流式细胞术简介及应用进展

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2017/2/27,#,流式细胞术在临床及科研中的应用,1、,流式细胞术的基本原理,2、,流式细胞术在临床及科研中的应用,3、,流式细胞术临床应用的新进展,Main contents:,一、流式细胞术的基本原理,定义：,以流式细胞仪为主要工具，对处在快速直线流动状态中的细胞或生物颗粒细胞的各种成分进行多参数、快速的定量分析和分选的技术。,FCM,是诸如,生物学,、,生物技术,、,计算机科学,、,流体力学,、,激光技术,、,高等数学,、,临床医学,、,分子生物学,、,有机化学,和,生物物理学,等到学科知识综合运用的结晶。,现代流式细胞术，更是由于结合了,单克隆抗体技术,、,定量细胞化学,和,定量荧光细胞化学,的应用，使其在生物学、临床医学、药物学等等众多研究领域的应用有了更加突飞猛进的发展,1、流式细胞术（,FCM）,的概述,临床型,小型，科研与临床结合型,科研型,大型，基础研究和加速分选型,FCM,主要分两种类型：,流式细胞仪,Flow cytomter,FCM,流式细胞术,Flow cytometry,FCM,激发荧光细胞分选仪,Fluorescence activated,cell sorter,FACS,（BD,公司）,电子程序化单细胞分选仪,Electronically,programmable individual cell sorter,EPICS,(Coulter,公司）,BD FACSCalibur,型,FCM,（,单,L，3F）,Coulter EPICS XL/XL-MCL,（,单,L，4F）,BD FACSVantage SE,（14F，four-way sorting）,Coulter EPICS ALTRA,（空/水冷,L，6F）,BD LSR,（3L，6F）,Coulter:FC 500,BD FACSCount,CD348,专为,HIV,监测设计的经济普及型流式细胞仪,BD FACSAria,BD FACSCanto 2L 6C,BD,FACS Calibur 1L 4C,三、流式细胞术应用的新进展,高速度：,分析细胞数：1000个/,s60000,个/,s,高灵敏度：,荧光分子数/细胞：3000100个,FITC；,高准确度：,区分两个细胞：参数：相差5%1%；,高精度：,CV,值：7%1%;,多参数：,荧光：1个 12个参数；,高纯度：,分选细胞：80-90%99.9%;,其 它：,荧光信号：线性检测对数检测,光谱重叠：补偿修饰剔除联体细胞及碎片,1、,Quantitative FCM,(QFCM),定量流式细胞术,（,Quantitative FCM,QFCM）,是用流式细胞仪对特定细胞表面抗原进行绝对定量。其基本原理是采用某种标准物质获得一条标准曲线或线性方程，然后获得待测抗原绝对分子数。,2、cytometric bead array,(CBA),微球流式芯片技术,(,CBA),是一种微球多参数检测分析技术，它用一系列的微球组合来捕获并结合流式细胞术检测溶液中被检测物质的量，其采用夹心法分析策略。用已知的标准品和对照标准曲线就可得出被测样品的浓度。这种检测方法，既不受样品量的限制，也可同时检测多项指标参数；客观、省时、人为因素影响小。,Principle of CBA,:,微粒体 探针分子 待测分子 报告分子,CBA,反应微球探针,复合体,结构模式图,(如可溶性血清蛋白分子的,CBA,检测）,Thanks for your attention!,