼肌、肝脏、肾脏中最为丰富，在细胞内定位于线粒体（,ASTm,）和胞质（,ASTs,）中，,70%,为,ASTm,16二、天冬氨酸氨基转移酶（AST）也称谷草转氨酶（GOT）,17,（一）检测方法,连续监测法,可在,340nm,处连续监测,NADH,的消耗量，从而计算出,AST,活性浓度。,L-,天冬氨酸,+,-,酮戊二酸,草酰乙酸,+L-,谷氨酸,AST,草酰乙酸,+NADH+H,+,L-,苹果酸,+NAD,+,MD,17（一）检测方法连续监测法可在340nm处连续监测NADH,18,（二）参考区间,8-40U/L,（三）临床意义,活性增高,（,1,）,AST,在,心肌细胞,中含量最高，心肌梗死时活性增高,（,2,）各种肝病,（,3,）肌炎、胸膜炎、肾炎、肺炎,18（二）参考区间8-40U/L （三）临床意义,19,三、,-,谷氨酰转移酶（,GGT,）,是一种含巯基的线粒体酶，参与体内谷胱甘肽的代谢。肾脏、肝脏和胰腺中含量丰富，但血清中,GGT,主要来自,肝胆系统,。,GGT,在肝脏中广泛分布于肝细胞的毛细胆管一侧和整个胆管系统，因此肝内合成亢进或胆汁排出受阻时，血清中,GGT,升高。,19三、-谷氨酰转移酶（GGT）是一种含巯基的线粒体,20,（一）检测方法,碱性条件下,GCNA,与甘氨酰甘氨酸反应的方法,（二）参考区间,男性：,11-50U/L,女性：,7-32U/L,20（一）检测方法碱性条件下GCNA与甘氨酰甘氨酸反应的方法,21,（三）临床意义,1,、肾脏疾病：,血清中,GGT,活性升高不明显,2,、肝脏疾病：,（,1,）诊断恶性肿瘤肝转移和肝癌术后复发情况，阳性率可达,90%,（,2,）,GGT,同工酶,II,与,AFP,联合检测可原发性肝癌的检测阳性率明显升高,3,、嗜酒或长期服用某种药物,21（三）临床意义1、肾脏疾病：血清中GGT活性升高不明显,22,四、肌酸激酶（,CK,）,CK,能催化高能磷酸键在肌酸和,ATP,之间转换。为二聚体结构，由,M,和,B,两个亚基构成，可组成三种同工酶，,CK-MM,（主要存在于骨骼肌中）、,CK-BB,（脑、平滑肌）、,CK-MB,（心肌）。,22四、肌酸激酶（CK）CK能催化高能磷酸键在肌酸和,23,（一）检测方法,酶偶联法,（二）参考区间,男性：,38-174U/L,女性：,26-140U/L,23（一）检测方法酶偶联法（二）参考区间男性：38-174,24,（三）临床意义,1,、心肌梗死：,AMI,发生后,4-8h,，,CK,开始升高，,12-48h,达高峰，可达正常上限的,10-12,倍，,2-4,天后降至正常。,CK-MB,是目前公认的诊断,AMI,较有价值的生化指标。,2,、病毒性心肌炎,3,、皮肌炎、肌营养不良、骨骼肌损伤等,4,、脑膜炎、脑血管意外、甲状腺功能低下,5,、非疾病因素：剧烈运动，各种插管及手术等,升高,甲亢、长期卧床者，,CK-MM,下降,24（三）临床意义1、心肌梗死：AMI发生后4-8h，CK开,25,五、乳酸脱氢酶（,LD,）,LD,是参与糖无氧酵解和糖异生的重要酶。,LD,是由,M,和,H,两个亚基组成的四聚体，形成五种结构不同的同工酶,LD1,（,H4,）和,LD2,（,H3M,）：主要存在于肾、心肌和红细胞,LD3,（,H2M2,）：脾脏、肺脏,LD4,（,HM3,）和,LD5,（,M4,）：横纹肌和肝脏,25五、乳酸脱氢酶（LD）LD是参与糖无氧酵解和糖异生的重要,26,（一）检测方法,连续监测法,在,340nm,处连续监测,NADH,吸光度上升或下降速率，与,LD,活性呈正比关系。,正向反应：,L-,乳酸,+NAD,丙酮酸,+,NADH+H,+,LD,LD,逆向反应：,丙酮酸,+,NADH+H,+,L-,乳酸,+NAD,PH8.8-9.8,PH7.4-7.8,26（一）检测方法连续监测法在340nm处连续监测NADH吸,27,（二）参考区间,LD-L,法：,109-245U/L,LD-P,法：,200-280U/L,27（二）参考区间LD-L法：109-245U/L,28,（三）临床意义,疾病,LD,总酶,LD,同工酶,心肌梗死,升高最慢（,8-10,天），可高于正常上限,10,倍,LD1LD2,，可持续,14,天,充血性心衰、心肌炎,可高于正常上限,5,倍,LD1LD2,病毒性肝炎,可高于正常上限,5,倍,LD5LD4,肝硬化,轻度升高,LD5LD4,原发性肝癌,部分病例升高,LD5LD4,梗阻性黄疸,不定,LD4LD5,肌肉损伤,视损伤程度而异,以,LD5,升高为主,恶性肿瘤,可升高,LD3LD1,28（三）临床意义疾病LD总酶LD同工酶心肌梗死升高最慢（8,29,六、碱性磷酸酶（,ALP,）,碱性磷酸酶（ALP或AKP）是广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织经肝脏向胆外排出的一种酶。这种酶能催化核酸分子脱掉5磷酸基团，从而使DNA或RNA片段的5-P末端转换成5-OH末端。但它不是单一的酶，而是一组同功酶。分为生殖细胞型、胎盘型、肠型和非特异组织型。,29六、碱性磷酸酶（ALP）碱性磷酸酶（ALP或AK,30,（一）检测方法,连续监测法,（二）参考区间,女性：,1-12,岁,15,岁,40-150U/L,男性：,1-12,岁,500U/L,；,12-15,岁,25,岁,40-150U/L,30（一）检测方法连续监测法（二）参考区间女性：1-