《白假丝酵母菌》PPT课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,真菌,*,第二十二章,白假丝酵母菌,10/5/2024,1,真菌,重点,1.白色假丝酵母菌的生物学特性,2.白色假丝酵母菌的微生物学检查,10/5/2024,2,真菌,真菌学概述,概念：,是一类有典型的细胞核和完善的细胞器，不含叶绿素，无根、茎、叶分化的真核细胞型微生物。,10/5/2024,3,真菌,真菌的,形态特性,（一）单细胞真菌呈圆形，如酵母菌。,（二）多细胞真菌由菌丝和孢子组成，,称丝状菌或霉菌。,菌丝和孢子的形态因菌而异，是鉴定真,菌的重要依据。孢子又分为多种，如叶,状孢子、分生孢子和孢子囊孢子等。,10/5/2024,4,真菌,单细胞真菌,酵母菌：孢子，无菌丝,类酵母菌：芽生孢子，假菌丝,多细胞真菌,丝状菌,（霉菌）：孢子和菌丝,菌丝和孢子的形态因菌而异，是鉴定真菌的重要依,据。孢子又分为多种，如叶状孢子、分生孢子和孢,子囊孢子等。,真菌的,形态特性,10/5/2024,5,真菌,单细胞真菌形态,10/5/2024,6,真菌,类酵母菌白假丝酵母菌,孢子,假菌丝,10/5/2024,7,真菌,多细胞真菌形态,10/5/2024,8,真菌,真菌菌落特性,1,酵母型菌落,：,是单细胞真菌的菌落，形态与细菌,菌落相似，较大，表面光滑湿润柔软、边缘整齐，如,新生隐球菌。,2.,类酵母型菌落,：,如白假丝酵母菌，形成假菌丝，,伸入培养基中。,3,霉菌型菌落,：,是多细胞真菌的菌落。菌落呈棉絮,状、绒毛状，并产生不同的色素，如皮肤癣菌。,10/5/2024,9,真菌,酵母型,菌落,10/5/2024,10,真菌,类酵母型,菌落,10/5/2024,11,真菌,霉菌型菌落菌,10/5/2024,12,真菌,培养特性,真菌培养要求不高，常用沙氏(Sabouraud)培养基,(含1蛋白胨、4葡萄糖或麦芽糖、2琼脂)培,养，适宜温度2228，但深部真菌为37。适宜,PH值为。,菌落是鉴别真菌的方法。注意以下几点：,菌落性质：酵母菌还是霉菌；,菌落大小，病原性真菌菌落小，而条件致病性真菌菌落大；,菌落颜色 病原性真菌颜色淡，污染真菌颜色深；,致病性真菌菌落下沉，有时使培养基开裂；污染性真菌菌落不下沉,很少引起开裂,。,真菌依靠孢子及菌丝进行无性或有性繁殖,10/5/2024,13,真菌,变异性抵抗力,易发生变异,形态、培养性状和毒力等,抵抗力较强,对干燥、紫外线及一般消毒剂抵抗力强对热敏感，,601小时菌丝、孢子均被杀死对2%石炭酸、,0.1%升汞、2.5%碘酊或10%甲醛敏感对作用于,细菌抗生素不敏感，对二性霉素B制霉菌素、咪康,唑,、酮康唑、氟康唑和伊曲康唑敏感。,10/5/2024,14,真菌,致病性与免疫性,致病性,1.致病性真菌感染：,浅部真菌：角蛋白酶、机械刺激、代谢产物,深部真菌：慢性肉芽肿、组织溃疡,2.条件致病性真菌：假丝酵母菌,3.真菌超敏反应性疾病,4.真菌性中毒症,5.真菌毒素与肿瘤,免疫性,天然免疫,获得性免疫： 体液免疫、 细胞免疫,10/5/2024,15,真菌,真菌感染的病原学诊断,标本的采集,临床标本类别：,1皮肤的角质性物质：毛发、指(趾)甲、皮屑等。,2各种分泌物和排泄物：生殖道、分泌物、耳垢、痰、,粪便、尿 液等。,3血液和体液：体液包括胸水、腹水、脑脊液、淋巴穿,刺液等。,4脓汁及渗出物。,10/5/2024,16,真菌,采集标本注意事项：,1.采集的标本要适宜 不同真菌感染应采取不同的临床标本。,怀疑为浅部真菌感染如体癣，应刮取病变边缘的痂、皮屑，发,癣应取病发。深部真菌感染应取血液、脑脊液、脓汁等。,2在用药前采集标本 一般真菌标本须在用药前采集，对已,用药者则需停药一段时间后再采集标本。,3采集的标本量要足 血液和脑脊液5ml，胸腔液20ml，皮屑,标本两块，活体组织两份(一份病理检查，一份镜检和培养)。