诊断学——骨髓细胞学检查-课件

,内容,标题,GUANGXI,MEDICAL UNIVERSITY,*,标题,内容,骨髓细胞学检查,目的和要求,掌握骨髓穿刺的适应证,血细胞的发育规律,了解骨髓检查的方法和内容,细胞免疫分型,熟悉骨髓检查的临床应用,常见细胞化学染色,血象分析,我们该做什么检查？,特殊的临床检验,-,骨髓液制成涂片染色，观察细胞的数量、形态,-,结合临床和血象等资料,-,明确诊断、协助诊断、观察疗效、判断预后,或排除某些疾病,血液系统疾病诊断和鉴别诊断的重要手段之一,骨髓细胞学检查,骨髓检查,诊断、辅助,诊诊断血液,系统疾病,骨髓穿刺适应证,外周血象成分及形态异常,不明原因发热，肝、脾、淋巴结肿大,骨痛、骨质破坏、肾功能异常、黄疸、紫癜、血沉明显增加等,化疗后疗效观察,骨髓活检、免疫分型、染色体核型分析、微生物及寄生虫学检查,骨髓？,骨髓,：,位于骨松质腔隙中的一种海绵样、胶状组织,骨髓分类,：红骨髓（造血细胞）、黄骨髓（脂肪细胞）,骨髓组成,：结缔组织、血管、神经及造血实质细胞,造血微环境,：由血管系统、神经系统、基质细胞（血管外膜细胞、脂肪细胞、巨噬细胞、成纤维细胞、内皮细胞、网状细胞等）和细胞外基质构成，造血干细胞赖以生存的场所,。,骨髓,胶状、海,绵样组织,红骨髓,各种造血细胞,微环境,骨髓组成及细胞生成,多能（向）造血干细胞,髓系干细胞,淋巴系干细胞,红系祖,细胞,粒,-,单系祖细胞,巨核系祖细胞,嗜酸粒系祖细胞,原红细胞,早幼红,细胞,中幼红,细胞,晚幼红细胞,网炽红细胞,嗜碱粒系祖细胞,原粒,细胞,T-淋巴系祖细胞,B-淋巴系祖细胞,原浆细胞,原单细胞,原巨核细胞,原粒细胞,原粒细胞,原淋巴,细胞,幼淋巴,细胞,淋巴细胞,早幼粒 细胞,晚幼粒细胞,中幼粒细胞,杆状,细胞,幼单细胞,单核细胞,幼巨核细胞,颗粒巨,核细胞,产版巨核细胞,裸核巨核细胞,血小板,嗜酸早幼粒,嗜酸中幼粒,嗜酸晚幼粒,嗜酸杆状,细胞,嗜酸杆状,细胞,嗜酸分叶 细胞,嗜碱性早幼细胞,嗜碱中幼细胞,嗜碱晚幼细胞,嗜碱杆状细胞,嗜碱杆状细胞,嗜碱分叶细胞,淋巴细胞,淋巴细胞,浆细胞,单核细胞,单核细胞,杆状细胞,分叶,细胞,网炽红,细胞,红细胞,幼浆细胞,血细胞发育演变图,原,始,细,胞,幼,稚,细,胞,成,熟,细,胞,原始细胞、幼稚细胞及成熟细胞,基本特点,胞体,:,较大 核仁：清晰，易见；,胞核,:,大、圆形、类圆形或不规则形；胞浆：少、蓝色（嗜碱性）,核染色质：细致，呈颗粒状；颗粒：无或少许,粒），核浆比,增大,。,原始细胞,幼稚细胞,胞体：中等大小；核染色质：较粗；,胞核：圆形或类圆形；核仁：多数无,胞质：增多，呈嗜碱性（蓝色）；颗粒：多数有颗粒,（,有核红细胞例外,）,成熟细胞,胞体：较小；,胞核：分叶、扭曲或有切迹（红细胞和血小板无核）,胞质：多，淡蓝色、淡红色，核质比小（小淋巴细胞除外）,核仁：无；染色质：粗；颗粒：有,血细胞发育成熟的一般规律,骨髓细胞学检测的临床应用,诊断造血系统疾病,白血病、恶组、,MM,、,AA,、,MA,、戈谢病、尼曼病、,海蓝组织细胞增生症,、,MDS,等。