胃泌素及其与MNNG合用时对大鼠胃黏膜的影响课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,目录,目录,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,胃泌素及其与MNNG合用时对大鼠胃黏膜的影响,胃泌素及其与MNNG合用时对大鼠胃黏膜的影响,1,简介,北京大学第三医院消化科分别,单独使用,胃泌素及胃泌素与MNNG,合用,刺激Wistar大鼠,分别观察其胃粘膜层的,厚度,，检测胃泌素抗体和组胺酸脱羧酶(HDC)抗体表达情况以及ki-67及bcl-2的表达量。,本PPT将对此进行概述。,简介北京大学第三医院消化科分别单独使用胃泌素及胃泌素与MNN,2,胃泌素对大鼠胃黏膜的影响,研究一,胃泌素对大鼠胃黏膜的影响研究一,3,研究背景,在胃肠道激素参与消化系统疾病发生与发展的研究中,胃泌素,(gastrin,GAS)尤为引人注目,随着对肿瘤分子生物学的不断研究,在胃癌、大肠癌、胰腺癌以及小细胞肺癌等肿瘤组织中均观察到有,胃泌素基因,的表达,在癌组织和癌旁组织中,胃泌素受体,阳性表达率也明显高于正常组织,提示胃泌素可作为肿瘤临床诊断与预后的一项,参考指标,。,Morton M,Prenderqast C,Barrett TD.Targeting gastrin for the Treatment of gastric acid related disorders and pancreatic cancer.Trends Pharmacol Sci,2011,32(4):201-205.,研究背景在胃肠道激素参与消化系统疾病发生与发展的研究中,胃,4,研究目的,探讨胃泌素对大鼠胃黏膜的影响。,研究目的探讨胃泌素对大鼠胃黏膜的影响。,5,研究方法,使用胃泌素刺激Wistar大鼠,空白对照组:自由饮用纯净水;胃泌素组:连续每天每只皮下注射,胃泌素,300,g,/kg,共30天。,第12周开始取材,每隔4周取材一次,共观察56周,空白对照组每次处死2只,胃泌素组每次3只,比较2组胃组织的变化,并测量胃泌酸区黏膜层的厚度,同时采用免疫组化方法检测,胃泌素,抗体和作为肠嗜铬样细胞标记的,组胺酸脱羧酶,(HDC)抗体在2组中的表达。,研究方法使用胃泌素刺激Wistar大鼠,空白对照组:自由饮用,6,研究结果,胃泌素组动物与空白对照组相比,胃黏膜层厚度增加,且胃泌素抗体和HDC抗体在胃泌素组中的表达升高。,研究结果胃泌素组动物与空白对照组相比,胃黏膜层厚度增加,且胃,7,胃泌素及其与MNNG合用时对大鼠胃黏膜的影响课件,8,胃泌素及其与MNNG合用时对大鼠胃黏膜的影响课件,9,讨论,胃泌素由分布于胃窦和十二指肠近端的,G细胞,分泌,与肠嗜铬样细胞上特异受体即胆囊收缩素B(CCK-B)结合后,作用于,组胺酸脱羧酶(HDC),刺激,ECL细胞,合成和释放组胺,介导对,壁细胞,胃酸分泌的调节。,Lindstrom E,Chen D,NorlenP,et al.Control of gastricacid secretion:the gastrin-ECL cell-parietal cell axis.Comp Biochem PhysiolA 2001.128(2):505-514.,讨论胃泌素由分布于胃窦和十二指肠近端的G细胞分泌,与肠嗜铬,10,讨论,同时胃泌素亦作为一种,营养,性胃肠道激素,不仅刺激正常胃肠道黏膜组织的生长,还能通过与其受体介导的细胞内信号传导途径,刺激,ECL细胞过度增殖,刺激,胃癌、大肠癌等肿瘤细胞的生长。,Ito M,Tanaka S,Maeda M,et al.Role of the gastrin-gastrin receptor system in the expansive growth of human gastric neoplasms.,Digestion 2008,.,784(2-3):163-170.,讨论同时胃泌素亦作为一种营养性胃肠道激素,不仅刺激正常胃肠道,11,讨论,Michael等指出胃癌患者血清,胃泌素水平,明显升高,肿瘤经手术切除后,血清胃泌素明显下降,术后当肿瘤复发时胃泌素水平又再次升高,提示胃泌素的升高可能是胃癌,癌前病变,的一种征象,可作为鉴别胃良恶性疾病的一个较好的,生物学标志物,。