,4严格无菌操作 并进行消毒处理，尤其是采集血液和脑脊,液标本，要避免污染杂菌。,5采集标本立即送检 深部真菌标本最长不得超过2h。,10/5/2024,17,真菌,检验程序,P354,检验方法,直接检查不染色和染色镜检,10/5/2024,18,真菌,培养检查法,培养基的选择,培养方法：直接法、试管法、大培养、小培养,真菌的鉴定,生化反应,用于主要深部感染真菌如假丝酵母菌、隐球菌等。,1.糖(醇)类发酵试验 37孵育，观察糖发酵情况。,2.同化碳源试验 含菌生理盐水与已融化的固体同化碳源培养,基(45)混合，然后在培养基上分别加糖，置25孵育观察,结果。若24h后无变化可重复加糖。如能同化周围有生长圈，,否则无生长。,3.同化氮源试验 同化碳源试验相同，但需用无氮源的培养基，不要加糖类，而加入硝酸钾。,4.明胶液化试验、尿素分解试验、测定淀粉样化合物,5.分解牛乳试验,10/5/2024,19,真菌,抗原检测,常用的方法有胶乳凝集试验、ELISA、半定量放射免疫法。均,应设对照，防止发生假阳性和假阴性,。,动物实验,实验的目的是分离病原性真菌、确定真菌菌种的致病性、研究,药物对真菌的作用等。如假丝酵母菌接种家兔或小白鼠，肾脏,明显肿胀，肾皮质部位有白色脓疡。,核酸检测,从核酸碱基G+C mol分析、限制性片段长度多态性(RFLP)、,Southern印迹分析到脉冲场凝胶电泳(PFGE)、PCR指纹、随机,扩增多态性DNA(RAPD)以及DNA特殊片段测序等。,10/5/2024,20,真菌,主要致病性真菌,真菌按其侵犯部位和临床表现分为：,表面感染真菌,浅部感染真菌 皮肤癣真菌,皮下组织真菌感染,深部感染真菌： 新生隐球菌,条件致病性真菌：假丝酵母菌,10/5/2024,21,真菌,深部感染真菌,深部真菌是侵犯皮下组织和内脏，引起全身性感染的真菌。,多数能引起慢性肉芽肿样炎症、溃疡及坏死等病变,深部感染真菌分两大类：,1. 致病性真菌：,此类真菌在正常人体内部不存在，一旦侵入机体，即可致病，如组织胞浆菌、球孢子菌、芽生菌等，属外源性，我国少见；,2. 条件致病性真菌：,是人体正常菌群的成员，当机体抵抗力下降时才致病，如新型隐球菌、白色念珠菌、曲霉菌和毛霉菌等。,10/5/2024,22,真菌,假丝酵母菌俗称念珠菌，有81个种，其中有11种对人有致病,性：白假丝酵母菌、为最常见的致病菌。此外，热带假丝酵母,菌、克柔假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌也较多引起疾病。,白假丝酵母菌,（canidia Albicans）又称,白色念,珠菌,，广泛存在于自然界，也存在于正常人,口腔，上呼吸道，肠道及阴道，一般在正常机,体中数量少，不引起疾病 。,为条件致病性真,菌。,10/5/2024,23,真菌,1微生物特性,白假丝酵母菌呈圆形或卵圆形，直径2-4,m。革兰阳性。出芽方式繁殖，在组织内可见芽生孢子、假菌丝，孢子可伸长成芽管，如不与母细胞脱离而形成假菌丝。,10/5/2024,24,真菌,营养要求不高，在普通琼脂、血琼脂、和沙保培养基,均生长。需氧，室温或37，甚至42生长良好。菌,落呈酵母样，,有大量向下生长的营养假菌丝，,表面光,滑，呈灰白色或奶油色，有酵母味，如时间长，菌落,增大成蜂窝状。在玉米粉吐温-80培养基中可长出厚膜,孢子。,沙氏斜面,普通平板,血平板,10/5/2024,25,真菌,条件致病,：,皮肤粘膜感染,鹅口疮,，阴道炎,内脏感染：肺炎、关节炎、膀胱炎，肾盂肾炎,中枢神经感染：脑膜（脑）炎、脑脓肿,2致病性和免疫性,本菌可侵犯人体许多部位，,机体也可它产生的免疫力,过敏,10/5/2024,26,真菌,3微生物检验,1.标本采集：所致疾病不同，取不同标本。2.