香菇多糖治疗癌症的研究进展

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,香菇多糖“全合成”,香菇多糖提取与纯化,香菇多糖治疗癌症生物活性与应用,香菇多糖治疗癌症历史,香菇多糖治疗癌症的研究进展,第1页,香菇多糖治疗癌症历史,香菇多糖治疗癌症的研究进展,第2页,香菇,Lentinus edodes(Berk,.)Sing 为担子纲伞形科真菌，是世界名贵食用兼药用菌之一。,1968年日本千原吴郎先生首先利用热水从香菇子实体中浸提出6种胞外多糖。,1970年Chihard 和 Sasaki 用热水浸提法结合有机沉淀从香菇中提取另外四种多糖。,20世纪80年代以来，香菇多糖（lentinan,LNT）研究收到了广泛重视。,香菇多糖治疗癌症的研究进展,第3页,自日本千原吴郎在对香菇菌株进行筛选中，发觉特殊菌株含有较强抗肿瘤活性后，由山内制药株式会社等开发出药品，,1985,年后在日本临床上广泛应用。,日本味之素企业是世界上第一研发生产香菇多糖注射剂。当前香菇多糖主要用于治疗胃癌、肝癌、肺部及血液系统肿瘤，是一个兼有抑制肿瘤和提升免疫功效多糖类生物反应调整剂，国内、外临床应用已显示出了很好疗效。,最早剂型是注射剂，,年,9,月，我国首个胶囊剂型香菇多糖正式取得了国家食品药品监督管理局颁发“国药准字”批文，这一尖端科研结果是由复旦大学科技园国科基地德本生物与湖北创力药业联合研制与转化。,香菇多糖治疗癌症的研究进展,第4页,香菇多糖治疗癌症生物活性与应用,香菇多糖治疗癌症的研究进展,第5页,1、香菇多糖理化性质,1.1,香菇多糖为白色或棕黄色粉末,1.2,对光和热稳定,1.3,具吸湿性,1.4,相对分子质量较大,1.5,无甜味,1.6,还原性,1.7,部分能溶于水（在水中溶解度随分子质量增大而降低）,1.8,溶于热水，不溶于甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂,香菇多糖治疗癌症的研究进展,第6页,2,、香菇多糖结构研究,2.1,已明确香菇多糖免疫活性与其香菇多糖一级结构相关，香菇多糖一级结构是以,(1,3)-,-D-,吡喃葡聚糖残基为主链，侧链为,(16)-D-,吡喃葡萄糖残基葡聚糖，结构模型如图：,香菇多糖治疗癌症的研究进展,第7页,2,、香菇多糖结构研究,2.2,香菇多糖立体结构与生物活性关系是现在研究重点,Surenjav,等利用,X,射,线衍射分析证实，香菇多糖立体结构为右旋三重螺旋六方晶系，晶格常数,a=b=1.5nm,c=0.6nm.,2.3,采取高分辨核磁共振,(13CNMR),研究表明，其二级结构为凝结型单螺旋构象。,2.4,9,种抗肿瘤活性香菇多糖，分别被破坏了三螺旋,(1,3)-D,构,型，超声波打成碎片，除去结合蛋白质后，其抗肿瘤活性比天然物质有所降低，,表明多糖构型、相对分子质量及结合蛋白质与其抗肿瘤活性可能相关。,香菇多糖治疗癌症的研究进展,第8页,3,、香菇多糖生物活性,3.1,香菇多糖免疫调整和抗肿瘤活性,抗胃癌,#,结肠癌,#,乳腺癌,#,肺癌,3.2.,免疫调整和抗癌活性机制,香菇多糖能够激活很多免疫细胞如,T,细胞，自然杀伤细胞和巨噬细胞，增加免疫细胞吞噬能力来杀灭人体中癌细胞，对迁移癌细胞也有作用。香菇多糖还能够调整免疫细胞释放细胞信使比如细胞因子类。,3.3.,香菇多糖结构修饰和抗癌活性关系,化学修饰能增加香菇多糖抗癌活性和抗病毒活性，如对香菇多糖进行羧甲基化能够有效增强其水溶性，对香菇多糖进行硫酸酯化使其有显著抗,HIV,作用。,香菇多糖毒副作用低、药效高，含有良好抗肿瘤和免疫调整作用，在抗病毒、抗感染方面也有很强活性。香菇多糖抗癌和免疫调整活性机制研究较多，在其它疾病治疗上也有探索，现将相关方面研究进展总结以下：,香菇多糖治疗癌症的研究进展,第9页,3,、香菇多糖生物活性,3.4.,香菇多糖抗病毒活性,香菇多糖能够激活人体免疫系统，使其更有效反抗病毒增殖，对香菇,多糖进行结构修饰能够增强其抗病毒效果。在体外研究发觉硫酸酯化香菇多糖,在体外抗人类免疫缺点病毒方面有抑制活性，能够抑制病毒复制和细胞融合。与香菇多糖相比，硫酸化香菇多糖能够增强动物新城疫疫苗免疫效果，显著增加血清抗体和白细胞数量，降低感染新城疫病毒发病率和死亡率。