荧光定量PCR检测乙肝病毒-DNA的临床意义

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,定量PCR检测乙肝病毒-DNA的临床意义,金域医学检验中心,一、流行病学,HBV感染呈世界性流行，但不同地区HBV感染的流行强度差异很大。据世界卫生组织报道，全球约20亿人曾感染过HBV，其中3.5亿人为慢性HBV感染者，每年约有100 万人死于HBV感染所致的肝衰竭、肝硬化和原发性肝细胞癌(HCC),二、病原学,乙型肝炎病毒(HBV)属嗜肝DNA 病毒科(hepadnaviridae)，基因组长约3.2kb，为部分双链环状DNA。,HBV 含个部分重叠的开放读码框(ORF)，即前SS 区、前CC 区、P 区和X 区。前S/S 区编码大(前S1、前S2 及S)、中(前S2 及S)、小(S)3 种包膜蛋白；前C/C 区编码HBeAg 及HBcAg；P 区编码聚合酶；X 区编码X 蛋白。,HBV由于基因序列的不同又可以分为A-H八种基因型.,三 乙型肝炎的发病机制,HBV是通过刺激宿主的免疫系统攻击受感染肝细胞来间接地引起肝损伤。,受HBV感染的肝细胞在其表面表达病毒蛋白质，成为CTL攻击的目标。,针对受染细胞的免疫反应引起炎症和坏死。,坏死-炎症活动持续存在导致肝纤维化。,四 实验室检测方法,一 传统实验室检测方法,1.血清学检测(两对半检测),HBsAg抗-HBs HBeAg 抗-HBe,抗-HBc 2.肝功能检测(ALT,AST),二新型实验室检测方法,1.乙肝病毒定量,2.赖药性基因检测,3.乙肝病毒基因分型,五 为什么要做乙肝病毒DNA定量,1.传统检测乙肝的方法为“乙肝两对半”和“肝功能”检测范围有限.(不能测定乙肝病毒复制情况、传染程度),2.乙肝病毒定量是直接检测乙肝病毒的核心成分乙肝病毒DNA.(能够直接了解病毒的载量,了解乙肝病毒复制情况、传染程度),例如:,1 小三阳的病情判断,2.HBsAg阳性或单一的抗 HBc阳性病情判断,3.二对半5项全部阴性病情判断,4.抗一HBs阳性病情判断,六 乙肝定量测定意义,1.定量方法使全程动态观察病毒含量成为可能,2.选择治疗时机,3.估计治疗反应,5.治疗后随访和检测复发,6.确定耐药株及选择合适的治疗方案,7.抗病毒药物疗效的评价和监测,8.抗病毒新药的研制,9.研究基因的表达情况,探讨某些疾病的致病机理,10.围产期保健,七 HBV-DNA在什么水平需要治疗,(1)HBV DNA定量（乙肝病毒DNA定量）105 拷贝/m l(HBeAg 阴性者为HBV DNA定量104 拷贝/ml)；,(2)ALT（谷氨酸氨基转移酶）2ULN（ULN正常值上限）；如用干扰素治疗，ALT 应10ULN，血总胆红素水平应2ULN；,(3)如ALT 2 ULN，但肝组织学显示Knodell HAI 4，或G2 炎症坏死。具有(1)并有(2)或(3)的患者应进行抗病毒治疗；对达不到上述治疗标准者，应监测病情变化，如持续HBV DNA定量阳性，且ALT 异常，也应考虑抗病毒治疗。,八 治疗方案,治疗的总体目标,慢性乙型肝炎治疗的总体目标是：最大限度地长期抑制或消除HBV，减轻肝细胞炎症坏死及肝纤维化，延缓和阻止疾病进展，减少和防止肝脏失代偿、肝硬化、HCC 及其并发症的发生，从而改善生活质量和延长存活时间。,慢性乙型肝炎治疗主要包括抗病毒、免疫调节、抗炎保肝、抗纤维化和对症治疗，其中抗病毒治疗是关键，只要有适应证，且条件允许，就应进行规范的抗病毒治疗。,九 具体治疗,1.抗病毒治疗,干扰素治疗,核苷（酸）类似物治疗,(拉米夫定等),免疫调节治疗,其他抗病毒药物及中药治疗,2 其他对症治疗,抗炎保肝治疗,抗纤维化治疗,谢谢大家！,谢谢大家！,