检验程序P3543.,检验方法及鉴定,1）,直接显微镜检查：取脓汁、痰和局部炎症性分泌物直接涂片，有些标本需用KOH先消化，革兰染色后镜检，显微镜见到革兰阳性(着色不均匀)、圆形或卵圆形菌体或孢子及假菌丝，厚膜孢子较少见。,10/5/2024,27,真菌,2）,培养检查：将标本接种在沙氏培养基上，25或37培养12d后，可出现奶油色类酵母型菌落。镜检可见假菌丝和芽生孢子。,10/5/2024,28,真菌,3)鉴定试验,芽管形成试验：将假丝酵母菌接种于0.20.5ml血清中，37孵育1.5h观察有无芽管形成。白假丝酵母菌可形成芽管，其他假丝酵母菌不形成芽管。,芽管,芽管,芽管,10/5/2024,29,真菌,厚膜孢子形成试验,：,将假丝酵母菌接种于玉米粉培养基25孵育1-2d,后，白假丝酵母菌在菌丝顶端、侧缘或中间形成厚,膜孢子。,厚膜孢子,10/5/2024,30,真菌,糖同化和,糖发酵,试验：,凡发酵某种糖一定能同化该糖，故只需做那些不发,酵糖的同化试验。将假丝酵母菌接种糖发酵管，25孵,育，一般观察23d，对不发酵或弱发酵管可延长至10d,或24周。观察有无酵母生长或液体培养基是否变混,浊。现在商品化的产色培养基可快速鉴定白假丝酵母菌,和其他假丝酵母菌,。,10/5/2024,31,真菌,TZC试验,：,将白色念珠菌接种于含0.005氯化三本四氮唑的沙保,培养基中，经2225，2448h培养，白色念珠菌不,变色或仅淡红色，其他念珠菌或酵母菌呈红色或深红,色(,被还原为红色的三苯甲),。,血清学试验：取病人血清作ELISA、免疫印迹法等检测白假丝酵母菌抗原。,核酸检测：用PCR法将白假丝酵母菌DNA分子扩增后以分子探针检测，具有较好的敏性和特异性。,动物试验 ：,10/5/2024,32,真菌,新型隐球菌,新型隐球菌又名溶组织酵母菌，是土壤，鸽类，牛乳、水果等的腐生菌，也可存在人口腔中。,可侵犯人和动物，一般为外源性感染，但也可能为内源性感染，对人类而言，它通常是条件致病菌。,10/5/2024,33,真菌,较大球形，直径可达520um，,有肥厚的荚膜，折光性强，一般染料不易着色，难以发现，称隐球菌，,用墨汁阴性显影法镜检 ，可见到透明荚膜包裹着菌细胞，,菌细胞常有出芽，但不生,成假菌丝。,生物学特性,10/5/2024,34,真菌,在沙保氏琼脂及血琼脂培养基上，于25及37皆可生长，而非病原性隐球菌在37不能繁殖。,酵母型菌落，呈白色。,本菌能分解尿素，以,此与酵母菌和念珠菌鉴别。,10/5/2024,35,真菌,致病性,本菌大多由呼吸道转入，在肺部引起轻度炎症，或隐性传染。,侵犯中枢神经系统，发生脑膜炎、脑炎、脑肉芽肿等。,此外可侵入骨骼、肌肉、淋巴结、皮肤粘膜引起慢性炎症和脓肿,。,10/5/2024,36,真菌,微生物学检验,1直接镜检：常用墨汁涂片法。,2分离培养：,在沙保培养基上，室温、3723天即可长出典型,酵母型菌落。有荚膜者菌落粘稠。,10/5/2024,37,真菌,3糖同化及发酵试验：,本菌不发酵各种糖类,，但能同化葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、半乳糖、肌醇，不同化乳糖。,4酚氧化酶试验：在含多巴橘橼酸铁和咖啡酸培养基中，经天培养，新型隐球菌出现,棕黑色菌落,。,尿素酶试验：新型隐球菌产生尿素酶，在尿素培养基（含尿素及酚红指示剂）中分解尿素形成氨和CO,2,，以致培养基的pH值升高，使酚红由黄变为粉红色为阳性，而白色念珠菌为阴性。,10/5/2024,38,真菌,谢谢,10/5/2024,39,真菌,临床标本,直接检查 分离培养 其它方法,核酸 直接 25 35 检测 检测 动物,检测 镜检 抗原 抗体 试验,菌落观察,固定标 墨汁 KOH法,本染色 染色,镜检 小培养 生化,荧 革 P 亚 反应,光 兰 A 甲,S 基,蓝,10/5/2024,40,真菌,