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单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,Page,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,Page,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,大小鼠眼眶取血方法交流（附图）,201,4,-5-5,交流提纲,实验环境,实验材料,动物处理,取,血,容,量,时间安排,具体操作,.,血样处理,问题讨论,大鼠 PK,取血,环境 材料,B 毛细管,0.9mm 100mm，看个人习惯使用，,经常一管三断，30mm/管，弃去中间段。,EP 管 加入0.1%肝素钠（,150U/mg,）0.1 mL，均匀润湿，,50以下干燥；,适用 1mL 全血的抗凝，效果良好。,取血时必须提前检查管的质量，标号分组，适当多备。,C 抗凝EP管,D 计时工具,A 通风台面,长时间操作，透气通风,宽敞台面，便于多组多步骤同时操作,Page,3,Page,4,动物处理,实验期间，补充体液，目前常规为：取血后灌胃给予等统计生理盐水/葡萄糖溶液。,动物 体重要求 一般 不低于250g,给药前 禁食12-24h，给药前 提前 0.5-1.0h 按,0.5-1.0%（V/W）给水,实验之后，外用消炎药涂布眼部,Page,5,容,量,时间,注射 一般 呈现 降低 趋势，给药后较短时间内采集的点数适当增加；,灌胃 存在,C,max-,t,max，需通过考察,t,max，根据一般原则，适当调整时间间隔。,取,血,容,量,时间 安排,选点一般原则,预实验建立,药物性质,给药途径,分布相 3-4个点,吸收相 3-4个点,吸收相 3-4个点,一般12h内取血,不超过动物质量,2.0%（v/w）,每次0.25-0.5 mL,Page,6,大鼠眼眶取血流程,6样品摇匀,1.,将大鼠按压在,鼠,笼,上,，,拇+中+食,指,固定住头部,3.,右手持毛细管,从,眼,内,眦,部,，与鼠面成45,夹角，,旋转刺,入,2.,紧握颈部，压迫颈两侧，使,眼突出,，眶后静脉丛充血,4.固定身体，,压,住,后肢,，放,松手指,，调整毛细管，流畅出血。,5.取血完成，立即,除,去颈部压力，将采血器,拔,出，按压,止,血。,6血样管轻,轻混匀,，防止凝血、溶血。,2,压迫颈部,3旋转,刺入,4固定采血,5去管止血,1,左手保定,1左手保定,Step1.,将大鼠按压在,鼠,笼,上,，,拇+中+食,指,固定住头部,Step 1,A 建议笼子内放置,重物,防止摇晃；,B 一定要带手套；,C 开始必须,牢牢固定住头部,头部乱动，扎位置容易得偏离,，且易被咬伤；,D 可在此时将大鼠取血侧的,胡须,剪掉，防止接触凝血。,Page,7,大鼠眼眶取血流程,2压迫颈部,Step2,.,紧握颈部，压迫颈两侧，使,眼突出,，眶后静脉丛充血,Step2,A 可用管试探性触碰眼球是否已经突出；,B 此时大鼠反抗挣扎最厉害，保证抓紧的同时，不能太过，使其窒息死亡。,Page,8,大鼠眼眶取血流程,3,旋转,刺入,Step3.,眼,内,眦部，45,夹角，旋转刺入,，旋转退出。,Step3,A 针头斜面先向眼球，刺入后再转一定角度使斜面对着眼眶后界；,B 刺入深度，小鼠约2-3mm，大鼠约4-5mm。当感到有阻力时即停止推进，同时，管退出约0.1,-,0.5mm，边退边旋转；,C 不要使用管的尖锐锋利端插入，易留玻璃碎片在眼内，造成持续伤害，使得下次反抗增加；,D 拿管的手要保持干净，带血渍的手指不要接触管的两端，易造成凝血，可用醇水擦洗。,Page,9,大鼠眼眶取血流程,4固定采血,Step4.固定身体，,压,住,后肢,，放,松手指,，,调整毛细管,，流畅出血。,Step 4,A 一般血流速度快，证明插破了眼眶动脉，如果血流速度慢，证明要调整毛细管的位置，血液都流到组织中了，没顺毛细管流出来；,B 出血过程中如遇到出血不畅 不用着急拔毛细管 可以调整一下毛细管的扎入位置 或深或浅的挑正一下 血会重新流出；,C 如看见血液已经在毛细管中凝固 必须迅速拔除毛细管，再搽干净眼睛，重新换管扎针；,D 等到出血后 将,力道转移到大鼠的身体,上 大鼠出现乱动的情况很大的一部分力是他的,后肢,使出来的 保证她的后肢无法乱蹬就能很好的保定大鼠，然后将中指和食指处,解除一半的力道,，可以保证血液的顺畅,Page,10,大鼠眼眶取血流程,5去管止血,Step5.取血完成，立即,除,去颈部压力，将采血器,拔,出，按压,止,血,Step 5,A 当得到所需的血量后，即,除去,加于颈部的,压力,，同时，将采血器拔出，以防止术后穿刺孔出血。,B 尽量把眼睛周围的血渍搽干净，避免结块影响下次取血。,6样品摇匀,Step6.血样管轻,轻混匀,，防止凝血、溶血,Page,11,大鼠眼眶取血流程,大鼠眼眶取血流程,Page,12,大鼠眼眶取血流程,Page,13,大鼠眼眶取血流程,Page,14,Page,15,大鼠眼眶取血流程,Page,16,Page,17,大鼠眼眶取血流程,Page,18,大鼠眼眶取血流程,Page,19,大鼠眼眶取血流程,大鼠眼眶取血流程,Page,20,大鼠眼眶取血流程,Page,21,血样处理,血样处理,血清 不抗凝,血浆 肝素钠抗凝,A全血,37,水浴,0.5,1,h,，,短时间内,（,30 min,）,低速（,4000,）,离心（,10min,）,离心,，取上清液，,低温保存,B,全血,室温静置,0.5,-,1,h,，,低温,冰箱,过夜,）,离心,，取上清液，,低温保存,Page,22,血浆/全血（V/V）,前五点低于40%,-,后续,60%,转载自网络，,谢谢！,
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