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,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,.,*,第二次实验课,.,内 容,1.,细菌培养法（录象）,2.,基础培养基制备（讲解示教）,3.,细菌接种法（一份,/,组）讲解,4.,人体、物品中细菌检查（一份,/,组）讲解,5.,飞沫、空气中细菌检查（一份,/,桌）讲解,6.,观察细菌代谢产物（讲解）,7.,第一次实验报告评讲,.,基础培养基的制备,去筋膜黄牛肉绞碎,500g,加入,1000ml,蒸馏水,直接煮沸,2,小时,调整酸碱度至,pH 7.6,过滤，补足失水,重新校正,pH,一次,分装，高压灭菌，,15,磅（,121.3,）,15,20,分钟,检菌如无细菌生长,（液体透明）即可应用,脱脂纱布过滤，按比例加入,1,蛋白胨、,0.5%,NaCl,，,0.1%K2HPO4,加热溶解补足水至,1000ml,4,浸泡过夜煮沸半小时,.,人体、物品中细菌检查,手,衣,发,钱,材料：普通平板,（,1,份,/,组）,盖上，标记,置,37,，,18-24h,后观察,。,.,飞沫、空气中细菌检查,材料：血平板,（,1,份,/,组）,距口,1520cm,用力咳嗽三次,置空气中,（避日光照射）,30,分钟,飞 沫,空 气,盖上，标记,置,37,，,18-24h,后观察。,.,结果观察,血平板,表皮葡萄球菌在血琼脂平板培养基上形成不溶血的菌落。,甲型溶血性链球菌形成的,溶血现象也称为甲型溶血现象或草绿色溶血现象，属于不完全溶血。,金黄色葡萄球菌形成的,溶血现象也称为乙型溶血现象，属于完全溶血。,.,细菌培养接种法,平板划线法,菌种：混合菌液,材料：普通平板,用具：接种环,方法：分区划线,1,区,2,区,3,区,4,区,原始区域,.,半固体培养基,斜面培养基,细菌培养接种法,-,斜面接种、液体接种、半固体,菌种：大肠杆菌或葡萄球菌斜面,材料：斜面、液体、半固体培养基,用具：接种环、接种针,液体培养基,.,结果观察,普通平板,普通琼脂平板培养基上，大肠埃希菌形成菌苔和菌落生长现象。,注意：大小、颜色、透明度、凸起度、表面干燥或湿润、光滑或粗糙、边缘是否整齐及血平板上的溶血情况。,.,结果观察,液体培养基,.,结果观察,斜面培养基,琼脂斜面培养基上大肠埃希菌形成的菌苔生长现象,菌苔,（,mossy,）,指细菌生长繁殖后，在培养基 表面形成的一层培养物,.,结果观察,半固体培养基,1,、扩散生长：具有动力的细菌,可见培养物扩散和培养基变混浊。,即有鞭毛的细菌：由穿刺线向外扩散生长（羽毛状或云雾状）,2,、原位生长：没有动力的细菌，可见培养物没有扩散，培养基仍然澄清,。,即,无鞭毛的细菌：沿穿刺线生长,2 1,1 2,.,细菌代谢产物观察,细菌的酶不一样，对营养物质的分解能力不一样，,产生的代谢产物也不一样。,常见：,糖发酵试验,吲哚（,indol,）试验,甲基红（,methyl red,）实验,VP,（,Voges-Proskauer,）试验,枸橼酸盐利用（,citrate utilization,）试验,尿素酶试验,硫化氢试验,.,糖发酵试验,不同细菌分解糖类的能力和代谢产物不同。,.,甲基红（,methyl red,）实验,M -,甲基红（,methyl red,）实验,葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇,甲基红,-,葡萄糖丙酮酸 甲基红,+,.,吲哚（,indol,）试验,I-,吲哚（,indol,）试验,色氨酸吲哚,玫瑰吲哚,对二甲基氨基苯甲醛,.,枸橼酸盐利用试验,C -,枸橼酸盐利用（,citrate utilization,）试验,利用枸橼酸盐生长,+,不能利用,-,.,硫化氢试验,硫化氢试验（醋酸铅培养基）,某些细菌分解含硫氨基酸，生成,H,2,S,，,H,2,S,遇铁盐（如硫化亚铁、醋酸铅等），则形成黑褐色硫化铁（铅）沉淀物，而呈黑色为（）。,.,尿素酶试验,产生氨使培养基变碱，指示剂显红色，为阳性。如：变形杆菌为阳性。,.,IMViC,试验,I,-,吲哚,（,indol,）,试验,M,-,甲基红,（,methyl red,）,试验,V -VP,（,Voges-Proskauer,）,试验,C -,枸橼酸盐利用,（,citrate utilization,）,试验,IMViC,试验,I M Vi C,试验,大肠埃希菌,+-,产气杆菌,-+,IMViC,试验：,是吲哚、甲基红、,V-P,以及枸橼酸盐利用试验四者的合称。常用于,肠道杆菌的鉴定,。,.,实验小结,1,、三类培养基,液体培养基,用于增菌；,均匀混浊、沉淀、表面生长,半固体培养基,观察动力；保存菌种（,6,个,月,）；穿刺线，扩散生长,固体培养基,分离纯化；保存菌种（,1,个月）,菌落,、菌苔,2,、,IMViC,试验,.,第三次实验课内容,1,、热力对细菌和芽胞的杀菌作用,2,、紫外线的杀菌作用,3,、常用化学消毒剂的杀菌作用和抗生素敏感试验,4,、耐药性变异；,5,、细菌的鞭毛变异；,6,、高压灭菌器的使用；,7,、细菌的鉴定程序；,8,、全自动微生物分析仪的基本原理及简单操作步骤,.,
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