,辅助诊断某些疾病,恶性肿瘤细胞骨髓转移、,淋巴瘤骨髓浸润，骨髓增生异常综合征、骨髓增生性疾病、,IDA,、溶血性贫血、脾亢、,ITP,提高某些疾病的诊断率,疟原虫、黑热病、噬血细胞综合征、,SLE,常见血液系统疾病,各种贫血,：,IDA,、,MA,、,HA,、,AA,、,MDS,各种类型的白血病,：,AL(AML,ALL),慢性白血病（慢粒，慢淋等）,多发性骨髓瘤、淋巴瘤,类脂质疾病,：戈谢病，尼曼,-,匹克病，海蓝组织细胞综合征,白血病：,骨髓中原始细胞,20%,M1,M3,M2,M4,L2,M5,L1,L3,戈谢病,MM,M6,尼曼,-,匹克病,CLL,CML,ITP,M7,AA,IDA,MA,HA,骨髓细胞学检验的方法和内容,低倍镜观察,-,取材、涂片、染色,-,有核细胞增生程度,-,计数巨核细胞,-,有无异常细胞,油镜观察,-,分类计数,-,形态变化,结果计算,-,各类细胞,%,-,粒红比值,描述,-,骨髓象,-,血象,分析与报告,-,增生程度,-,粒红比值,-,各系数量、形态,-,综合分析,-,出具报告,病例归档,-,申请单,-,涂片,-,报告单,1,、低倍镜观察,(1),判断骨髓涂片质量：观察涂片厚薄、骨髓小粒多少、油滴、色泽等，选择满意的区域进行有核细胞分类、计数,涂片和取材,A-,涂片比较：上下两张太短或太长，不符,合要求；中间的涂片长短厚薄适宜且片,膜居中，符合要求。,B-,下面的涂片取材较好，有较多骨髓小粒,染色比较,A-,偏酸，细胞核、颗粒结构不清楚，红细,胞染色偏红,B-,较好，细胞核结构、颗粒、胞浆染色好,、红细胞染粉红色,C-,偏碱，细胞核、胞浆染色太深，细胞不,易辨认，红细胞染成蓝色,观察部位的选择,A-,涂片头部细胞密集、细胞染色差，结构不,清，不能识别,B-,涂片体尾交界处细胞分布均匀、细胞染色,较好，是合适的细胞形态观察部位,C-,涂片尾部细胞破损、变形，不合适观察,(2),判断骨髓增生程度,-,骨髓中有核细胞的多少反映出骨髓增生程度,-,采用五级分类法,骨髓增生程度分级及标准,A-,增生极度减低,；,B-,增生减低；,C-,增生活跃；,D-,增生明显活跃；,E-,增生极度活跃,（,3,）计数巨核细胞,-1.5cm3.0cm,骨髓片膜内，巨核细胞,7-35,个，主要为产板型,（,a),颗粒型巨核细胞（,b),产血小板型巨核细胞（,c),巨核细胞裸核（,d),血小板,（,4,）全片观察,-,有无体积较大或成堆分布的异常细胞（尤其血膜边缘部位），如骨髓转移癌,、恶组细胞、淋巴瘤细胞、戈谢细胞、尼曼,-,匹克细胞、海蓝组织细胞等,戈谢细胞：大量葡萄糖脑苷脂在巨噬细胞中蓄积形成形态特,殊的戈谢细胞，其胞浆中见许多系蓝色波纹状纤维样物质,尼曼,-,匹克细胞：大量神经鞘磷脂在巨噬细胞中蓄积形,成的形态特殊的细胞，其胞体较大，胞浆呈泡沫样,2,、油镜观察,（,1,）分类计数,200,500,个有核细胞，分别计算各系各阶段细胞所占,百分率并注意观察各细胞形态有无异常。,（,2,）计算粒红比值（,M,：,E,）,-,以粒系细胞总百分率除以幼红细胞总百,分率，正常成人约为,2,4,：,1,（,3,）观察有无特殊细胞及寄生虫,（,4,）描述成熟红细胞形态,:,大小、形态、血红蛋白含量、红细胞中,异常结构，红细胞排列等,粒红比值变化的临床意义,M:E,正常,-,正常骨髓象,-,粒红两系以外的造血系统疾病,如,ITP,、,MM,-,粒红两系平行增多或减少,如红白血病、,AA,M:E,增高,-,粒系明显增多时,粒细胞性白血病,急性化脓菌感染,-,红系严重减少时,如纯红再障,M:E,减少,-,粒细胞减少时,如粒缺；,-,红系增多时，,如各种增生性贫血,大致正常骨髓象,有核细胞增生活跃,各系、各阶段有核细胞所占百分比在正常参考范围内,各种血细胞形态无明显异常,无寄生虫和明显异常细胞,常用骨髓细胞化学染色,POX,染色,-,用