,Michael DB,Andrea V.Importance of gastrin in the pathogenesis and treatment of gastric tumorsJ.,World Journal of Gastroenterol 2009.,15:1-16.,讨论Michael等指出胃癌患者血清胃泌素水平明显升高,肿,12,讨论,长期使用质子泵抑制剂(PPIs)的患者,高胃泌素血症导致胃黏膜,ECL细胞增生,的现象也比较常见,甚至可以出现ECL细胞微小结节样增生,连续的组织学观察显示,高胃泌素血症刺激ECL细胞发生增生以后,即使停用PPIs,不但,高胃泌素血症,难以恢复,ECL细胞增生也不会恢复,这两者可以互相促进,互为因果。,Geboes K,Dekker W,Mulder CJ,et al.Long-term lansoprazole treatment for gastrooesophageal reflux disease:clinical efficacy and influence on gastric mucosa.AlimentPharmacolTher,2001,15(11):1189-1826.,讨论长期使用质子泵抑制剂(PPIs)的患者,高胃泌素血症导,13,结论,胃泌素,通过与其特异性受体结合,引起胃黏膜的增生,尤其引起,肠嗜铬样细胞,过度增殖,提示肠嗜铬样细胞的异常增殖是胃泌素促进,胃黏膜增厚,的可能机制之一。,结论胃泌素通过与其特异性受体结合,引起胃黏膜的增生,尤其引起,14,意义,目前临床上常用的H2 受体拮抗剂和PPIs类药物均可能在,抑酸,的同时导致胃泌素水平升高,GERD,发生率的升高也会使这两类药物的使用有所增加，,Hp,的,感染,又会进一步使胃泌素升高。,因此,在使用这些药物之前是否需要,根除Hp,而且在使用这些药物期间是否需要进行,随访,及药物的,使用期限,等,均是需要我们解决的问题。,意义目前临床上常用的H2 受体拮抗剂和PPIs类药物均可能在,15,展望,分子生物学技术的发展,将会加快对胃泌素及其受体,研究,的,深入,将有助于,揭示,消化道肿瘤的,发病机制,为临床设计受体激动剂和拮抗剂,奠定基础,。,胃泌素及其受体拮抗剂的研究将为消化道肿瘤的内分泌治疗,开辟,新的,途径,。,展望分子生物学技术的发展,将会加快对胃泌素及其受体研究的深,16,陶琴琴,周丽雅,邓凯,李渊,林三仁,杨燕琳,黄琛,陈栎.胃泌素对大鼠胃黏膜的影响J.中国微创外科杂志,2011,07:640-643.,陶琴琴,周丽雅,邓凯,李渊,林三仁,杨燕琳,黄琛,陈栎.胃,17,单独高胃泌素血症及其与MNNG合用时对大鼠胃黏膜的影响,研究二,单独高胃泌素血症及其与MNNG合用时对大鼠胃黏膜的影响研究二,18,研究背景,随着肿瘤分子生物学的不断研究，人们相继发现在胃癌、大肠癌、胰腺癌和小细胞肺癌等肿瘤中均有,胃泌素基因,的表达，并在相应的细胞膜表面也发现有,胃泌素,的,受体,。,在癌组织及癌旁组织中胃泌素受体阳性表达率也明显高于正常组织，提示胃泌素可作为肿瘤临床诊断与预后的一项,参考指标,。,Jensen RT Consequences of long-term proton pump blockade:insights from studies of patients with gastrinomas J Basic Clin Pharmacol Toxicol，2006，98(6):4-9,研究背景随着肿瘤分子生物学的不断研究，人们相继发现在胃癌、大,19,研究目的,探讨胃泌素及其与N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG),合用,时对大鼠胃黏膜的影响。