本科hplc实验修改课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,高效液相色谱法,实验安排,本周 HPLC原理、上机创立方法,下周 凯氏定氮实验六 酚磺乙胺注射液的含量测定,下下周 HPLC法用于阿司匹林肠溶片中游离水杨酸检查和阿司匹林含量测定,HPLC在药分中的应用,鉴别,杂质检查,含量测定、溶出度、释放度,色谱法原理,利用各组分理、化性质的差异，各组分程度不同的分配到互不相溶的两相中。当两相相对运动时，各组分在两相中反复屡次重新分配，实现差速迁移，结果使组分得到别离。,HPLC原理,固定相,流动相,检测器,样品,HPLC原理,固定相正相、反相、离子对、手性,流动相酸碱抑制、离子对,检测器UV、MS、ELSD,样品 前处理,注意,固定相保存的体系,流动相条件、流速压力,检测器仪器选择、条件选择如检测波长等,样品进样方法注意满环进样,组成：,贮液瓶,高压泵,进样器,色谱柱,检测器,Agilent HPLC,概况,HPLC,实验准备,安装实验所需色谱柱；,配制流动相HPLC级；,流动相过滤、超声脱气；,配制样品，过0.45m微孔滤膜；,六通阀进样,Load,Inject,组成：,贮液瓶,高压泵,进样器,色谱柱,检测器,Agilent HPLC,概况,开机,翻开计算机，进入Windows 系统；,翻开液相色谱仪电源，待自检完成后，双击“HPLC联机图标，化学工作站自动与1220LC连接，进入工作站；,开机后的界面,建立分析方法,进样方式,泵设置,柱温箱设置,波长设置,采集时间,“方法菜单中选择“编辑完整方法 项,选中除“数据分析 外的三项，点击“确定。,在“方法注释中参加方法的信息如：测试方法，也可不输入，点击“确定。,选择进样源/位置：选择“手动，点击“确定。,泵设置,柱温箱设置,波长设置,点击“方法菜单，选中“方法另存为，进入以下画面：,图谱采集,平衡色谱柱,进样，采集数据,平衡色谱柱，翻开泵和柱温箱，平衡10分钟后再开灯,仪器准备就绪，且基线平整后，可开始进样。,在“运行控制菜单中选择“样品信息选项,系统等待进样,数据采集中,到达设定的停止时间后，数据采集自动停止；,假设要再次进样，那么点击“单次进样，系统等待进样后，扳动六通阀进样，开始采集数据；,重复以上操作，直到待测样品分析完毕。,图谱处理及报告打印,点击桌面上“HPLC脱机图标,调用图谱,谱图优化,积分,手动积分按钮：,设定报告,选择报告类型：如“简短报告,预览和打印报告,设置打印机,生成,PDF,文件,冲洗系统、关机,完成检测后，首先关闭检测器，用水冲洗,10,分钟，再用甲醇冲洗系统,20,分钟，同时清洗进样阀。冲洗完成后，关闭泵，退出化学工作站，关闭仪器电源开关。,填写仪器旁边的使用记录,。,