于急性白血病的鉴别,急粒：强阳性,急单：弱阳性,/,阴性,急淋：阴性,NAP,染色,-,化脓菌感染,，病毒性感染,-,慢粒,甚至为,0,，类白血病,-,急粒,，急淋,，急单,N,或,-AA,，,PNH,-,淋巴瘤、,CLL,、,PV,、,ET,、,MF,，恶组,ACP,染色,-,HCL,：阳性,-TALL,阳性，,BALL,阴性,-,戈谢病阳性，尼曼病阴性,-,单核细胞、组织细胞、网状细胞、巨核细胞均阴性,常用骨髓细胞化学染色,SE,染色,-,急粒：强阳性,-,急单：阴性,-,急粒单：粒细胞阳,性，单核细胞阴性,AE,染色,-,用于急单和急粒鉴别,急单：强阳性，被,NaF,抑制,急粒：弱阳性,/,阴性，不被,NaF,抑制,PAS,染色,-M6,幼红细胞,阳性,-,急粒：阴性或弱阳性，阳,性呈弥漫细颗粒状淡红色,-,急单：阳性，呈弥漫均匀红色或细颗粒状,-,急淋：阳性，呈粗颗粒或块状,-,巨核细胞：阳性,Fe,染色,-IDA,内、外铁阴性,-,非缺铁性贫血,外铁常,3+,4+,-RAS:,环形铁粒幼细胞,15%,M1-POX,M2-POX,ALL-POX,M5-POX,ALL-POX,M4-POX,M5-POX,M3-POX,M5-POX,M5-POX,M5-POX,M5-POX,M5-POX,M5-POX,ALL-CE,M3-CE,M1-CE,M3-CE,M1-AE+NaF,M1-AE,M5-AE+NaF,M5-AE,NAP,化脓菌感染-NAP,CML-NAP,ALL-NAP,L2-ACP,c单核细胞-PAS,b巨核细胞-PAS,a成熟粒细胞-PAS,ALL-PAS,T急淋-ACP,CLL-PAS红色粗颗粒状阳性,M6-PAS,MA-PAS,d幼红细胞-PAS,IDA,铁染色,:,细胞内铁阴性，幼红细胞内未见铁颗粒,铁粒幼红细胞,环形铁粒幼红细胞,铁粒幼红细胞,IDA,铁染色,:,细胞外铁阴性，,急性白血病细胞化学染色特点,细胞免疫分型,用单克隆抗体及免疫学技术,对细胞膜表面和（或）细胞,质存在的特异性抗原进行检,测，借以分析细胞所属系列,，分化程度和功能状态的一,种方法。,检测方法,1,、免疫荧光法,用荧光素标记的单克隆抗体，在一定条件下与细胞表面的分化抗原结合，经激发光照射产生荧光。借助流式细胞仪观察荧光抗原。有荧光者为阳性，无荧光者为阴性,2,、免疫酶染色法,细胞免疫分型的临床应用,T,淋巴细胞亚群检测,全,T,细胞,-CD3,、,CD4,和,CD8,T,细胞,-TH(CD4,+,、,CD8,-,）,-TS(CD4,-,、,CD8,+,),CD4,+,/CD8,+,：机体免疫状态、,疾病诊断、病情分析、监测,治疗和判断预后,白血病免疫分型,1,、明确诊断,ALL,和,AML,ALL-CD2CD5CD7CD10CD19CD20,AML-CD13CD33MPOCD15CD14HLA-DR,2,、确定,ALL,的细胞类型（,B,细胞或,T,细胞）和,ALL,的分化阶段,3,、鉴定,AML,的特征,4,、少见类型的白血病，,M6,、,M7,、,M0,、双表型、,CLL,、毛白、,MM,白血病微小残留病检测,完全缓解的白血病，出现,CD19,、,CD22,、,CD10,、,CD7,、,CD5,、,CD,13,、,CD37,、,CD34,等任何一种抗,原阳性同时伴有,TdT+,可诊断微小残留存在。,敏感性达,10,-4,ALL,与,AML,的免疫表型特点,急性淋巴细胞白血病的免疫表型特点,急性髓细胞白血病的免疫分型,