,研究目的探讨胃泌素及其与N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(,20,研究方法,Wistar大鼠共24只,分为4组:空白对照组(A组,6只):自由饮用纯净水;胃泌素组(G组,6只):连续每天皮下注射胃泌素300g/kg共90d;MNNG组(M组,6只):饮用含MNNG100,g,/ml的自来水;胃泌素与MNNG合用组(M+G组,6只):饮用含MNNG100,g,/ml的自来水,同时连续注射胃泌素每天300,g,/kg共90d。,研究方法Wistar大鼠共24只,分为4组:空白对照组(A组,21,研究方法,第90天,取材,比较各组胃的组织学变化,并采用免疫组化的方法检测,bcl-2,(即B细胞淋巴瘤/白血病-2基因)和,ki-67,(增殖细胞核抗原),抗体,在不同胃组织中的表达。,研究方法第90天取材,比较各组胃的组织学变化,并采用免疫组化,22,研究结果,4个组动物,胃黏膜层厚度,差异有统计学意义,G组及M+G组与A组和M组相比,胃黏膜层厚度增加；,G组、M组及M+G组,ki-67及bcl-2的表达量,均增加,且与A组比较,差异均有统计学意义。,研究结果4个组动物胃黏膜层厚度差异有统计学意义,G组及M+G,23,图1 4 组大鼠胃体HE 染色图(50 )A:A 组;B:G 组;C:M 组;D:M+G 组,A,B,C,D,图1 4 组大鼠胃体HE 染色图(50 )A:A,24,胃泌素及其与MNNG合用时对大鼠胃黏膜的影响课件,25,图2 4 组大鼠胃窦bcl-2 免疫组化染色图(200 ),图2 4 组大鼠胃窦bcl-2 免疫组化染色图(200,26,图3 4 组大鼠胃窦ki-67 免疫组化染色图(200 )A:A 组;B:G 组;C:M组;D:M+G 组,图3 4 组大鼠胃窦ki-67 免疫组化染色图(200,27,讨论,胃泌素由分布于胃窦和十二指肠近端的G 细胞分泌，释放贮存于血液、组织和胃肠液当中，起着循环激素和神经递质的,双重作用,。,Kleveland PM，Brenna E，Bakke I，et al Interactions between gastric acid secretagogues and the localization of the gastrin receptor,J,Scand J Gastroenterol，2009，44(4):390-393,讨论胃泌素由分布于胃窦和十二指肠近端的G 细胞分泌，释放贮存,28,讨论,胃泌素除了可以,刺激,壁细胞和主细胞而,促进,胃酸、胃蛋白酶分泌外，还可以,促进,胃肠黏膜细胞的分裂增殖，,增加,DNA、RNA 的合成和蛋白质的含量，并且可以,营养,胃肠道黏膜及壁细胞群，,促进,胃肠道黏膜的生长和,加快,黏膜更新速度等;还能,增加,胃黏膜血流量，有利于损伤组织的修复;还能,促进,胃窦运动，,加速,胃排空等。,讨论胃泌素除了可以刺激壁细胞和主细胞而促进胃酸、胃蛋白酶分泌,29,讨论,MNNG 是一种较为常见的引起癌变的活性,致癌剂,，它不依赖酶的代谢而直接作用于胃肠道黏膜上皮，使DNA 链上已有的碱基发生烷化产生突变，发挥其致癌作用，它可诱发大鼠,实验性胃癌,，现已得到公认。,Naresse LE，Kobayasi S Carcinogenesis of the upper gastrointestinal tract induced by N-methyl-N-nitro-nitrosoguanidine and reflux of duodenal contents in the rat,J,Acta Cir Bras，2009，24(2):112-117,讨论MNNG 是一种较为常见的引起癌变的活性致癌剂，它不依赖,30,讨论,bcl-2,是一种凋亡抑制,基因,，在肿瘤,细胞,的,增殖,中起重要作用，它是由