,3.5.,香菇多糖抗感染作用,香菇多糖抗感染作用机理可能是多糖分子表面与病原体表面发生黏附作用，预防病原体与正常细胞表面糖分子结合，从而阻断其感染路径。,3.6.,对慢性乙型肝炎等病毒性疾病治疗作用,慢性乙型肝炎病毒在我国感染率非常高,其对人体伤害非常大。香菇多糖为一个葡聚糖,主要生化作用为增加肝糖原合成及糖原异生作用,促进巨噬细胞释放,H,2,O,2,数量能力显著增加,同时促进,T,细胞成熟,促进抗体形成。此机制正与慢性乙肝患者均存在不一样程度免疫功效低下相符合。,香菇多糖治疗癌症的研究进展,第10页,香菇多糖提取与纯化,香菇多糖治疗癌症的研究进展,第11页,1.,提取,香菇多糖是真菌细胞壁结组成份之一，提取香菇多糖需要破坏细胞壁结构，利用各种伎俩把香菇多糖与小分子有机物,、无机物等成份分离，提取物一,般为粗多糖,。,香菇多糖提取方法,1.1,浸提法：用热水、稀碱,(,酸,),液、酶来提取香菇多糖,1.2,微波法，微波法即用超声波法或微波来辅助萃取香菇多糖。,香菇多糖治疗癌症的研究进展,第12页,1.,提取,1.1,浸提法,1.1.1,用超临界,CO,2,萃取法对香菇粉末进行处理，再进行热水浸提，可使粗多糖得率更高。,1.1.2,不一样浓度稀酸、碱溶液提取香菇多糖，使粗多糖得率提升，不过此法应用较少。,1.1.3,酶辅助提取法就是在浸提香菇多糖过程中加入对应酶来分解香菇细胞壁，促进多糖释放，提升粗多糖得率。,香菇多糖治疗癌症的研究进展,第13页,1.,提取,1.2,微波发和超声法,1.2.1,超声提取法是利用超声波产生强烈振动，破坏香菇多糖细胞壁，加速多糖释放，能够缩短提取时间，降低提取液黏度，提升提取效率。,1.2.2,正交试验优化微波提取香菇多糖过程，结果与常规回流提取工艺相比，提取时间缩短,60,倍，多糖提取率提升,88.7%,。,香菇多糖治疗癌症的研究进展,第14页,2.,纯化,纯化是在粗多糖基础上，除去与香菇多糖混杂蛋白质和有色物质，得到均一多糖成份,香菇多糖纯化方法,1.1,沉淀法：,先用有机溶剂如乙醇等进行重复洗涤沉淀，除去醇溶部分杂质，再进行脱色，最终除去多糖中蛋白质。,1.2,层析法：,凝胶柱层析法和离子交换层析法,1.3,超滤分离法：,使粗多糖脱色、除蛋白和分级过程一步完成。,香菇多糖治疗癌症的研究进展,第15页,2.,纯化,2.1,沉淀法：,先用有机溶剂如乙醇等进行重复洗涤沉淀，除去醇溶部分杂质，再进行脱色，最终除去多糖中蛋白质,;,纯化后得到多糖分子量分布很宽，需要进行分级来得到一定分子量范围含有较强生物活性多糖。,2.2,层析法：,2.2.1,凝胶柱层析法,惯用凝胶有葡聚糖凝胶,(Sephadex),和琼脂糖凝胶,(sepharose),，以不一样浓度盐溶液和缓冲溶液作为洗脱剂，使不一样大小多糖分子得到分离纯化。,2.2.2,离子交换色谱,是经过载体表面带电基团与样品离子和淋洗离子进行可逆交换、离子偶极作用和离子吸附，来实现色谱分离。不一样多糖尤其是多糖与蛋白质结合在一起复合多糖，在一定,pH,条件下所带电荷不一样，依据各多糖上电荷差异来到达分离目标。,凝胶柱层析法和离子交换柱层析法因为造价昂贵，多在试验室研究用,.,香菇多糖治疗癌症的研究进展,第16页,2.,纯化,2.3,超滤分离法：,2.3.1,螺旋卷式超滤器,对香菇多糖进行提取研究，结果在此试验范围内，用微滤作预处理好于离心法处理，用超滤温度为,250C,，,pH,值靠近浸提介质,pH,值，超滤压力为,0,15,O,18 MPa,，制得香菇多糖纯度达,74,4,，回收率为,79,6,。,2.3.2,超滤陶瓷膜技术,，使不一样分子量香菇多糖快速纯化香菇多糖粗品，多糖蛋白质脱除率可达,81%,，多糖粗品脱色率达,90.9%,，精制得香菇多糖纯度为,89.7%,。,2.3.3,超滤膜分离装置,进行香菇多糖提取分离，建立了香菇多糖提取液超滤过程修正凝胶极化模型，这种工艺香菇多糖提取率达,6,10,，多糖粗品含量在,90,以上。,香菇多糖治疗癌症的研究进展,第17页,香菇多糖“全合成”,香菇多糖治疗癌症的研究进展,第18页,香菇多糖当前暂时无法半合成、全合成，生厂上依旧使用提取与纯化方法。不过多糖合成研究很早就开始了。,香菇多糖治疗癌症的研究进展,第19页,香菇多糖治疗癌症的研究进展,第20页,