组织培养课件器官培养

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第五章,器官和组织培养,植物某一器官的全部或部分或器官原基的离体培养，包括根、茎、叶、花、果实、种子等。,特点：能保持器官所具有的特征性结构。,指形成层组织、分生组织、表皮组织、薄壁组织和各种器官组织以及愈伤组织的培养。,器官培养（Organ culture）,组织培养（Tissue culture）,一、茎的培养,1、类型,茎尖培养：,茎段培养：,嫩茎段常作为快速繁殖的外植体：即当年萌发或新抽出的尚未完全木质化的枝条，其细胞的可塑性大，容易离体培养。,10-100,m的茎尖分生组织（脱毒）,带有腋(侧)芽或叶柄、长几厘米的茎节段进行离体培养,（快繁）,将经过表面,消毒的茎段,在无菌条件下，切成几厘米长,带节的节段,，接种在固体培养基上。经过培养后，在茎段可,直接发生不定芽,，或先诱导形成,愈伤组织,，再,脱分化形成再生苗,。把再生苗进行切割，转接到,生根培养基,上培养，便可得到完整的小植株。,2、作用,无性系快速繁殖；,培养无病毒苗，品种改良；,理论基础研究。,3、建立无菌材料（,茎段,）及培养,图示茎段培养过程,健康植株上选健壮的枝梢,去叶片用自来水冲洗,再生,培养,MS培养基,75%酒精1分钟,1%,次氯酸钠,0.1%升汞,4、茎的培养发育方向,腋芽萌发,脱分化后产生胚状体（原球茎）,脱分化后直接产生不定器官,离体繁殖,建立悬浮系或分化胚状体及不定芽,脱分化后形成愈伤组织,蝴蝶兰腋芽萌发,5、影响发育方向的因素,外植体大小,培养条件,培养基生长调节剂种类和浓度,微形外植体或分生组织易产生愈伤组织,细胞分裂素和生长素的配比是关键。,21-25，12小时光照/天,举例：影响月季茎段增殖培养的因素,1腋芽在茎段上的位置,。每段的一个腋芽培养在无激素的基本培养基上，23天后，接近枝条最顶端的和紧挨着枝条基部的芽发育最慢，而枝条中部的芽发育最快。,2去茎顶端的作用,。继代培养接种时切去嫩茎的顶芽后，再转接于新鲜培养基上培养，促进嫩茎的增殖。,3嫩茎长度对形成多芽苗的影响,。茎段为1-10 mm长短时，对形成多芽苗最有效，而且每个茎段的侧枝数也较多，若切割过短(小于1mm)或过长(11-15mm)都对茎的增殖不利。,4植物生长调节剂的影响。,采用适当浓度的植物生长抑制剂三碘苯甲酸可以促进嫩茎增殖。,6-BA是促进茎增殖最有效的细胞分裂素，浓度在1-3mg/L，浓度高会减少茎的伸长，也对下一步生根起抑制作用。,用1 mg/L 6-BA配合1mg/L NAA，虽然使茎的增殖略有降低，但可使茎得到伸长。赤霉素抑制月季茎的增殖。,二、根的培养,离体根由于具有生长迅速、代谢活跃及在已知条件下培养，可根据需要增减培养基中的成分等优点，对离体根的培养多用于探索植物根系的生理及其代谢活动。,在离体根培养中，自然条件下生长在土壤中的根要解决消毒问题，是非常困难的，常用无菌苗的根作为培养材料。,番茄根的培养过程,番茄种子常规表面消毒，在无菌条件下，在培养基上萌发。,胚根长至30-40 mm后，从根尖一端切取10 mm长接种于固体培养基中。,暗条件下培养4天有侧根发生，7天后又可以切下侧根的根尖作为新的培养材料再进行扩大培养。,由单个直根衍生，并经继代培养而保持遗传性一致的根的培养物，称为离体根的无性系。,硫胺素,(,维生素,B1),和吡哆醇,(,维生素,B6),对离体根培养的作用明显。,碘有利于番茄根的生长。,硼对离体根的生长也具有重要的影响，缺硼会降低根尖细胞的分裂速度，阻碍细胞伸长等。,生长素对不同植物的根离体培养三种反应：,生长素,促进,离体根的生长,(,如玉米、小麦等,),；,离体根的生长,依赖,于生长素的作用,(,如黑麦,),；,生长素,抑制,离体根的生长（樱桃，番茄）。,三、叶的培养,很多植物（非洲紫罗兰、香叶、天竺葵、秋海棠等）的叶片具有很强的,再生能力,，由于取材方便，,数量多,且,均一性,较强，可以作为适宜的外植体。,基本培养过程,取叶片 表面消毒 平放在固体培养基上培养,大多植物的叶组织在离体培养条件下先形成愈伤组织，再分化出胚状体、茎、叶和根。,1.将叶表面洗干净，70乙醇浸泡30秒表面消毒，用0.1升汞,浸泡数分钟,。,2.叶片在培养基上的生长状况大多依赖于,离体时的成熟程度,，幼叶比近成熟的叶生长潜力大。,叶片,诱导丛生芽,生根培养,移栽。,非洲紫罗兰嫩叶，70酒精略蘸一下，再0.1升汞溶液消毒5-8 min，无菌水冲洗数次，切成0.5-1 cm的小块接种于,MS+1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,光照条件下培养，35天后叶片直接分化出丛生芽。,小丛生芽转接于1/2 MS+0.2 mg/L IBA的培养基上，10天后，主茎叶片明显增大，诱导根分化，接种15天后即可移栽。,举例：非洲紫罗兰嫩叶离体培养的过程,思考题,茎的培养基本过程,根的培养基本过程,叶的培养基本过程,