液相色谱分离法

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,12-5,液相色谱分离法,色谱法是一种,物理化学分离,方法,.,特点：,分离效率高,，可将各种性质相似的组分彼此分离,一、概述,叶绿素的石油醚溶液,石油醚,CaCO,3,CaCO,3,固定相,石油醚流动相,洗脱,洗脱,t,I,色谱分离法,色谱分离法是利用待分离组分在不相混容的两,相中分配的差异而进行分离，其中一相为固定相，,另一相为流动相，当流动相对固定相作相对移动,时，待分离组分就在两相之间反复进行分配，由,于不同物质的分配系数不同，造成其迁移速率的,差别，从而得到分离,。,色谱法,固定相固定方式,固定相、流动相状态,柱,色,谱,法,纸,色,谱,法,气,相,色,谱,法,液,相,色,谱,法,分,配,色,谱,法,吸,附,色,谱,法,离,子,交,换,色,谱,法,薄,层,色,谱,法,分离机理分类,凝,胶,色,谱,法,二、液固吸附柱色谱法,当试液加在色谱柱上方后，待分离组分就被吸附,在柱的上端，再用流动相从柱的上方进行淋洗。如,A,、,B,两组分，假定固定相对,A,的吸附大于,B,，,A,先吸,附在固定向上而后才是,B,，当进行洗脱时，经过解,吸，吸附，由于,A,比,B,从固定相解吸进入流动相较困,难，使,A,下行速度较慢，经过相同时间，在色谱柱,上的位置就会出现,A,比,B,高。从而达到分离。,对洗脱剂的要求,:,1.,对组分的溶解度足够大,2.,不与试样组分和吸附剂发生化学反应,3.,粘度小,易流动,4.,有足够的纯度,三、纸色谱,以滤纸,为载体,被吸附于滤纸上的,水为 固定相,有机溶剂,(,展开剂,),为流动相,分离的实质是,分配比不同,的各组分在滤纸上,迁移速度不同,。（分配比大的组分较易进入有机相而较难进入水相，故随流动相上升的速度较快。）,取一大小适宜的滤纸条,在滤纸条的下端点上标准和试样,放在色谱筒中展开,取出，标记前沿，凉干,着色，分析,固定相：,滤纸上的,H,2,O,流动相,：,展开剂,溶剂前沿,组分斑点,a,b,原点,用比移值,R,f,表示某组分在滤纸上的迁移情况,R,f,=,=,R,f,取值范围 01,原点至斑点中心的距离,原点至溶剂前沿的距离,a,b,R,f,0.02,时，可采用,纸色谱进行分离。,特点：,测量需要量小，灵敏，分离,效果好，,但只适用于分离分配比,不同的物质,。,4.,纸上层析法分离,A,和,B,时,A,和,B,的比移值分,别为,R,f,(A)=0.45,R,f,(B)=0.67,为使分离后两斑,点中心距离为,3cm,层析用纸条长度至少应,是,。,10.,用纸上层析法分离,A,和,B,时，,A,和,B,的比移值,分别为,R,f(A)=0.45,R,f(B)=0.67,。为使分离后两,斑点中心之间的距离为,2.2 cm,，层析用纸条长,度最少应该是,cm,。,14cm,10,